hsa-miR-125a-5p通过上调Rock-1表达促进肺癌细胞侵袭

背景与目的 MicroRNAs(miRNAs)是广泛存在于真核生物体中的内源性非编码的小分子RNA,通过与靶mRNA不完全互补连接的方式转录后调控靶基因的表达,影响了生物的许多复杂的生命过程.本研究探讨了hsa-miR-125a-5p促进肺癌细胞侵袭的作用机制.方法 应用microRNA.org靶基因预测资源预测hsa-miR-125a-5p的靶基因及其结合位点,并进一步根据预测结果用RT-PCR和Western blot的方法榆测了Rock-1的mRNA及蛋白的表达情况.用Rock-1抗体阻断的方法,检测转染正义的hsa-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核苷酸后A549细胞侵袭能力的变化.结果 转染正义的hsa-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核苷酸36h后,A549细胞中Rocb-1 mRNA和蛋白表达均增加,在转染反义的hsa-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核苷酸的A549细胞中则减少.Transwell小室的结果显示,与未阻断组相比较,阻断Rock-1后,转染正义的hsa-miR-125a-5p 2'-O-甲基寡核廿酸的A549细胞侵袭能力减弱.结论 hsa-miR-125a-5p能够上调Rock-1的表达,并促进肺癌细胞侵袭.     

间隙连接蛋白Connexin32对肝癌侵袭和转移能力的影响

目的:探讨肝癌细胞中间隙连接蛋白Connexin32对肝癌细胞体内侵袭和转移能力的影响.方法:利用可以通过增减细胞外环境中Doxycycline调控Connexin32蛋白表达的肝癌细胞HuH7 Tet-off Cx32亚克隆,将之原位移植到重度联合免疫缺陷鼠肝脏浆膜下,通过饮用水中添加(去除)Doxycycline调控动物体内Connexin32的表达,8周后处死小鼠,观察肿瘤形成及转移情况,蛋白质印迹法及免疫组织化学方法检测其与对照组的Connexin32蛋白表达情况.结果:移植HuH7 Tet-off Cx32细胞的小鼠,在饮用水中去除Doxycycline诱发Connexin32高表达条件下,形成明显的肝内转移灶和腹膜转移灶;而饮用水中添加了Doxycycline的小鼠没有发现明显的转移灶形成.免疫组化证实,高表达的Connexin32蛋白定位于细胞质.蛋白质印迹法结果显示,Doxycycline在小鼠体内呈现较好的诱导性.结论:细胞质内异位蓄积的Connexin32蛋白明显增强肝癌细胞的体内侵袭和转移能力.     

Rab22a调控细胞内吞和免疫功能

Rab22a是Rab家族的一个小GTP酶，显著改变多个膜转运步骤，Rab22a在细胞的初级内吞及质膜循环中发挥着关键的作用。Rab22a不仅参与初级内体的形成，还参与物质回收及质膜循环，介导多种效应蛋白和信号受体的转运。研究显示Rab22a与细胞免疫有着密不可分的关系，因为抗原呈递在很大程度上依赖于在多种细胞中发生的内吞事件和在分泌途径中转运事件的复杂调控，以及这两种途径之间的交联。另外，Rab22a在调节自噬中也具有特殊的功能。Rab22a作为膜循环及细胞内运输的重要调控因子，参与调控囊泡的形成、运输及融合的过程。