红花转录因子CtMYB1基因的克隆及原核表达

目的 从红花Carthamus tinctorius 花瓣中克隆转录因子基因CtMYB1,并进行序列分析和原核表达载体的构建。方法 根据红花转录组测序结果中得到的高表达的Unigene123933序列,利用RT-PCR和RACE技术从红花花瓣中扩增得到CtMYB1基因的全长cDNA序列,并进行生物信息学分析;以CtMYB1基因的全长cDNA序列为模板,PCR扩增得到CtMYB1基因的开放阅读框(ORF)序列,构建原核表达载体pEASY-E1-CtMYB1。转化大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达。结果 成功从红花中克隆1个MYB基因,命名为CtMYB1,GenBank登录号为KJ524853。CtMYB1基因全长893 bp,ORF为750 bp,编码249个氨基酸。同时,成功构建了该基因的原核表达载体。SDS-PAGE结果显示该蛋白的大小约30 000,与预测的蛋白相对分子质量一致。结论 成功克隆了CtMYB1基因,构建了原核表达载体,初步证明该基因在大肠杆菌中成功表达。     

红花天冬氨酸激酶基因片段的分离及表达分析

目的克隆红花种子中的天冬氨酸激酶(aspartokinase,AK)基因并研究其在种子不同发育时期的表达量。方法根据红花转录组文库注释信息筛选与红花天冬氨酸激酶(Ct AK)基因相关的Unigenes,设计引物,以红花种子总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增Ct AK基因片段并连接到克隆载体上,经PCR及酶切鉴定,筛选阳性克隆进行测序。同时利用荧光定量PCR技术对其进行基因表达量的分析。结果克隆了红花Ct AK基因的核心片段,分离到486 bp的基因序列。根据Ct AK基因片段设计引物,对不同品种不同发育时期红花种子进行荧光定量PCR分析,Ct AK基因在红花品种川红1号初花后13 d表达量最高。结论系统发育树分析表明,该基因与其他物种的AK基因具有较高的同源性。     

腰六俞穴位埋线结合导引术和腰腿痹通胶囊治疗腰椎间盘突出征临床观察

目的观察腰六俞穴位埋线导引术主结合腰腿痹通胶囊治疗腰椎间盘突出症的临床疗效。方法将160例腰椎间盘突出症患者随机分为两组,观察组80例,采用腰六俞穴位埋线导引术配合口服腰腿痹通胶囊治疗;对照组80例,采用单纯针灸治疗。结果观察组治愈率55.7%,总有效率96.2%;对照组治愈率41.7%,总有效率81.2%。两组比较有显著性差异(P0.05)。治疗后两组PRI、VAS、PPI评分均明显降低,但观察组下降更显著,与对照组比较,有显著性差异(P0.05),结论:采用腰六俞穴位埋线导引术为主结合腰腿痹通胶囊治疗腰椎间盘突出症,能明显改善腰椎间盘突出症患者的临床症状及体征。     

红花黄酮醇合酶基因的全长cDNA克隆及植物表达载体的构建

黄酮醇合酶(flavonol synthase,FLS)是黄酮化合物代谢途径中的关键酶之一。本文在红花转录组测序结果中获得中间序列的基础上,采用RT-PCR和RACE技术,从我国传统中药材红花花瓣中克隆到黄酮醇合酶基因的全长c DNA。该基因全长1 201 bp,开放阅读框1 011 bp,编码336个氨基酸。系统进化分析表明,红花FLS基因编码氨基酸与同属菊科植物氨基酸具有一定的同源性,其中与金光菊的亲缘关系最近。通过分子生物学方法,成功构建p BASTA-FLS植物表达载体。为后续研究该基因的生物功能及黄酮化合物合成机制奠定了基础。     

稳心颗粒对原发性高血压患者心率失常的影响

目的:观察研究稳心颗粒治疗原发性高血压病患者心律失常的临床疗效。方法:选取2012年9月至2014年9月在我院接受治疗的原发性高血压病并发心律失常的患者120名,随机将其分成两组:观察组60人,采用稳心颗粒治疗心律失常,对照组60人,采用美托洛尔治疗心律失常,观察两组患者的临床疗效和不良反应。结果:观察组患者治疗后心律失常改善40例,总有效率为83.33%,对照组的改善为37例,总有效率为61.67%,两组比较(P0.05)。观察组患者有1例发生恶心、呕吐,不良反应率为1.67%;对照组有3人发生头晕、头痛,2例发生恶心、呕吐,1例发生心动过缓,不良反应率为10%,观察组患者的不良反应明显比对照组少(P0.05)。结论:稳心颗粒缓解患者心律失常,而不良反应少,尤其是室性早搏和房性早搏的心律失常的疗效十分显著。     

原花青素对 Aβ25-35诱导的小鼠学习记忆损伤的影响

目的：观察原花青素对淀粉样β蛋白25‐35（Aβ25‐35）诱导的小鼠学习记忆损伤的影响。方法将30只雄性2月龄C57bl／6小鼠随机均分为五组：E组为空白对照;其余四组采用双侧侧脑室注射Aβ25‐35制备的小鼠学习记忆损伤模型后,D组为模型对照,A、B和C组分别用原花青素50、100和150 mg／kg灌胃,连续30 d。D组和E组采用灭菌双蒸水灌胃。采用Y迷宫测试小鼠短期学习记忆能力;HE染色观察小鼠海马CA1区神经元损伤情况;化学比色法测定小鼠血清中丙二醛（MDA）、羟自由基（OH －）、谷胱甘肽（GSH）、总抗氧化能力（T‐AOC）和超氧化物歧化酶（SOD）表达水平;Western blot测定硝基络氨酸（NTS）、过氧化物还原酶1（Prdx‐1）在小鼠海马组织中的表达。结果与D组比较,A、B和C组小鼠短期学习记忆能力较好,CA1区深染神经细胞比例呈剂量依赖性下降,血清GSH、T‐AOC和SOD含量增高,且海马组织中NTS表达水平降低,Prdx‐1表达水平升高（ P＜0．01或P＜0．05）。结论原花青素能改善Aβ25‐35诱导的小鼠氧化应激水平,从而减轻小鼠海马神经退行性病变和小鼠学习记忆损伤。     

高危型HPV分型在监测宫颈CIN行LEEP治疗后转归的临床意义

目的研究高危型人乳头瘤病毒(HPV)分型对宫颈上皮内瘤变(CIN)行宫颈环形电切术(LEEP)治疗后的转归对预测宫颈CIN残留和复发的意义。方法对2010年1月至2011年12月因CIN在门诊行LEEP治疗患者的随访资料进行回顾性研究。结果术后共有122例行阴道镜下组织活检,31例组织病理学证实为CIN,高危型HPV对病变残留和复发的敏感性、特异性、阳性预测值和阴性预测值分别为23.52%,81.18%,28.57%,98.96%。手术后边缘阳性患者HPV感染率为37.50%,边缘阴性患者HPV感染率为2.95%。结论高危型HPV诊断宫颈CIN的阴性预测值高。     

彩色多普勒超声估测肾血流

90例正常人应用彩色多普勒超声方法估测肾血流,其中74例检出,说明这一方法检出率高。74例检出结果是右侧肾动脉内径5±0.4mm;左侧4.9±0.6mm;右侧肾动脉平均流速0.24±0.04m·sec~(-1),左侧肾动脉平均流速0.25±0.03m·sec~(-1);右侧肾动脉最大流速0.46±0.08m·sec~(-1),左侧肾动脉最大流速0.51±0.08m·sec~(-1);右侧肾血流量300±60ml·mn~(-1),左侧肾血流量290±50ml·mn~(-1)。为求得这一方     

糖尿病伴发皮肤病变82例临床分析

糖尿病合并皮肤病变临床常见，可伴有多种皮肤损害^[1]，多与糖尿病病程、病情关系密切。糖尿病确诊前有不少人以皮肤病就诊，如认识糖尿病合并皮肤病的特点，可为早期诊断糖尿病提供线索。有资料显示约6l％的2型糖尿病患者伴发皮肤病变^[2]。我们在2005年9月至2007年8月诊治糖尿病合并皮肤病变患者82例，占同期糖尿病住院患者的38.7％（82／212），总结报告如下。     

虚拟现实康复车的组成及功能

本文主要介绍虚拟现实康复车的组成及功能，目前国内外尚未见有关报道。这种康复车可以使患者根据自己的具体情况来选择适当的训练方式，集心理治疗和康复训练于一体，让患者在轻松愉快的环境中锻炼，进而加快康复进程。