Ki-67核心启动子在胃癌SCG-991细胞中的转录活性

目的 观察Ki-67核心启动子在人胃癌细胞中的转录活性.方法 使用缺失分析法分别从5'端和3'端对Ki-67基因启动子逐段缺失,得到不同长度的8个和3个截短DNA片段.分别插入pGL3-Basic载体后转染人胃癌SCG-991细胞,使用双荧光素酶检测系统鉴定转录活性,确定Ki-67基因核心启动子.比较Ki-67核心启动子与另2种肿瘤启动子hTERT和Survivin的转录活性.结果 自5'端缺失得到的-223～+771截短片段在SCG-991细胞内转录活性达到病毒SV40启动子活性的56.5%;自3'端缺失的-223～+30截短片段转录活性更强,为-223～+771片段活性的2.1倍,是hTERT启动子的1.7及Survivin启动子和15.3倍.结论 Ki-67核心启动子区域为-223～+30,在胃癌SCG-991细胞中的转录活性超过SV40启动子,以及hTERT启动子及Survivin启动子.     

双源结石能谱CT对尿酸结石的预测价值

目的探讨基于双源结石能谱CT的结石成分预测方法对尿酸结石的预测价值。方法回顾性分析上海市第六人民医院2020年7月至2022年7月收治的204例泌尿系结石患者的临床资料, 男159例, 女45例。年龄(50.7±14.3)岁。上尿路(肾、输尿管)结石187例, 下尿路(膀胱、尿道)结石17例。结石长径(13.4±5.1)mm。所有患者术前行双源结石能谱CT检查, 分别测量150 kV和100 kV电压下的CT值, 并根据计算的双能比(Ratio值=100 kV的CT值除以150 kV的CT值)预测结石成分:Ratio值≤1.15为尿酸结石, 1.16～1.35为胱氨酸结石, 1.36～1.55为草酸钙结石, >1.55为羟基磷灰石。本组204例中, 行经皮肾镜取石术33例、输尿管软镜碎石术171例。术后结石标本行红外光谱分析结石成分。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析术前双源结石能谱CT预测尿酸结石的效能。结果 204例患者, 术前CT预测尿酸结石28例;非尿酸结石176例, 其中草酸钙结石136例, 羟基磷灰石38例, 胱氨酸结石2例。术后红外光谱分析结果为尿酸结石26例;非...     

大鼠DCD供肝热缺血时间对移植肝的影响

目的评价大鼠心脏死亡器官捐献(DCD)供肝热缺血时间对移植肝的影响。方法建立大鼠DCD供肝原位肝移植模型。根据供肝获取前经历心脏停搏时间的不同,将54只受体大鼠分为3组:对照组(W0组,未经历热缺血)、热缺血10 min组(W10组)、热缺血20 min组(W20组),每组18只。各组大鼠分别于术后1、3、7 d检测血清肝功能[丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)],电子显微镜观察肝细胞及其细胞器,用蛋白质免疫印迹(Western blot)法检测肝组织细胞色素C(Cyt C)和凋亡诱导因子(AIF)的蛋白表达水平。结果随着热缺血时间的延长,肝移植术后1 d,各组大鼠ALT和AST水平急剧上升,与W0组相比,W10组和W20组的ALT和AST水平均明显升高(均为P0.05)。术后3 d,各组大鼠ALT和AST水平均稍稍下降,与W0组相比,W10组和W20组的ALT和AST水平仍明显较高(均为P0.05)。术后7 d,各组大鼠ALT和AST水平均再次上升,与W0组相比,W10组和W20组的ALT和AST水平升高更显著(均为P0.05)。电子显微镜观察发现,随着热缺血时间的延长,肝细胞水肿程度逐渐加重,内质网扩张逐渐加重,线粒体损伤程度加重,W20组尤为严重。术后1 d,3组大鼠肝组织中的AIF和Cyt C蛋白表达水平的比较,差异均无统计学意义(均为P0.05)。术后3、7 d,与W0组比较,W10组和W20组的AIF与Cyt C蛋白表达水平均较高,差异均有统计学意义(均为P0.05),且W20组的AIF与Cyt C蛋白表达水平均高于W10组(均为P0.05)。结论 DCD供肝热缺血主要损伤肝细胞,随着热缺血时间的延长,移植肝肝细胞内线粒体和其他细胞器形态、及线粒体凋亡相关蛋白水平均出现明显变化。     

基因放射性核素反义治疗肾癌的体内外实验

目的:探讨Ki-67基因放射性核素反义治疗对人肾癌细胞生长及凋亡的影响。方法:125I标记的反义核酸(125I-ASODNs)处理人肾癌786-0细胞及荷瘤小鼠,采用免疫组化、Westernblot检测Ki-67表达;TUNEL法检测细胞凋亡。结果:肾癌细胞Ki-67抗原表达降低、Ki-67蛋白降低、凋亡细胞阳性率升高、小鼠肿瘤体积减小。结论:Ki-67基因放射性核素反义治疗能抑制肾癌细胞Ki-67基因表达及细胞增殖、促进凋亡。     

Multi-parameter prediction of HLA class Ⅰ restricted cytotoxic T lymphocyte epitopes for human proliferating cell nuclear antigen

Objective To predict the HLA class Ⅰ restricted cytotoxic T lymphocyte epitopes for human proliferating cell nuclear antigen (PCNA). Methods By using 3 epitope prediction databases which including MHC binder ( BIMAS and SYFPEITHI databases) and proteasome cutting site ( PAProC databases), the epitopes of PCNA were predicted by analyzing several parameters and methods. Results After comprehensive analysis,we have obtained two possible HLA-A0201 restricted CTL epitopes SMSAD-VPLV (228-236, score 447 633. 595 ) and LINEACWDI ( 22-28, score 127 966.779);two HLA-A24 re-stricted CTL epitopos DYEMKLMDL ( 113-121, score 563 994.9 ) and EFARICRDL ( 143-151, score 40 540.7);two HLA-A1101 restricted CTL epitopes LTSMSKILK (72-80, score 1334. 2680 ) and DVPLV-VEYK (232-240,score 736.9236). Conclusion The multi-parameter epitope prediction method is feasi-ble for cytotoxic T lymphocyte epitope prediction.     

心肌梗死与能量代谢

心脏维持正常的功能需要正常的能量代谢。心肌梗死是引起心力衰竭的最常见的原因之一。心肌能量代谢的变化是心肌梗死及心力衰竭的病程发展中的一个重要的影响因素。能量代谢治疗为心肌梗死和心力衰竭的心肌保护及改善预后提供了新的治疗途径，对其临床和基础深入的研究具有重要的意义。本文就其目前的研究和进展作一综述。     

恒河猴肝移植术后急性排斥反应时肝组织中转化生长因子-β1的表达

目的检测转化生长因子(TGF)-β1在恒河猴肝移植术后急性排斥反应时肝组织中的表达水平,以评价其作为肝移植术后急性排斥反应早期诊断指标的价值。方法采用改良血管袖套+胆道支撑管+动脉吻合法建立稳定的恒河猴肝移植模型,将其随机分为实验组(围手术期不给予免疫抑制治疗)和对照组(围手术期给予免疫抑制治疗)。继而分别在肝移植术后6 h、12 h、24 h和72 h四个时间点分别收集血清及肝组织,通过肝功能指标检测及移植肝组织苏木精-伊红染色Banff评分评价其移植排斥反应情况,并应用免疫组织化学、Western blot法分别检测TGF-β1蛋白表达情况。结果 1 2组恒河猴肝移植术后12 h、24 h和72 h均有急性排斥反应发生,尤其肝移植后72 h时实验组肝组织急性排斥反应重于对照组,Banff分级水平高于对照组(P<0.05)。2 2组术后ALT、AST和TBIL水平均随着时间的延长呈上升趋势(P<0.05),在移植术后6 h和12 h时2组ALT、AST和TBIL水平比较差异无统计学意义(P>0.05);在移植术后24 h和72 h时实验组ALT、AST和TBIL水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。3免疫组织化学检测TGF-β1蛋白表达结果:实验组肝移植术后12 h后肝组织中TGF-β1免疫组织化学染色阳性面积百分率随着时间延长不断升高,且均明显高于对照组相应时相(P<0.05)。4 Western blot检测TGF-β1蛋白表达的半定量结果:实验组和对照组均在6 h即开始随着时间的延长呈现上调趋势,而实验组上调的幅度较对照组大,在6 h、12 h、24 h和72 h时实验组均分别明显高于对照组相应时相,差异有统计学意义(P值分别是0.003、0.001、0.001、0.001)。结论肝移植术后肝组织中TGF-β1水平升高提示机体细胞免疫功能增强,对肝移植术后急性排斥反应的早期诊断可能有一定意义。     

人工智能辅助胸外科手术25例

目的 总结应用人工智能(达芬奇机器人)辅助行普胸外科手术的基本经验,评价其手术效果及应用价值.方法 回顾性分析2009年1月至2012年9月行达芬奇机器人胸外科手术25例临床资料、手术方式及病理结果.结果 25例均成功实施达芬奇机器人手术,其中肺部手术10例,纵隔手术14例,食管手术1例.10例肺部手术平均耗时(241.00 +90.98) min,出血约(195.00±43.78) ml,术后24 h胸管引流量平均(305.00±28.38) ml;前纵隔胸腺来源肿物切除手术平均耗时(116.36±45.23) min,出血约(63.64±23.36)ml,术后24 h胸管引流量平均(123.64±69.93) ml.全组无围手术期死亡,无中转开胸者,患者皆顺利出院.结论 应用人工智能(达芬奇机器人)辅助胸外科手术是一种安全可行的手术方法,手术操作安全.     

生长抑素对瘦素诱导肝星状细胞的活化增殖、PTP1 B表达及JAK2-STAT3通路的影响

目的研究生长抑素对瘦素诱导大鼠肝星状细胞(HSC)的活化增殖、蛋白酪氨酸磷酸酶1B(PTP1B)表达及JAK2-STAT3通路的影响,探讨生长抑素抗肝纤维化的相关机制。方法以重组大鼠瘦素作用于HSC-T6细胞(100 ng/ml),同时加入各浓度的生长抑素(10-6、10-7、10-8、10-9、10-10 mol/L)。在处理24 h后,采用CCK-8法检测HSC增殖的变化,免疫细胞化学检测 p-JAK2及 p-STAT3蛋白表达, RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和 PTP1B 的mRNA表达。结果 CCK-8法显示生长抑素可通过剂量依赖方式抑制瘦素诱导的HSC-T6细胞增殖( P<0.05);免疫细胞化学检测显示,生长抑素组HSC-T6细胞质p-JAK2及细胞核内 p-STAT3蛋白表达明显低于瘦素对照组( P <0.05);RT-PCR法检测生长抑素干预组 HSC α-SMA mRNA的表达较瘦素对照组及空白对照组明显降低(P<0.05),而PTP1B的mRNA表达量升高(P<0.05)。结论生长抑素能上调PTP1B的表达,阻断瘦素在HSC内 JAK2-STAT3信号通路的转导,并且抑制瘦素诱导HSC的活化与增殖。