地塞米松诱导的危重病性肌病大鼠的TGF-β／Smad表达

目的 探讨地塞米松诱导的危重病性肌病（CIM）大鼠的TGF-β1、Smad3表达。方法将40只大鼠随机分为正常对照组10只、观察组30只；观察组又分为7、9、11d三个亚组各10只。观察组用地塞米松腹腔注射，对照组用等量生理盐水腹腔注射，均每日1次。按照Lennon分级法对大鼠进行肌功能缺损评分；处死大鼠后，用免疫组化法检测其比目鱼肌中的TGF-β、Smad3表达。结果对照组全部存活，无肌功能缺损症状；观察组死亡8只，其中观察7d组出现肌功能缺损症状7只，观察9d、11d组均出现明显肌功能缺损症状，以观察11d组最严再；与对照组比较，观察组TGF—β1，Smad3阳性表达明显升高（P均〈0．05），以观察11d组最明显（P〈0．05）。结论地塞米松诱导的大鼠CIM随病程延长，其TGF-β1、Smad3表达升高，以11d最明显。     

BRCA-1在三阴性乳腺癌中的表达及意义

目的:检测BRCA-1在三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)中的表达情况,分析其与TNBC临床病理特征之间的关系。方法:采用免疫组化方法检测三阴性乳腺癌患者术后癌旁正常组织、恶性组织、乳腺良性病变组织中BRCA-1蛋白的表达情况。结果:在TNBC中BRCA-1的阳性表达率为76.4%,均高于癌旁正常组织及乳腺良性病变中的表达,差异有统计学意义,且BRCA-1的表达与淋巴结转移情况、临床分期有关(P<0.01)。结论:三阴性乳腺癌中BRCA-1蛋白表达上调,参与TNBC发生、发展过程,可能成为评估TNBC预后的潜在敏感指标。     

人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠pJNK表达的影响

目的 探讨人参皂甙Rg1对脑缺血再灌注大鼠脑组织c-jun N-末端激酶(pJNK)表达的影响及其意义.方法 将大鼠随机分为假手术组、单纯缺血再灌注组、人参皂甙Rg1 10、20、40 mg/kg组、尼莫地平1 mg/kg组,采用大脑中动脉闭塞法建立脑缺血再灌注模型,应用免疫组织化学方法检测脑组织缺血再灌注4h后pJNK的表达.结果 人参皂甙Rg1各剂量组大鼠脑组织pJNK表达阳性率分别为(23.89±6.77),(15.19±4.59),(9.15±4.77),均低于单纯缺血再灌注组(27.15±8.46).结论 人参皂甙Rg1防治大鼠脑缺血再灌注损伤的机制可能与抑制脑组织pJNK表达有关,且以高剂量效果较好.     

地黄多糖对大鼠骨髓间充质干细胞向神经样细胞诱导分化作用的研究

目的:探讨地黄多糖体外对大鼠骨髓间充质干细胞( BMSCs)分化为神经样细胞的诱导作用.方法:以大鼠BMSCs为研究对象,采用流式细胞仪检测BMSCs表面标志,MTT法检测细胞生长曲线,当第3代细胞爬片达到80％以上汇合时,分为对照组、化学方法诱导组(5 mmol·L -1,β-mercap toethanol)、脑源性神经生长因子(10 μg·L-1,BDNF)组和地黄多糖组(200 mg·L-1)进行诱导,6h后应用免疫细胞化学染色法检测各实验组神经元巢蛋白(nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,RT-PCR检测nestin,NSE,βⅢ-微管蛋白(βⅢ-tubulin)和GFAP mRNA的表达情况.结果:经分离鉴定培养5代以内大鼠BMSCs增殖旺盛、具有较好的细胞活力;免疫细胞化学染色和RT-PCR检测结果显示,对照组不表达神经细胞标志物,各诱导组诱导后有特异性神经细胞标志物表达.其中地黄多糖组Nestin,NSE阳性细胞率分别为( 56.74±1.36)％,(73.37±1.27)％,高于化学诱导组(28.21±2.43)％,(2.31±2.72)％和神经生长因子组(31.3±1.61)％,(28.87±1.65)％,(P＜0.05);GFAP阳性细胞率(20.17±1.27)％低于化学诱导组和神经生长因子组,差异具有统计学意义(P＜0.05);化学诱导组Nestin,NSE和GFAP阳性细胞率与生长因子组比较,差异无统计学意义.结论:地黄多糖具有诱导BMSCs向神经样细胞分化的作用,主要向神经元样细胞方向诱导.     

人参皂苷Rgl对抗脑缺血-再灌注大鼠脑组织FAS、FAS—L蛋白表达的定量分析

目的：探讨人参皂苷Rgl对脑缺血-再灌注大鼠脑组织FAS、FAS-L表达的影响。方法：取健康雄性SD大鼠30只。将其随机分为假手术组,模型组,人参皂苷Rgl10、20、40mg／kg组,阳性药物对照组,每组5只。采用线栓法制作大脑中动脉栓塞模型。于MCAO术后6小时,采用免疫印迹法对CA1区的FAS、FAS-L蛋白表达情况进行定量检测。结果：模型组大鼠大脑右侧海马CA1区FAS、FASL含量最高;假手术组FAS、FAS-L含量最低;Rgl20、40mg／kg组的FAS、FAS-L蛋白含量显著降低,与模型组比较有显著性差异（P〈O．05）,其中Rgl40mg／kg组FAS、FAS-L蛋白含量最低。结论：人参皂苷Rgl防治大鼠脑缺血-再灌注损伤的机制可能与抑制脑组织FAS、FAS-L表达有关,且以高剂量效果较好。     

铬污染区地下水对大鼠肝脏功能及Caspase-3和PARP表达的影响*

目的 研究铬污染区地下水对大鼠肝功能、Caspase-3和聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶（PARP）表达的影响。方法 将10只健康SD孕鼠随机分成空白组、地下水组、低铬组、中铬组及高铬组，每组2只。分别灌胃蒸馏水、铬含量为28.64?mg/L的铬污染区地下水，以及剂量为0.8、4.0和20.0?mg/kg的重铬酸钾溶液。21?d后小鼠断奶，按母鼠分组直接灌胃，灌胃剂量不变（0.5?ml/100?g），1次/d，连续灌胃21周。解剖子代大鼠后取血液及肝组织，用原子吸收光谱仪（石墨炉法）检测肝组织中的铬含量及血清中TP、ALB、GLB的含量，以及AST、ALT、ALP的活力，用苏木精-伊红（HE）染色法制作切片，观察肝脏的病理变化，并用免疫组织化学法检测Caspase-3和PARP的表达情况。结果 与空白组比较，地下水组与各剂量重铬酸钾染毒组肝脏中铬的含量均升高，且随着染毒剂量的升高，子代大鼠肝脏中铬含量呈上升趋势，差异有统计学意义（P?<0.05）。地下水组与各剂量重铬酸钾染毒组血清中TP、ALB、GLB的含量均升高，中铬组和高铬组与空白组间的差异有统计学意义（P?<0.05）。地下水组与各剂量重铬酸钾染毒组血清中的AST、ALT、ALP活力均高于空白组，各剂量重铬酸钾染毒组与空白组间的差异有统计学意义（P?<0.05）。HE染色结果显示地下水组与重铬酸钾染毒剂量组的肝细胞表现为不同程度的嗜酸性样变，排列紊乱，细胞质间隙加大及空泡性样变。免疫组织化学结果显示，地下水组Caspase-3和PARP阳性表达率与低铬组相仿，各剂量重铬酸钾染毒组随着重铬酸钾浓度升高，肝细胞阳性率升高。结论 六价铬长期暴露对大鼠的肝功能造成一定损伤，且使肝细胞Caspase-3和PARP表达增强。     

α-硫辛酸对卡那霉素致毒小鼠耳蜗磷酸化p38MAPK表达的影响

目的研究α-硫辛酸(LA)对卡那霉素(KM)致毒小鼠耳蜗磷酸化p38MAPK表达的影响,探讨LA对KM耳毒性损伤的防护作用及其分子机制。方法 20只BALB/c小鼠随机分成对照组、KM组、KM+LA组和LA组,各组动物均连续皮下注射给药14 d,每天2次;应用免疫组织化学SABC法及显微图像分析技术观察耳蜗中磷酸化p38MAPK的表达,同时结合听脑干反应(ABR)测试观察用药前后小鼠听阈的变化。结果KM+LA组小鼠耳蜗磷酸化p38MAPK表达和ABR阈移均明显低于KM组(P<0.01);且磷酸化p38MAPK表达变化与ABR阈移改变高度相关(r>0.7,P<0.05,P<0.01)。结论 LA可通过显著抑制KM所致磷酸化p38MAPK的高表达,从而有效拮抗KM的耳毒性,这可能是LA发挥防护作用的分子机制之一。     

ZHX3基因转染BMSCs及对体外成骨能力的实验研究

 目的    探讨转录抑制因子-锌指蛋白和同源框3（zinc fingers and homeoboxes 3,ZHX3）基因过表达对BMSCs体外成骨能力的影响。  方法　采用ZHX3过表达慢病毒载体转染大鼠BMSCs,同时设空载病毒转染BMSCs作为阴性对照及不做任何处理的BMSCs做空白对照。采用荧光显微镜计数细胞转染率,并采用Western blot检测ZHX3蛋白表达状况。于体外培养,经定向成骨诱导21d后采用碱性磷酸酶和茜素红染色观察各组细胞成骨能力。  结果　（1）贴壁法获得的细胞具有BMSCs表型。（2）转染后,ZHX3过表达组和阴性对照组均表达绿色荧光,空白对照组不表达荧光,且ZHX3过表达组ZHX3基因表达显著高于阴性对照组。（3）ZHX3过表达、阴性对照组和空白对照组均可见碱性磷酸酶阳性表达的细胞。Kaplow评分显示前者阳性表达显著高于后两者（P<0.05）。ZHX3过表达组、阴性对照组和空白对照组均可见明显的矿化结节。前者矿化结节的数量和体积均大于后两者。  结论　ZHX3基因过表达可促进BMSCs体外成骨能力。     

辛伐他汀对BMSCs成骨分化过程中TGF-β1/ smad信号通路的影响

目的　探讨辛伐他汀（simvastatin,SIM）是否可以通过调节TGF-β1/Smad通路从而促进大鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells , BMSCs)分化为成骨样细胞。　方法　复苏、培养大鼠BMSCs并诱导其向成骨样细胞分化。实验组加入不同浓度的SIM（10-8 mol/L、10-7 mol/L、10-6 mol/L）,对照组不给予药物干预。加入成骨诱导液,7d后运用碱性磷酸酶染色法观察细胞成骨能力,21d后用茜素红染色检测细胞钙化水平,Westernblot法检测TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白的表达水平。 结果　应用10-8 mol/L～10-6 mol/L SIM处理细胞7d均可使细胞ALP活性显著增加,其中浓度为10-7 mol/L时效果最显著;应用10-8 mol/L～10-6mol/L SIM处理细胞21d后可使细胞钙化结节明显增多;应用10-8 mol/L～10-6 mol/L SIM处理细胞7d后细胞内TGF-β1、Smad2、Smad3蛋白水平明显增高。 结论　辛伐他汀可促进大鼠BMSCs分化为成骨细胞,其作用机制可能与上调TGF-β1/Smad信号通路中相关基因的表达水平有关。     

组织学与胚胎学网络实验教学平台的研究

<正>组织学与胚胎学主要观察的是器官、组织、细胞的微细结构。由于其内容抽象枯燥,教学难度较大。因此,该学科的实验教学尤为重要。为了提高实验教学效果,很多教学方法和技术都被应用到教学中,包括应用多媒体、录像、计算机辅助教学技术等。近年来,随着信息化、数字化和网络媒体技术持续迅猛发展,搭建网络课程学习平台,建立学、测、练、讨、答一体式实验教学网络,对于提[1]高学生的学习兴趣和自主学习能力是非常有利的。