用组织工程方法修复山羊胫骨骨缺损的实验研究

制备组织工程用山羊胫骨骨缺损模型，研究用组织工程的方法修复山羊胫骨骨缺损的可行性。27只中国山羊制备单侧胫肌中段20mm 的骨膜与骨缺损，7孔钢板内固定，随机分3组：空白组不进行植入处理；对照组（CHAP组）单纯植入羟基磷灰石（CHAP）；实验组（CHAP／BMSc组）植入CHAP 与骨髓基质细胞（BMSc）的复合物。术的4、8、12周放射学检查X线片光密度指数比值、组织学方法评价各组骨缺损修复情况，12周CHAP／BMSc组与CHAP组做压应变与三点弯曲试验，评价骨缺损修复后的生物力学性质。结果显示，术后4、8、12周X线片光密度指数比值空白组无明显变化，CHAP组低于CHAP／BMSc组（P＜0．05）；组织学切片显示CHAP／BMSc组成骨较CHAP组早、多；12周三点弯曲实验载荷、弯曲应力CHAP／BMSc组高于C组（P＜0．05）。提示山羊胫骨20mm骨与骨膜缺损不能自行修复，可满足骨组织工程大动物实验需要；CHAP与BMSc复合物修复骨缺损在成骨时间、成骨量与质量上均优于单纯CHAP.     

异体手移植急性排斥反应的成功预防

目的：探讨异体手移植急性排斥反应的防治措施。方法：1999—09—21南方医科大学南方医院为2例男性患者同时进行了右手异体移植，其一患者2年前炸鱼时将右手炸毁，初期手术作残端修整；其二患者2年前右腕部被钢丝勒断，在当地医院行再植术失败后作残端修整。2000—09—26又为一双前臂缺失患者进行了异体手移植。患者的双前臂炸伤缺失1年，缺失平面为右前臂中下1／3。左前臂中上1／3。3例患者心理及免疫状态均正常，无全身性疾病，残肢局部情况好，强烈要求手移植。以与受者ABO、Rh血型相同，HLA配型良好的脑死亡患者为供体；所有供肢尺桡骨骨髓刮除，其中2例供肢于移植前行8Gy的X射线照射；全部患者显微镜下吻合动脉、静脉及神经，联合应用免疫抑制剂；动态检测外周血T细胞亚群和细胞因子。结果：①患者手移植一般情况及移植手皮肤、组织病理检查结果：3例患者手移植后，生命体征平稳，移植术后手血运均良好，无合并细菌、病毒和真菌感染，皮肤愈合同断肢再植，移植手全部成活，临床症状、体征及皮肤病理检查均提示没有发生急性排斥反应。②外周血细胞因子动态检测提示：移植术后诱导期血清中白细胞介素2、肿瘤坏死因子α、干扰素-γ水平迅速下降，1周后恢复至手术前水平，随后逐渐降低并维持在低水平。结论：异体手移植急性排斥反应的预防与供受者间的组织配型、供肢的适当处理、免疫抑制剂应用的个体化、微创外科技术、周密的预防感染措施等因素密切相关。术后监测血清中自细胞介素2、肿瘤坏死因子α、干扰素-γ的水平可以早期判断排斥反应的发生。     

组织工程化骨组织中成骨细胞来源的选择

骨的组织工程学应用中作为种子细胞的成骨细胞有４种来源－－骨、骨外膜、骨髓和骨外组织。本文比较了这４种来源的优缺点，并对各自在未来组织工程学方法的应用前景进行了分析。     

带血供肌瓣作为骨形态发生蛋白载体修复骨缺损的实验研究

目的 探讨带血供肌瓣作为骨形态发生蛋白（BMP）载体修复骨缺损的可行性。方法 观察带血从肌瓣复合BMP和单纯BMP组修复骨缺损时的成骨情况;对纤维蛋白粘合剂、带血供肌瓣、无血运肌瓣、同种异体脱钙骨4种不同BMP载体的成骨能力进行比较。结果 以指深屈肌支为蒂制备的带血供肌瓣复合BMP修复骨缺损,效果优于单纯BMP组;带血供肌瓣联合纤维蛋白粘合剂复合BMP修复骨缺损,效果优于单纯BMP组;带血供肌瓣联合纤维蛋白粘合剂复合BMP组修复骨缺损,效果优于其它载体。结论 带血供肌瓣可作为BMP的良好载体。带血供肌瓣联合纤维蛋白粘合剂作BMP的载体效果更优。     

恒河猴骨髓基质干细胞与新型可吸收羟基磷灰石及β-磷酸三钙体外相容性的观察

目的观察恒河猴骨髓基质干细胞(rBMSC)与新型可吸收羟基磷灰石(HA)及AO人工骨β-磷酸三钙(β-TCP)的体外相容性．为在灵长类动物体内构建组织工程化骨作材料方面的准备，方法取第三代恒河猴骨髓基质细胞与材料复合培养。实验分3组：A组将rBMSC与HA复合培养；B组rBMSC与β-TCP复合培养：C组为对照，只有细胞不加材料。倒置相差显微镜、扫描电镜观察各组细胞形态及增殖情况．MTT法半定量检测细胞增殖。结果倒置显微镜下见HA组细胞生长良好，与对照组无显著差异。β-TCP组有一些细小颗粒脱落散在分布于板底或细胞表面．有少量细胞脱落死亡。扫描电镜见HA组细胞贴附、增殖良好，β-TCP组细胞贴附率不高。MTT法显示HA组细胞增殖与对照组接近，而β-TCP组则显著低于对照组。结论新型HA与恒河猴BMSc生物相容性好，可用作恒河猴骨组织工程的支架材料．AO人工骨需要作性能上的改进。     

高温高湿环境肢体火器伤肌组织能量代谢变化

目的探讨高温高湿环境下火器致伤后动物组织损伤特点,判断组织损伤的程度及转归,旨在为这一特殊环境下 火器伤后软组织清创的时机、方法及抗生素的应用提供实验依据。方法将８只犬随机分为高温高湿（ＨＨＥ）组和常温 常湿（ＮＥ）组。分别于火器伤前、伤后０、４、８、１２、２４ ｈ测定挫伤区、震荡区和震荡外区组织的ＡＴＰ、ＡＤＰ、ＡＭＰ及能荷含 量。结果（１）ＡＴＰ值：伤后 ８ ｈ,ＨＨＥ组挫伤区明显较 ＮＥ组低（Ｐ＜０．０５）, １２ ｈ后进行性下降,较 ＮＥ组有更显著差异 （Ｐ＜０．０１）;（２）ＡＤＰ值：ＨＨＥ组挫伤区伤后 ８ ｈ及震荡区伤后 １２ ｈ较 ＮＥ组低（Ｐ＜０．０５）;（３）ＡＭＰ值：伤后 １２ ｈ,ＨＨＥ组 挫伤区明显高于 ＮＥ组（Ｐ＜０．０１）;（４）能荷：伤后 ８ ｈ,ＨＨＥ组挫伤区明显低于 ＮＥ组（Ｐ＜０．０５）,伤后 １２ ｈ较 ＮＥ组降低 更为显著（Ｐ＜０．０１）。结论高温高湿环境肢体火器伤后肌组织能量储备匮乏且随时间延长显著下降,处理应强调及早、 彻底的清创和使用有效的抗生素。     

体外培养的骨骼肌卫星细胞生长与分化特性的研究

目的：探讨体外培养的骨骼肌卫星细胞的生长与分化特性。方法：取大鼠肱三头肌,采用二步消化法分离骨骼肌卫星细胞,体外进行原代和传代培养。通过生长曲线、细胞融合率研究骨骼肌卫星细胞的增殖与分化能力,利用免疫细胞化学染色对所获得的细胞进行鉴定。结果：二步消化法适用于大鼠骨骼肌卫星细胞的分离,在生长培养基作用下,细胞增殖旺盛;在分化培养基条件下,细胞分化良好,可融合成肌管。骨骼肌特异性蛋白α-sarcometric actin和myosin免疫化学染色显示,骨骼肌卫星细胞弱阳性,肌管强阳性。结论：体外培养的骨骼肌卫星细胞具有良好的生长与分化能力,适用于骨骼肌组织工程的构建与研究。     

高温高湿环境下犬肢体火器伤后伤道病理学改变

为研究高温高湿环境下犬肢体火器伤后伤道的病理学改变,将8只犬随机分为高温高湿(HHE)组和常温常湿(NE)组,分别于火器伤后4、8、12、24h进行大体和病理形态学观察,测定挫伤区、震荡区和震荡外区的ATP、ADP、AMP及能荷含量。结果发现,HHE组大体病理改变较NE组明显加重;光镜及电镜观察到HHE组各区肌肉纤维的病理变化均较NE组显著,且呈进行性加重,而NE组的震荡区及震荡外区24h伤道组织病理变化均有减轻趋势。ATP在HHE组伤后8、12、24h挫伤区及伤后24h震荡区较NE组低。ADP在HHE组伤后8h挫伤区及伤后12、24h震荡区较NE组低。AMP在HHE组挫伤区12h后明显高于NE组。HHE组伤后8h震荡区及伤后12、24h挫伤区能荷较NE组降低。说明高温高湿环境下肢体火器伤伤道肌肉组织病理损伤严重,且随时间的延长而逐渐加重;肌组织能量储备匮乏,且随时间延长能量储备显著下降;其处理更应强调及早、彻底的清创。     

A new approach to tissue repair：gene therapy

ＴＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｒｔｈｏｐｅａｄｉｃｓａｎｄＴｒａｕｍａｔｏｌｏｇｙ ,ＮａｎｆａｎｇＨｏｓｐｉｔａｌ ,ＦｉｒｓｔＭｉｌｉｔａｒｙＭｅｄｉｃａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ,Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ 5 10 5 15 ,Ｃｈｉｎａ (ＷｅｉＫＨ ,ＰｅｉＧＸａｎｄＨｕＢＳ)ｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｔｉｓｓｕｅｒｅｐａｉｒｉｎｖｏｌｖｅｓａｃｏｍｐｌｅｘｔｉｓｓｕｅｒｅｓｐｏｎｓｅｔｏｉｎｊｕｒｙｉｎｗｈｉｃｈｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ ,ｐｌａｙｉｎｇａｍａｊｏｒｒｏｌｅｉｎｔｈｉｓｐｒｏｃｅｓｓ ,ｔｒｉｇｇｅｒ ,ｃ…     

AO肱骨近端锁定系统在肱骨近端骨折治疗中的应用

肱骨近端骨折(proximal humeral fracture,PHF)占骨折发病总数的5%,而且在老年人骨折发病率中排名第3[1].可用于肱骨近端骨折治疗的传统内固定物包括三叶草钢板、T型钢板、1/3管型钢板等.利用传统钢板内固定治疗肱骨近端骨折的一大缺陷是由于螺钉松脱而导致骨折再次移位,特别是在骨质疏松患者中此比例更是高达16%～27%[2-3].过去针对骨量丢失的肱骨近端三、四部分骨折的治疗方法只有肩关节置换,然而固定后大、小结节的坏死导致预后功能的不确定性也限制了低要求的骨量丢失患者采用半肩关节置换[4-5].