骨髓间充质干细胞向功能性神经元的横向分化

背景：骨髓间充质干细胞定向分化为神经干细胞并探讨提高分化效率的方法,具有重要的理论与实际应用意义。 目的：建立以不同诱导方法横向分化大鼠骨髓间充质干细胞为功能神经元的方法。 方法：分离、纯化得到骨髓间充质干细胞,流式细胞仪检测骨髓间充质干细胞表面标志物。将骨髓间充质干细胞分为神经营养因子诱导组、化学诱导组和对照组,骨髓间充质干细胞分别加入脑源性神经营养因子和碱性成纤维细胞生长因子、二甲亚砜和丁香茴醚、PBS进行诱导。 结果与结论：神经营养因子诱导组和化学诱导组诱导后的细胞均表达神经元特异性烯醇化酶和微管相关蛋白2,且2组细胞的表达量接近(P > 0.05),而对照组未发现神经元特异性烯醇化酶和微管相关蛋白2阳性表达。膜片钳系统检测发现神经营养因子诱导组诱导后的细胞具有神经细胞特征性的动作电位和兴奋性突触后电流,而化学诱导组和对照组均未发现动作电位和兴奋性突触后电流。提示脑源性神经营养因子联合碱性成纤维细胞生长因子是一种诱导骨髓间充质干细胞横向分化为功能神经元的可靠方法。     

人参皂苷和枸杞多糖对UVB诱导培养的成纤维细胞提早衰老的影响

目的 用重复亚毒性剂量UVB辐射培养的皮肤成纤维细胞,观察衰老相关的生物学标志的表达情况,并研究人参皂苷Rb1、Rg1和枸杞多糖对UVB诱导的提早衰老的影响,及对衰老相关的信号分子p16、p21和p53表达的影响。方法 给予培养的皮肤成纤维细胞10次、每次剂量为15 mJ/cm2的UVB辐射。用光镜观察细胞形态学改变,用透射电镜观察细胞超微结构,用β－半乳糖苷酶化学染色法检测衰老细胞,用流式细胞仪检测细胞周期,用RT-PCR检测p16、p21和p53 mRNA的表达水平。结果 三种中药单体对培养的成纤维细胞形态、β－半乳糖苷酶活性、细胞周期和p16、p21和p53 mRNA的表达均没有影响。UVB辐射后,细胞形态和超微结构发生改变;91.5%细胞β－半乳糖苷酶染色阳性;UVB辐射组的G1期细胞数（88.63% ± 4.67%）上升,与对照组（49.18% ± 5.53%）比较差异有统计学意义（P < 0.05）。UVB + 人参皂苷Rb1、UVB ＋ 人参皂苷Rg1、UVB ＋ 枸杞多糖组G1期细胞数分别为71.04% ± 1.64%、70.38% ± 2.58%、80.09% ± 3.46%,与UVB辐射组比较差异均有统计学意义（P均 < 0.05）。与对照组比较,UVB辐射组的p16、p21和p53 mRNA的表达明显增加（P < 0.05）。与UVB辐射组比较,三种中药单体能明显抑制UVB辐射细胞的p16 mRNA的表达（P均 < 0.05）,人参皂苷Rb1和人参皂苷Rg1能明显抑制p21 mRNA的表达（P < 0.05）,人参皂苷Rb1和枸杞多糖能明显抑制p53 mRNA的表达（P < 0.05）。结论 人参皂苷Rb1、Rg1和枸杞多糖对UVB诱导培养的成纤维细胞提早衰老具有抑制作用,对p16、p21和p53 mRNA表达的下调作用是抑制作用的机制之一。     

囊性纤维化跨膜传导调节因子在人破骨细胞中表达及其对破骨细胞凋亡的影响

目的探讨囊性纤维化跨膜传导调节因子(Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)在破骨细胞中的表达及其对破骨细胞凋亡的影响。方法利用Real time PCR和Western Blot检测人破骨细胞中CFTR表达,运用基因工程手段构建含有GFP的CFTR超表达载体,应用流式技术分析CFTR超表达后对破骨细胞凋亡的影响。利用Real time PCR和Western Blot检测破骨细胞中Fas/FasL的表达。结果 Real time PCR和Western Blot结果显示,体外培养的人破骨细胞中有CFTR的表达。CFTR高表达后,破骨细胞的凋亡率明显升高,凋亡相关蛋白Fas/FasL表达也明显升高。结论 CFTR可通过促进Fas/FasL的高表达,进而促进破骨细胞凋亡。     

逼尿肌过度活动伴收缩力受损患者尿动力学分析与治疗效果评价

目的分析膀胱逼尿肌过度活动伴收缩力受损(DHIC)患者的尿动力学特点,评价该类患者接受药物和外科手术治疗的效果。方法经尿动力学检查诊断为DHIC的男性患者68例,有膀胱出口梗阻(BOO)者接受手术治疗,无BOO者根据症状给予药物治疗,随访3月,以IPSS和QoL评分、最大尿流率(Qmax)、残余尿(PVR)为主要指标评价其临床疗效。结果各治疗组之间患者年龄、治疗前最大尿流率时的逼尿肌压(PdetQmax)、Qmax、PVR有显著差异(P0.01)。单用M受体拮抗剂有效率63.6%,单用α-受体阻滞剂有效率75.0%,α-受体阻滞剂和M受体拮抗剂联合治疗有效率95.0%,综合疗效优于单药治疗组(P0.05);BOO组手术治疗有效率82.8%。各组治疗后平均IPSS和QoL评分均有显著改善,除单用M受体拮抗剂组外,其余各组治疗后Qmax均显著提高(P0.05),联合药物治疗及外科手术组PVR获得显著降低(P0.01)。结论 DHIC尿动力学表现为储尿期逼尿肌过度活动,排尿期逼尿肌收缩无力,α-受体阻滞剂和M受体拮抗剂联合治疗安全有效,收缩系数(DECO)0.5者应慎用M受体拮抗剂,梗阻系数(OCO)1.5者可行手术治疗前列腺增生,临床症状多能获得改善。     

VPS35WT逆转LRRK2G2019S所致的非神经细胞的tau蛋白过度磷酸化及相关功能缺陷

目的探究逆膜复合体亚基VPS35对富亮氨酸重复激酶2(LRRK2) G2019S所导致的tau蛋白功能缺陷的影响。方法采用HeLa细胞转染过表达LRRK2G2019S质粒(LRRK2G2019S组)、囊泡分选蛋白35 (VPS35) WT质粒(VPS35WT组)、共转染VPS35WT+LRRK2G2019S(VPS35WT+LRRK2G2019S共转染组)和空载对照组(对照组)。采用Western blot法和免疫荧光组化法检测HeLa细胞内tau蛋白磷酸化水平、细胞骨架形态及在低剂量毒物作用下细胞死亡率的变化。结果 VPS35WT+LRRK2G2019S共转染可以进一步逆转过表达LRRK2G2019S的HeLa细胞的tau蛋白磷酸化,稳定细胞骨架,提高细胞对毒物的抵抗力,降低细胞的死亡率(均P 0. 01)。结论 VPS35WT可以逆转LRRK2G2019S所致的HeLa细胞相关功能障碍。     

低浓度地氟烷复合瑞芬太尼对老年患者腹部手术QTc的影响

［摘要］目的: 观察老年冠心病或有冠心病风险患者行腹部手术时低浓度地氟烷复合瑞芬太尼对其校正的QT间期(QTc)的影响。方法: 选择择期在全身麻醉下行腹部手术患者58例,年龄65～85岁,有冠心病史或两个以上危险因素,手术时间>1 h。随机分为3组：试验1组(0.8MAC地氟烷处理,n=20)、试验2组(0.6MAC地氟烷处理,n=19)、对照组(n=19);3组麻醉诱导方法相同,术中维持应用丙泊酚、瑞芬太尼和顺式阿曲库按,试验组分别调整地氟烷浓度,1组为0.8 MAC地氟烷、2组为0.6 MAC地氟烷,对照组不用地氟烷。观察并记录诱导前(T0)、插管后(T1)、手术开始前(T2)、手术开始1 h(T3)、拔管即刻(T4)及术后1 h(T5)各时间点QTc、平均动脉压(MAP)、脑电双频指数(BIS)及心率,记录围术期心电图的各种变化包括ST T改变、心律失常等情况;记录各组血管活性药物的使用次数。结果： 与对照组比较,在T3时间点,试验1组QTc值延长,MAP降低(P<0.05);在T4时间点试验1、2组QTc延长、试验1组心率升高(P<0.05);余时间点组间比较,QTc、MAP、心率差异均无统计学意义(P>0.05)。 结论： 0.6 MAC～0.8 MAC的呼气末地氟烷浓度复合瑞芬太尼可较安全地应用于老年冠心病或有冠心病风险患者,能维持稳定的血流动力学状态。     

损伤控制性手术在肝破裂出血治疗中的应用体会

目的本研究旨在通过回顾性研究,评估损伤控制性手术在治疗肝破裂出血的临床效果。方法我院2011至2015年普外科收治的100例肝破裂出血患者,所有患者根据美国创伤学会器官损伤量表(AAST-OIS)均等于或大于Ⅲ级。根据采用治疗方式的不同分为对照组(n=58)与观察组(n=42)。对照组患者采用一期确定性手术,观察组患者采用损伤控制性手术,比较两组患者的疗效和并发症的发生率。结果在100例肝破裂出血患者中,20例(20%)被列为AAST-OISⅢ级,24例(24%)被列为AAST-OISⅣ级,56例(56%)被列为AAST-OISⅤ级。在对照组58例患者中,28例患者存活,30例患者死亡,死亡率51.72%。在观察组42例患者中,37例患者存活,5例患者死亡,死亡率11.90%。在对照组58例患者中,30例患者发生严重并发症,发生率51.72%。在观察组42例患者中,16例患者发生严重并发症,发生率38.10%。观察组的死亡率和严重并发症的发生率显著低于对照组(P0.05)。单因素分析显示,死亡的预测因素分别为AAST-OIS级别(P=0.019),凝血酶原时间(PT)延长(P=0.004),活化部分凝血活酶时间(APTT)延长(P0.0001),及血小板减少(P值=0.005)。结论即使采用一期确定性手术,肝破裂出血仍具有较高的死亡率。损伤控制性手术对肝破裂出血患者具有较好的效果,可以降低死亡率和并发症发生率,值得临床大力推广应用。     

中枢神经细胞瘤的MRI表现

目的 :探讨中枢神经细胞瘤(CNC)的MRI表现,并结合文献,提高对该病的诊断及鉴别诊断水平。方法 :回顾分析11例经手术和病理证实的CNC的MRI表现。结果:11例中,6例肿瘤位于侧脑室壁的前2/3,5例位于室间孔附近的透明隔。肿瘤实质T1WI、T2WI均呈等信号、T2-FLAIR呈略高信号,DWI呈明显高信号。内部信号多不均匀,3例呈明显蜂窝状。肿瘤邻近胼胝体时可见有条索影与之相连7例,无瘤周水肿。增强扫描后一般强化不明显或呈轻度强化,但肿瘤内部及瘤周可见明显肿瘤供血血管7例。结论:CNC的MRI表现具有一定特征性,结合临床正确分析其影像表现有助于提高术前诊断水平。     

RNA干扰p53基因表达对人皮肤成纤维细胞衰老的影响

目的 建立抑制p53基因表达的人皮肤成纤维细胞（HSF）,探讨抑制p53表达对HSF衰老的影响。方法 脂质体转染法将针对p53的shRNA的真核表达质粒pGCsi-p53导入HSF中,经G418筛选抗性克隆,扩大培养,建立稳定转染克隆细胞系。用RT-PCR、实时荧光定量PCR和蛋白印迹法分析目的基因及其蛋白表达。通过SA β-gal染色法检测细胞衰老,MTT法检测细胞增殖能力。 结果 成功建立RNA干扰抑制p53表达的HSF细胞系,转染细胞中p53基因及蛋白水平明显下调（P < 0.01）。SA β-gal染色结果显示,转染组衰老细胞百分比（13.47% ± 1.01%）与对照组（18.10% ± 0.66%）相比降低（P < 0.05）,MTT检测结果显示,转染组细胞增殖能力较对照组加快（P < 0.05）。结论 抑制p53表达能够延迟HSF的衰老,促进细胞增殖。     

富血小板血浆与透明质酸钠修复兔膝骨关节炎

 背景：研究表明,透明质酸钠可抑制膝骨关节炎对软骨的破坏,加速软骨细胞的再生,达到稳定和修复关节软骨的目的。目的：观察富血小板血浆与透明质酸钠治疗兔膝骨关节炎的疗效。方法：将40只新西兰大白兔随机均分为5组,联合组、玻璃酸钠组、富血小板血浆组与模型组制作右侧膝骨关节炎模型,造模后分别向膝关节腔内注射透明质酸钠联合自体富血小板血浆、玻璃酸钠、自体富血小板血浆与生理盐水进行治疗,1次/周,连续5周;对照组不做任何处理,为正常对照。治疗完成1周后,ELISA法检测血液中白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平,光镜下观察关节软骨的变化。结果与结论：与对照组比较,其余4组白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平均升高(P < 0.01);联合组、透明质酸钠组、富血小板血浆组白细胞介素1、白细胞介素6、肿瘤坏死因子α水平均低于模型组(P < 0.01或P < 0.05),且以联合组下降最显著。模型组关节软骨破坏明显,联合组、透明质酸钠组、富血小板血浆组关节软骨破坏程度轻于模型组,且以联合组破坏程度最轻。表明透明质酸钠配合自体富血小板血浆关节内注射可降低膝骨关节炎的炎症反应,保护关节软骨,效果优于单一药物注射。中国组织工程研究杂志出版内容重点：生物材料;骨生物材料; 口腔生物材料; 纳米材料; 缓释材料; 材料相容性;组织工程