抗HBsAg Fab片段和α-干扰素融合蛋白的克隆及表达

目的 为深入研究乙型肝炎的生物导向治疗，构建以人抗乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）抗本Ｆａｂ片段国导向作用，αＡ－干扰素（ＩＦＮ－αＡ）为治疗作用的融合蛋白Ｆａｂ／ＩＦＮ－αＡ原核表达载体ｐＨＳ／ＩＦＮ－αＡ。方法 用ＰＣＲ体外扩增目的基因ＩＦＮ－αＡ，并在其ＤＮＡ两端引入酶切点及５′端人工合成的Ｌｉｎｋｅｒ，重组人抗ＨＢｓＡｇ缺本Ｆａｂ片段功体ｐＨＳ相应酶切位点，酶切位点，酶切和ＤＮＡ测序鉴定筛选     

轴索损伤在大鼠实验性变态反应性脑脊髓炎不同时期的动态变化及意义

目的: 研究不同发病时期实验性变态反应性脑脊髓炎(EAE)大鼠轴索损伤的动态变化及意义。方法: 对不同发病时期EAE大鼠进行HE染色判断炎症损害,以免疫组化方法标记β-淀粉样前体蛋白(β-APP)和磷酸化tau蛋白,了解轴索急性损伤及反复发病后的神经变性情况。结果: 急性组大鼠脊髓组织内可见大量炎症细胞弥散分布,在炎症细胞区内有大量β-APP阳性表达,神经纤维变性标志物tau蛋白只有少量沉积;瘫痪组大鼠血管周围有淋巴细胞浸润,呈袖套样分布,β-APP在无炎症的区域也有部分表达,并有tau蛋白大量沉积,提示反复发病的瘫痪大鼠存在持续的轴索损伤,并发生明显的轴索变性。急性组、瘫痪组轴索中β-APP和tau蛋白阳性数均多于正常组,差异显著,急性组和瘫痪组比较,轴索中β-APP和tau蛋白阳性表达数亦有显著差异。结论: (1)发病早期轴索损伤与炎症破坏有关,并呈可逆性。(2)神经变性主要存在于EAE的慢性病程中。(3)在EAE发病过程中轴索损伤呈动态变化,疾病后期轴索发生神经变性并导致神经功能不可逆损伤,在EAE研究中有重要意义。     

金雀异黄素对胶质瘤细胞株U251MG凋亡的影响

目的 研究金雀异黄素(Genistein)对人胶质瘤U251MG细胞凋亡的影响及机制.方法 碘化丙啶(propidium iodide,PI)和Annexin V-FITC双染色的流式细胞分析方法检测凋亡,并通过流式细胞仪和免疫细胞化学染色检测Bcl-2、bax蛋白的表达.结果 Genistein在25 μg/ml和50 μg/ml作用48 h后,早期凋亡率均较对照组明显增加(P<0.01),并呈剂量依赖性.Bcl-2蛋白表达较对照组明显下降(P<0.01),而bax蛋白则较对照组明显增加(P<0.01),呈剂量依赖性.结论 Genistein可诱导胶质瘤U251MG细胞凋亡,其机制可能与其上调bax蛋白以及下调Bcl-2蛋白的表达有关.     

166例支气管哮喘急性发作期患儿呼吸道病原学分析

目的：了解东莞市儿童支气管哮喘急性发作期的病原学分布特征,指导临床治疗。方法：选择东莞市太平人民医院2012年6月至2013年6月收治住院的支气管哮喘急性发作患儿共166例,根据年龄分为〈3岁婴幼儿组和≥3岁儿童组,分别检测病毒、支原体（MP）、衣原体（CP）及细菌等病原体分布情况。结果：166例患儿检出病毒、MP、CP、细菌感染任何一项阳性者共132例,占79.5%,其中检出病毒69例（41.6%）、CP 16例（9.6%）、MP 39例（23.5%）,细菌培养阳性39例（23.5%）。结论：东莞市儿童哮喘急性发作与感染密切相关,病毒感染最多见,MP、细菌感染亦较常见。     

糖尿病前期人群行为生活方式干预效果

<正>糖尿病前期又称为糖调节受损(impaired glucose regulation,IGR),包括空腹血糖受损和糖耐量减低,指血糖水平处于正常与糖尿病之间的时期,是糖尿病的必经阶段和预警信号。IGR患者极易发展为糖尿病,其发生心脑血管病的危险也明显升高[1,2]。同时,IGR患者处于糖代谢紊乱的早期、可逆阶段,适当的行为生活方式干预可避免或延缓其进展为糖尿病,并可降低其发生心脑血管病的发生危险[3,4]。本研究拟探     

急性肝损伤肝脏炎症环境对骨髓间充质干细胞移植疗效的影响

目的:探讨猪急性肝损伤肝脏内不同程度炎症反应对移植骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)存活率和疗效的影响.8):对照组和移植组.每组均按照低浓度D氨基半乳糖胺(D-gal,0.25 g/kg)、高浓度D氨基半乳糖胺(D-gal,0.35 g/kg)给药,分别建立2种急性肝损伤模型,诱导24 h后,对照组动物门静脉注射生理盐水40 mL,移植组动物门静脉移植40 mL PBS(约8×107同种异体GFP-MSCs).2 wk内观察猪肝功能变化、病理变化、血清炎症指标和移植MSCs定植存活情况.结果:低浓度D-gal组血清IL-1、TNF-α水平明显低于高浓度D-gal组,差异有显著性.低浓度D-gal移植组与低浓度D-gal对照组比较,ALT、TB和NH3在早期有显著差异(D2:232.6±57.6 vs 334.4±42.3,12.2±3.3 vs 16.0±1.2,79.7±9.3 vs 127.8±28.2,P<0.05);高浓度D-gal移植组与高浓度D-gal对照组比较,肝功能指标有改善,但无显著意义.低浓度D-gal移植组MSCs定植存活率和肝细胞增殖率显著高于高浓度D-gal移植组.结论:骨髓间充质干细胞移植治疗肝损伤的疗效在很大程度上取决于肝脏炎症反应的程度,炎症反应越严重,移植细胞越不易存活;相反,较低的体内炎症环境有益于MSCs定植、存活和肝细胞再生.     

Genistein对结肠癌细胞HT-29增殖、凋亡的影响及机制探讨

目的观察金雀异黄素(Genistein)对结肠癌细胞HT-29增殖、凋亡的影响,并探讨其作用机制。方法将HT-29细胞分别加入6.25、12.5、25、50、100μg/mL的Genistein进行培养,观察其生长、增殖、凋亡情况并检测其中的Bcl-2、Bax蛋白。结果 25、50μg/mL的Genistein作用48 h后,HT-29细胞的生长受抑制,凋亡率上升(P均<0.01),Bcl-2蛋白表达下降(P均<0.01),Bax蛋白表达上升(P均<0.01),呈剂量依赖性(P<0.05)。各浓度的Genistein作用48 h后对HT-29细胞的增殖有抑制作用,并呈剂量和时间依赖性(P均<0.05)。结论 Genistein既可以抑制HT-29细胞的生长及增殖,又可以诱导其凋亡,其作用机制可能与其上调HT-29细胞Bax蛋白以及下调Bcl-2蛋白的表达有关。     

ABO基因启动子CpG岛甲基化与白血病的相关性

近年来研究发现ABO血型与许多疾病的发生发展相关，某些肿瘤导致A、B血型物质减少的现象已日益引起关注。本研究探讨ABO基因启动子CpG岛甲基化与白血病的相关性。采用流式细胞仪和激光共聚焦显微镜检测了不同血型的健康人群和各种血液病患者外周血红细胞表面ABH抗原的相对含量，用PCR和MSP—PCR分别检测血液病患者和健康人ABO基因启动子DNA序列和CpG岛甲基化，以及ABO基因启动子-102位点的甲基化。结果发现，白血病患者均出现不同程度的A、B抗原减少；通过对比检测健康人和患者的ABO基因启动子序列，未发现有序列的不同，说明启动子序列高度保守；利用重亚硫酸盐对DNA样本进行修饰后，通过对健康人和患者的ABO基因启动子序列进行扩增和测序，发现健康人和再生障碍性贫血患者在ABO基因启动子的CpG岛区没有甲基化的位点，而急性髓性白血病（AML）、急性淋巴细胞白血病（ALL）、慢性粒细胞白血病（CML）和部分骨髓增生异常综合征（MDS）患者在位置为-102、-101、-100、-99和-97位置的C碱基均有甲基化的现象。结论：甲基化是造成白血病患者AB抗原下降的原因；-102、-101、-100、-99和-97这几个甲基化位点有可能是白血病的特异性表现；针对-102住点检测结果提示-102位点是否甲基化有可能作为白血病鉴别诊断中一个有意义的分子标识物。     

急性脑梗死患者血清中载脂蛋白CⅢ水平的动态变化

近年来急性脑梗死(acute cerebral infarct,ACI)已成为常见病之一。据统计,其发病率在目前较高水平上仍有继续上升的趋势。动脉粥样硬化(AS)是脑梗死的基本病因之一,而脂代谢紊乱与动脉粥样硬化的关系异常密切。载脂蛋白C(apolipoprotein C,Apo-C)主要分布在乳糜微粒(chylomicr     

儿童肺炎支原体感染89例临床分析

目的:探讨儿童肺炎支原体(MP)感染的临床特点。方法:回顾性分析89例确诊为MP感染的儿童患者的临床资料。结果:本组患儿以婴幼儿为主,3岁以内42例(47%),3岁～5岁32例(36%),5岁以上15例(17%)。婴幼儿以发热、肺部表现为主,其中表现为喘息者18例(43%)。MP感染并发肺外表现者以年长儿多见,且主要损害神经、血液、泌尿、心血管、消化等系统,表现为脑炎、血小板减少性紫癜、急性肾炎、胸腔积液、心力衰竭及肝功能损害等。结论:儿童婴幼儿感染MP感染的发生率较高;不同年龄组的临床表现各异,有肺外表现者可涉及各个系统,提示对以喘息和肺外表现为主要临床表现的患儿,应警惕MP感染,以免延误治疗。