BMP2基因重组慢病毒载体质粒的构建及鉴定

目的构建重组慢病毒载体质粒pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP-2/T2A/EGFP并进行鉴定。方法从Genbank获得BMP2基因序列,结合载体上的酶切位点需要,设计上下游引物,通过PCR方法扩增目的基因片段,利用Gateway技术BP反应构建pDown-BMP2-T2A-EGFP,并进行阳性克隆测序,应用LR反应把pDown-BMP2-T2A-EGFP重组入慢病毒目的载体质粒pLV.Des2d.P/neo,进行阳性克隆测序。结果获得长度为1 191bp的BMP2目的基因片段,质粒pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP2/T2A/EGFP经双酶切后凝胶电泳鉴定正确,测序结果与Genbank报道序列一致。结论成功构建重组慢病毒载体质粒pLV.EX2d.P/neo-EF1A>BMP2/T2A/EGFP。     

去甲万古霉素-纤维蛋白胶磷酸钙人工骨的急性细胞毒性、抗溃散性和抗冲涮性研究

目的研究去甲万古霉素-纤维蛋白胶磷酸钙人工骨(norvancomycin-fibrin glue calcium phosphate cement,NV-FG-CPC)缓释系统的急性细胞毒性,体外评估其抗溃散、抗冲涮性能,为这种新型生物材料在临床应用提供实验依据。方法β-磷酸三钙、磷酸二氢钙及去甲万古霉素按一定质量比混合后充分研磨作为固相,按固液比1 g∶0.4 mL加入500 mmol/L柠檬酸溶液,并按人工骨与纤维蛋白胶体积比2∶1充分搅拌均匀,即制得含4%去甲万古霉素的新型复合磷酸钙人工骨。以单纯磷酸钙人工骨浸提液及正常培养基为双重对照,以复合材料浸提液为实验组,分别制得全培养液培养SD大鼠骨髓贴壁细胞,细胞融合至一定比例时计算其数量级,并测试材料抗溃散性和抗冲涮性。结果各组培养瓶内的骨髓原代贴壁细胞生长良好,接种后约14 d各组培养瓶内细胞融合率85%～90%,此时数量级均106.L-1,改良的体外模拟术中松质骨持续渗血模型测试材料抗冲涮性能结果与传统浸泡法结果一致。结论 NV-FG-CPC缓释系统对SD大鼠骨髓贴壁细胞无急性毒性作用,并且具有良好的抗冲涮性及抗溃散性。     

虚拟仿真技术构建三维模型在腰椎转移性肿瘤中的应用

背景：脊柱转移瘤往往破坏椎体和附件,患者会患有严重的疼痛,并发症发生率较高,例如截瘫和脊柱后凸畸形等.脊柱转移瘤治疗原则是早期诊断,手术完全切除,术后化疗.影像学技术如CT可判断脊柱转移瘤的转移情况,进行准确的术前定位.目前可视化仿真手术及虚拟现实技术已经逐渐应用于整形外科领域.目的：通过探索虚拟现实技术来寻找一种实行经前后路联合治疗腰椎转移性肿瘤的途径.方法：基于腰椎的64排螺旋CT连续薄层二维图像,Mimics软件分别重建正常腰椎、破坏病椎、腹主动脉及双侧肾脏的三维可视化结构,在三维模型拟行经前路病灶清除、钛网骨水泥支撑、后路椎弓根螺钉内固定.结果与结论：基于Dicom格式数据进行三维重建图像结构清晰,可真实再现腰椎病椎和邻近脏器的结构,整个虚拟仿真手术真实直观.虚拟仿真手术准确重建腰椎恶性肿瘤及邻近结构的三维立体结构,明确病椎清除范围,经后路重建脊柱序列,此方法可为个体化的治疗方案提供了客观的依据.     

金属对金属髋关节表面置换术的早期临床疗效及其并发症

髋关节表面置换术从20世纪50年代开始已经运用于临床,但由于早期的技术不成熟、股骨颈骨折发生率高、关节假体易磨损、假体早期松动率高等缺点,髋关节表面置换术到80年代几近消失。而全髋关节置换术（total hip arthroplasty,THA）在老年髋关节疾病患者中取得了良好的临床效果,但对年轻患者和对活动要求高的患者却不能提供理想的长久的临床疗效。从20世纪90年代中期以来,     

金属对金属髋关节表面置换术两种不同手术入路中假体位置的X线测量比较

[目的]了解外侧入路和后外侧入路两种不同入路中髋关节表面置换中假体位置的差异。[方法]72个关节中,分为两组:A组21例病人,共26个髋关节,采用Hardinge的外侧入路。B组44例,共46个髋关节,采用改良的Gibson入路,股骨头由关节后方脱出。测量的指标包括:(1)术前颈干角和术后股骨假体柄干角;(2)髋臼假体的外展角;(3)股骨假体的中心偏移距;(4)术前髋臼前倾角和术后髋臼假体前倾角;(5)股骨假体侧方中心偏移距;(6)股骨假体的侧方偏移角。[结果]股骨假体的柄干角A组为139.5°,B组为140.5°,2种入路间的柄干角无显著性差异;髋臼假体的外展角A组为37.7°,B组为44.4°;前倾角A组为21.6°,B组为15.2°。[结论]髋关节表面置换可以采用外侧入路和后外侧入路,股骨假体安放位置在两种入路中差别不大,但在髋臼假体安放时,相差显著。与后外侧入路比较,外侧入路中,髋臼假体的外展角较小,但前倾角较大。     

脊柱嗜酸性肉芽肿的诊断和治疗

目的 探讨脊柱嗜酸性肉芽肿的诊断和手术适应征及治疗方法的选择。方法 分析经病理证实的11例脊柱嗜酸性肉芽肿的临床表现，X线、CT、MR影像学表现和治疗效果。结果 11例患者随访9个月至12年，10例患者症状缓解，1例复发，行二次手术加放疗，症状缓解。结论手术切除加术后小剂量放疗是治疗脊柱嗜酸性肉芽肿有效的方法。     

BMP-6改良纤维蛋白原支架软骨模块修复兔关节软骨缺损的实验研究

目的研究骨形态发生蛋白(bone morphogenic protein,BMP-6)在构建改良纤维蛋白胶支架软骨模块修复关节软骨缺损的作用。方法以软骨细胞为种子细胞种植于改良纤维蛋白胶支架上,构建细胞改良支架复合物,体外培养,并在培养系统中加入BMP-6生长因子,观察软骨细胞在支架中的繁殖情况,以及载体降解情况,并将培养出的软骨模块植入于动物关节软骨缺损模型中进行定期观测。结果改良纤维蛋白原支架可满足组织工程软骨修复需要,BMP-6生长因子用于构建模块修复关节软骨缺损模型可促进软骨细胞软骨基质分泌,并在动物试验中发现植入6周后,与对照比较在关节软骨缺损修复质量上有显著性差异。结论BMP-6生长因子作用于改良纤维蛋白胶软骨模块中可明显促进组织工程软骨模块构建以及关节软骨缺损的修复。     

AF内固定系统加骨水泥填塞治疗胸腰椎压缩骨折远期疗效

目的：应用AF内固定系统加骨水泥填塞治疗创伤后胸腰椎压缩骨折。与单纯采用AF的治疗进行比较，探讨胸腰椎压缩骨折有效的治疗方法。方法：采用AF脊柱内固定系统将56例胸腰椎骨折复位，同时行椎板或横突间植骨融合，其中21例患者在骨折椎体中注入骨水泥，X线检查评价临床效果。结果：56例患者照片示椎弓根钉位置满意，骨折复位良好。术后无神经根损伤及脊髓损伤加重情况，48例患者平均随访24个月，临床症状明显好转。X线照片提示有骨水泥填塞比没有骨水泥填塞的患者胸腰椎矫正度的丢失明显减少。脊柱骨折复位效果：无骨水泥组患者手术前、后Cobb角分别是(3l&;#177;11)&;#176;和(4&;#177;4）&;#176;，差异有非常显著性意义(t=4．725，P&;lt;0．01)；骨水泥组患者手术前、后Cobb角分别是(3l&;#177;13)&;#176;和(4&;#177;4)&;#176;，差异有非常显著性意义(t=4．862，P&;lt;0．01)。无骨水泥对胸腰椎骨折后突畸形的矫正度是(26&;#177;9)&;#176;。骨水泥对后突畸形的矫正度是(27&;#177;10)。骨水泥组与无骨水泥组在后突畸形的矫正度方面无显著性差异(t=1．65。P&;gt;0．01)。结论：采用AF内固定系统加骨水泥填塞治疗创伤后胸腰椎压缩骨折能有效维持椎体的高度，更好地防止后期脊柱后凸畸形的复发。减少远期并发症。     

AF内固定系统加骨水泥填塞治疗胸腰椎压缩骨折远期疗效

目的:应用AF内固定系统加骨水泥填塞治疗创伤后胸腰椎压缩骨折,与单纯采用AF的治疗进行比较,探讨胸腰椎压缩骨折有效的治疗方法。方法:采用AF脊柱内固定系统将56例胸腰椎骨折复位,同时行椎板或横突间植骨融合,其中21例患者在骨折椎体中注入骨水泥,X线检查评价临床效果。结果:56例患者照片示椎弓根钉位置满意,骨折复位良好,术后无神经根损伤及脊髓损伤加重情况,48例患者平均随访24个月,临床症状明显好转,X线照片提示有骨水泥填塞比没有骨水泥填塞的患者胸腰椎矫正度的丢失明显减少。脊柱骨折复位效果:无骨水泥组患者手术前、后Cobb角分别是(31±11)°和(4±4)°,差异有非常显著性意义(t=4.725,P<0.01);骨水泥组患者手术前、后Cobb角分别是(31±13)°和(4±4)°,差异有非常显著性意义(t=4.862,P<0.01)。无骨水泥对胸腰椎骨折后突畸形的矫正度是(26±9)°,骨水泥对后突畸形的矫正度是(27±10)°,骨水泥组与无骨水泥组在后突畸形的矫正度方面无显著性差异(t=1.65,P>0.01)。结论:采用AF内固定系统加骨水泥填塞治疗创伤后胸腰椎压缩骨折能有效维持椎体的高度,更好地防止后期脊柱后凸畸形的复发,减少远期并发症。     

三维支架材料外消旋聚乳酸复合藻酸钙的生物相容性观察

目的：观察外消旋聚乳酸（PDLLA)复合藻酸钙(CAG)制备的三维支架材料的组织相容性、细胞相容性，为进-步改善材料性能提供实验依据。方法：体外大鼠成骨细胞与PDLLA、PDLLA／CAG支架材料联合培养，倒置显微镜、环境扫描电镜观察细胞黏附情况，MTT法分析细胞增殖情况；将支架材料植入大鼠肌袋中，观察局部伤口情况，术后2，4，8，12周行组织学观察。结果：复合支架材料在细胞贴壁时间和细胞活性方面均较单纯支架优良；两种支架材料在体内均无明显炎症反应。MTT法测定结果显示：随着培养时间的延长，各组细胞数量都明显增加，各时间点PDLLA组细胞数高于对照组，差异有显著性意义(t=-285．091，-154．681，-72．194，-81．306．P&;lt;0．01)；PDLLA／CAG组细胞数高于PDLLA组，差异有显著性意义(t=-297．156，-167．687,-84．900，-103．103，P&;lt;0．01)。结论：PDLLA／CGA是-种具有良好生物相容性的支架材料。有望在骨组织工程中得到广泛应用。