tRNA的结构与功能

tRNA是一类小分子单链RNA,分子量约25,000道尔顿。它的最重要的生物功能是参与蛋白质的合成,在携带信息的mRNA与最重要的生命物质——蛋白质之间起着桥梁作用。tRNA还具有其它许多生物功能,这些生物功能都在与其他生物大分子,特别在与各种蛋白质相互作用中表现出来。因此,     

人β-肿瘤坏死因子的高效表达及其IMAC柱的快速纯化

TNF-β是一种有前途用于肿瘤生物治疗的细胞因子.TNF-β缺失N端24个aa,可使它们在体外的细胞毒活性增加2～6倍,而对小鼠致死率却降低5倍,这为重组人TNF-β提供了新的思路.本文将人TNF-βN端缺失23个aa的基因序列插入到一种新型的表达载体pRSET C,使590bq的目的基因置于该载体的多聚组氨酸序列和肠激酶酶切位点序列的下游,构建了含hTNF-β基因的pRSET C(简称PC-TNF-β),再转化大肠杆菌BL21(DF3),在T_7噬菌体后动子控制下,经PTG诱导,hTNF-β得到高水平表达,经SDS-PAGE检测,在分子量约21KD处出现目的蛋白的条带,薄层扫描分析,表达产物占细菌总蛋白的18～26%.表达菌体经超声破碎,高速离心,上清经0.45μm滤膜过滤后,即为hTNF-β粗制品,经固     

分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子融合蛋白在大肠肝菌中的表达和纯化

目的 表达及纯化人分泌型肿瘤坏死因子相关激活诱导因子（secreted form TNF-related activation-in-duced cytokine,sTRANCE)蛋白。方法 将sTRANCE结构基因重组到含麦芽糖结合蛋白（MBP）的融合蛋白原核表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达。结果 经IPTG诱导表达出的MBP－sTRANCE融合蛋白相对分子质量约70000,并经Western blot分析证实。用直链淀粉琼脂糖凝胶（amylose resin)亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白。结论 成功地获得sTRANCE蛋白,为进一步研究其生物学性能和用于肿瘤生物治疗的可能性打下了基础。     

实验性哮喘小鼠脾细胞培养上清液IL-5的测定及其意义

本文欲探讨IL 5在哮喘发病机制中的作用。用卵蛋白 (OVA)造模形成哮喘鼠 ,取其脾T淋巴细胞体外培养。以ELISA法测定细胞培养上清液中IL 5浓度。结果经OVA刺激的哮喘鼠T淋巴细胞培养上清液中IL 5 (4 4 6± 6 2pg/ml)明显增高 ;与健康鼠比较有显著性差别 (P <0 0 1)。认为T淋巴细胞产生的IL 5与哮喘气道炎症可能有关。