人参蛋白协同H2O2诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤

目的:探讨人参蛋白(GP)协同H₂O₂诱导人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)氧化应激损伤的作用,并筛选二者的最佳联合浓度。方法:首先采用不同浓度H₂O₂诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤,然后采用不同浓度GP联合200 μmol·L^-1H₂O₂诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤;采用倒置荧光显微镜观察细胞形态,MTT法检测细胞存活,Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡。结果:SH-SY5Y细胞经GP-H₂O₂作用后,细胞数量减少,轴突缩短或消失,胞体变圆、缩小,大小不等;细胞存活率降低;Heochst 33342染色呈现高蓝光;GP 60 mg·L^-1+H₂O₂ 200 μmol·L^-1为联合诱导氧化应激损伤的最佳浓度。结论:GP有协同H₂O₂诱导SH-SY5Y细胞氧化损伤的作用,抑制细胞增殖、促进细胞凋亡是其可能的作用机制。     

基于高通量测序技术对牛蒡子药材与伪品药材混合粉末鉴定研究

牛蒡子是我国传统中药,主要伪品为毛头牛蒡、水飞蓟、云木香、大翅蓟、紫穗槐等果实。传统鉴定方法或分子条形码技术可以对牛蒡子和其伪品进行鉴定,但是对牛蒡子与其伪品混合粉末的鉴定较困难。该文利用高通量测序技术对牛蒡子以及其5种伪品混合粉末ITS2序列进行测序,对混合粉末物种进行鉴定,为牛蒡子药材混合粉末的鉴定提供新思路。对药材混合粉末中的总DNA进行提取,并对总DNA中ITS2片段进行扩增,利用Illumina MiSeq平台对群落DNA片段进行双端(paired-end)测序,利用FLASH,QIIME以及GraPhlAn等软件对序列进行整理分析。结果显示:混合样品中共得到高质量的ITS2序列39 910条,其中,样品中的物种ITS2序列共34 935。进一步的进化分析表明样品中含牛蒡子、毛头牛蒡、水飞蓟、大翅蓟、云木香和紫穗槐。利用高通量测序技术,以ITS2序列作为DNA条形码,可以检测出混合粉末中含有牛蒡子及其伪品,为牛蒡子药材质量控制、安全用药以及中药混合粉末的鉴定提供参考。     

电子鼻技术鉴别通关藤真伪及其道地性

目的采用电子鼻技术,鉴别通关藤Marsdenia tenacissima (Roxb.) Wight et Arn.的真伪及其道地性。方法收集多批次不同产地通关藤及其混淆品,采用PEN3电子鼻系统对样品气味进行定量表征,通过传感器区别贡献率分析法优化传感器个数;主成分分析法、线性判别法对不同产地通关藤及其混淆品的气味指纹信息进行统计,建立真伪品及道地性识别模型,并采用判别因子分析验证模型的准确性。结果主成分分析和线性判别法两种识别模型可区分通关藤真品与混淆品、道地性和非道地性,判别因子分析方法验证未知样品归属的准确性可达90%以上。结论该方法灵敏快速,可用于通关藤真伪和其道地性鉴别。     

辽宁省白头翁属植物分类与基于ITS2的DNA条形码分子鉴定

目的:进一步总结辽宁省白头翁属植物种类,为合理开发保护白头翁属植物资源提供依据。方法:从植物形态、花粉粒、基于内转录间隔区(ITS2)序列的DNA条形码分子鉴定三方面对辽宁省白头翁属植物进行分类与鉴定研究。结果:在全国第四次中药资源普查中,笔者经实地调查白头翁属植物的形态特征、花粉粒微观形态、基于ITS2序列的DNA条形码分子鉴定等,确证了一新种白头翁-岩生白头翁(Pulsatilla saxatilis)的存在;确证了兴安白头翁(P.dahurica),白花白头翁(P.chinensis)两种辽宁省新记录;确证了在大连市大黑山、鞍山市千山有金县白头翁(P.chinensis var.kissii)的存在。结论:辽宁地区为白头翁的主产区之一,白头翁药材基本都为野生,价格逐年上涨,加之开荒种地等原因,辽宁地区白头翁属资源正在逐年锐减,更加造成了白头翁属植物资源的匮乏,急需加快栽培技术研究,保护白头翁属植物野生资源的多样性和保证白头翁药材的可持续利用。     

乌头属六种有毒中药的本草考证

目的:毛茛科乌头属AconitumL.植物药材川乌、草乌、附子、关白附、天雄和侧子在本草中记载混淆,市场流通混乱,通过对古代本草考证,探究古代本草中的乌头属六种有毒中药的基原、产地和质量,为研究应用提供指导。方法:查阅古代本草专著,考证乌头属六种有毒中药,进行比较,并结合现代文献研究进行深入探索。结果:川乌和草乌在古代本草中并称为乌头,附子、天雄和侧子沿用至今,天雄和侧子目前市场流通极少,一般做地方习用药;古代本草中的白附子部分为关白附,部分为天南星科植物独角莲,故无法做判定,应具体情况具体分析。结论:通过对乌头属六种中药进行考证,认清用药历史,避免临床使用出现中毒情况,并且对规范市场流通和统一使用方法奠定基础。     

不同产地牛蒡种质与药材质量的相关性评价研究

目的 研究不同产地的牛蒡种质与牛蒡子药材质量的相关性.方法 采用HPLC法测定药材中牛蒡苷与苷元的量.色谱柱为AgilentFC-C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相:甲醇一水(线性梯度洗脱:0 min,水55%;10 min,水46%;20 rain,水30%);体积流量:1.0 mL,/rain;检测波长:280 nm.在培养箱中进行牛蒡种子发芽实验,测定发芽势、发芽率等.并采用SPSS 13.0进行相关性分析.结果 牛蒡子的千粒质量、发芽势、发芽率与药材中牛蒡苷量成极显著正相关,与牛蒡苷元的量成极显著负相关.结论 不同产地牛蒡种质与药材的质量具有显著相关性,为牛蒡子药材的质量评价提供参考.     

刺槐花的化学成分研究

目的研究中药刺槐花Robinia pseudoacacia的化学成分。方法采用硅胶、聚酰胺和Sephadex LH-20等方法进行分离纯化,采用光谱分析和理化常数对照等方法对所得化合物进行结构鉴定。结果从刺槐花的醋酸乙酯部分中分离得到10个化合物,经光谱分析确定其结构分别为麦芽酚-3-O-[6′-O-(4″-羟基-反式-桂皮酰基)]-β-D-吡喃葡萄糖苷(1)、山柰酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(2)、山柰酚-3-O-β-D-半乳糖苷(3)、β-谷甾醇(4)、胡萝卜苷(5)、山柰酚(6)、山柰酚-3-O-α-L-吡喃鼠李糖-7-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(7)、山柰酚-3-O-β-D-半乳糖-7-O-α-L-鼠李糖苷(8)、D-甘露醇(9)、D-3-O-甲基肌醇(10)。结论化合物1、3、8~10为首次从刺槐花中分离得到。     

胃滞留给药系统的研究进展及其在中药制剂中的应用

在口服制剂中，胃滞留给药系统可以延长药物在胃内的滞留时间，进而延长其在整个胃肠道的转运时间，增加药物的吸收，从而提高临床疗效，因此它是一种理想的给药系统。本文通过查阅国内外文献进行归纳，从胃滞留给药系统的影响因素、分类、制剂研究（包括中药胃滞留制剂）及上市产品进展等方面对近年来胃滞留制剂的研究进展进行综述。     

山葛降脂分散片对高脂血症大鼠脂代谢的影响

目的研究山葛降脂分散片对高脂血症大鼠脂代谢的影响。方法给大鼠喂饲高脂饲料4周后,检测血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、载脂蛋白-A(Iapo-AI)、载脂蛋白-B(apo-B),计算LDL-C/HDL-C、apo-B/apo-AI的比值,以TC、LDL-C升高为主要依据,选取高脂血症大鼠,以TC、LDL-C水平高低,分层次随机分组。在给药调节脂代谢的第2周末、第4周末检测并计算上述各项指标。结果山葛降脂分散片显著降低高血脂症大鼠血清TC、TG、LDL-C、apo-B,显著升高HDL-C和apo-AI,并显著降低LDL-C/HDL-C、apo-B/apo-AI比值,随着给药剂量的增加和给药时间的延长,作用均增强。结论山葛降脂分散片具有调节高血脂症大鼠脂代谢的作用。     

基于高通量测序技术对人参花及其易混淆品鉴定研究

目的 利用高通量测序技术对人参花及其易混淆品进行鉴定，并利用ITS2测序技术验证高通量测序技术对物种鉴定的准确性。方法 对人参花掺伪样品扩增产物进行高通量测序，使用cutadapt、PEAR、PRINSEQ、Usearch、RDP classifier、SINTAX软件获得分类单元(operational taxonomic unit，OTU)序列，舍弃菌类、unclassified等非绿色植物序列；为避免假阳性情况发生，删除序列数<100条或碱基数<200 bp的OTU序列。对人参花、西洋参花、三七花的ITS2扩增产物进行测序，利用MEGA 11.0对人参花、西洋参花、三七花的ITS2、OTU、GenBank上下载的碱基序列构建邻接法系统聚类树、遗传距离、种间信息位点及对ITS2、OTU碱基序列分别进行Blast分析来验证高通量测序技术对物种鉴定的准确性。通过构建ITS2及OTU碱基序列二级结构对人参花、西洋参花、三七花进行比对分析，根据物种间二级结构的不同对物种进行鉴定。结果 高通量测序共得到54 653条有效序列，人参花、三七花、西洋参花的序列号分别为OTU1、OTU2、OTU3及对应的有效序列分别为31 325，857，442条。通过对各物种的ITS2及OTU碱基序列进行Blast检索，均支持各个物种。人参花与西洋参花、三七花种间遗传距离分别为0.010，0.033，人参花与西洋参花、三七花分别有2，7个信息位点；邻接法系统聚类树显示各个物种均独立聚为一支，其中人参花与西洋参花聚为一大支与三七花并列。人参花与西洋参花二级结构一致，但与三七花在臂Ⅳ及臂Ⅳ与臂Ⅰ之间有A、B、C 3处不同。结论 基于高通量测序技术能够准确鉴定人参花、西洋参花、三七花，对掺伪样品亦具有较强的鉴别能力，为市售人参花样品鉴定提供一定思路。