ICOS／B7H2的功能研究进展

1　ＩＣＯＳ Ｂ7Ｈ2的分子生物学特征1.1　ＩＣＯＳ　ＣＤ2 8家族两个成员ＣＤ2 8和ＣＴＬＡ - 4是免疫系统重要的调节分子　 1999年 ,Ｈｕｔｌｏｆｆ等[1]发现了ＣＤ2 8家族第三个成员ＩＣＯＳ(ｉｎｄｕｃｉｂｌｅｃｏ -ｓｔｉｍｕｌａｔｏｒ)分子 ,该分子在静息Ｔ细胞上不表达 ,只有通过诱导Ｔ细胞预激活或活化后 ,Ｔ细胞才能表达这种分子。ＩＣＯＳ分子为Ⅰ型跨膜糖蛋白 ,是由氨基酸序列一致分子量为 2 7ＫＤ和 2 9ＫＤ ,两条肽链经二硫键连接组成的同源二聚体。ＩＣＯＳｍＲＮＡ的ＯＲＦ(ｏｐｅｎｒｅａｄｉｎｇｆｒａｍｅ)编码一个含 1…     

腮腺区肿瘤79例临床分析

腮腺区肿瘤是口腔颌面外科的常见病，在临床上有共同的特征，在组织病理上又各有特点。涎腺肿瘤种类繁多，其治疗方法各不相同。现将我院1991～1995年收治腮腺区肿瘤79例报告如下，并对治疗中的一些原则、方法作一简单分析和总结。1临床资料1．1一般资料：见表1～3。表1年龄情况本组患者年龄最小12岁，最大76岁。表2病程本组患者发病（或发现疾病）时间最短2个月，最长16年。表3肿瘤种类1．2．治疗方法：肿瘤在周围正常腮腺区域性切除4例，解剖面神经肿瘤及腮腺切除67例，肿瘤及腮腺面神经整块切除7例，颈部淋巴结清除术3例，单纯化疗工例，…     

TLR4与TLR9在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨Toll样受体4(TLR4)、TLR9在肝癌发生、发展中的作用。方法搜集临床经病理证实的肝癌及相应癌旁组织标本、肝血管瘤组织标本,分别用免疫组化法及流式细胞术检测TLR4、TLR9表达。结果肝癌组织中TLR4表达明显低于癌旁及肝血管瘤组织,而TLR9表达明显高于癌旁及肝血管瘤组织,P均<0.05。结论TLR4、TLR9与肝癌的发生、发展有关;乙肝病毒可能通过拮抗TLR4表达、激活TLR9通路促进肝癌的进展。     

Mcl-1短发夹RNA在Raw264.7细胞内特异性的筛选

目的:将Mcl-1shRNA转染到Raw264.7细胞内,针对shRNA对小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1表达的影响,筛选出沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。方法:将特异性shRNA经脂质体介导转染小鼠巨噬细胞系Raw264.7;半定量RT-PCR和Western blot分别检测转染24、48 h后Mcl-1 mRNA水平变化和Mcl-1蛋白表达情况,分析对应不同位点的三对特异性shRNA片段对Mcl-1的沉默效果。结果:特异性shRNA片段在24、48 h均能有效降低Mcl-1 mRNA和蛋白水平,沉默效率高于正常组、脂质体组和阴性对照组,差异具有统计学意义(P0.05);对应不同位点的三对shRNA真核表达质粒,其中Mcl-1 shRNA3对Mcl-1 mRNA和蛋白的抑制作用均最强。结论:RNA干扰技术可有效下调小鼠Raw264.7巨噬细胞系中Mcl-1 mRNA水平,明显下调Mcl-1蛋白表达。成功筛选出了沉默Mcl-1基因效果最明显的特异性shRNA真核表达质粒。     

结核杆菌Pup-蛋白酶体系统与结核杆菌持留性的相关性研究

目的:本研究通过诱导结核杆菌在低氧环境中进入持留状态,比较分析不同时间点、不同环境下结核杆菌Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的表达水平差异,探讨研究Pup-蛋白酶体系统对结核杆菌持留性的调控作用。方法:本实验以结核杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株(以下简称为H37Rv菌株)为研究对象,在低氧、有氧环境下进行培养,分别提取不同时间点每组样本菌株的总RNA,并进行纯度鉴定。运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的方法,分别检测各组结核杆菌菌株的Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的表达;比较分析不同时间点、不同环境下的各结核杆菌菌株Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的表达水平差异。结果:在不同时间点对低氧环境下菌株Pup、Dop、Paf A和Mpa的表达水平进行检测,Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的相对表达水平:低氧环境下,与0 d比较,Pup基因在4 d、7 d、10 d分别上调1.66、2.43、2.76倍,Dop基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.38、1.91、2.54、3.28倍,Paf A基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.22、1.75、2.37、2.67倍,Mpa基因在4 d、7 d、10 d分别上调1.66、2.21、2.63倍(P<0.05);以有氧环境组做对照,低氧环境下,相同时间点,Pup基因在4 d、7 d、10 d分别上调1.85、2.81、2.93倍,Dop基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.20、1.76、2.01、3.01倍,Paf A基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.22、1.57、2.29、2.29倍,Mpa基因在2 d、4 d、7 d、10 d分别上调1.16、1.58、2.16、2.69倍(P<0.05)。结论:低氧环境下,不同时间点,Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的相对表达量存在差异;以有氧环境组作对照,相同时间点,低氧环境下与有氧环境下Pup、Dop、Paf A和Mpa基因的相对表达量也存在差异。Pup-蛋白酶体系统对结核杆菌持留性具有一定的调控作用。     

结核分枝杆菌Pup、Dop、PafA、Mpa基因重组穿梭表达质粒的构建及鉴定

目的构建结核杆菌泛素样蛋白-蛋白酶体系统中Pup、Dop、PafA和Mpa基因的重组大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMV361/Pup、pMV361/Dop、pMV361/PafA和pMV361/Mpa,并对其进行鉴定。方法提取结核杆菌国际标准强毒株H37Rv基因组DNA,以此为模板PCR扩增Pup、Dop、PafA和Mpa基因编码序列并测序。扩增产物克隆至大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMV361,并转化E.coli DH5α感受态细胞,利用PCR技术、双酶切技术及基因测序技术对构建的重组穿梭表达质粒进行鉴定。结果 PCR扩增的Pup、Dop、PafA和Mpa基因片段分别为213、1 683、1 377、和1 848bp,与预期长度一致;双酶切鉴定Pup、Dop、PafA和Mpa基因均成功插入穿梭表达质粒pMV361,测序显示插入穿梭表达质粒pMV361的Pup、Dop、PafA和Mpa基因序列与GenBank公布的序列一致。结论成功构建了重组大肠埃希菌-分枝杆菌穿梭表达质粒pMV361/Pup、pMV361/Dop、pMV361/PafA和pMV361/Mpa,为进一步研究结核分枝杆菌泛素样蛋白-蛋白酶体系统奠定了基础。     

PhoP/PhoR基因过表达结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv的构建及鉴定

目的构建PhoP和PhoR基因过表达结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv(以下简称H37Rv),检测不同电压条件下电转化构建的PhoP/PhoR基因过表达H37Rv菌株PhoP/PhoR基因的表达水平。方法提取并鉴定结核分枝杆菌重组穿梭质粒pMV361-PhoP和pMV361-PhoR,利用电转化技术将结核分枝杆菌重组穿梭质粒pMV361-PhoP和pMV361-PhoR导入H37Rv的感受态细胞中,构建PhoP/PhoR基因过表达H37Rv,应用实时荧光定量PCR检测不同电压条件下电转化构建的PhoP/PhoR基因过表达H37Rv的PhoP/PhoR基因表达水平。结果成功构建PhoP/PhoR基因过表达H37Rv。应用实时荧光定量PCR检测不同电压条件下电转化构建的PhoP/PhoR基因过表达H37Rv的PhoP/PhoR基因表达水平,其中在电压为2 300~2 500V的范围内,电压越高,电转化菌的PhoP/PhoR基因表达量越高。结论成功构建了PhoP/PhoR基因过表达H37Rv菌株,以电压为2 500V电转化构建的PhoP/PhoR基因过表达H37Rv的PhoP/PhoR基因表达量较高。     

西藏自治区脑结核瘤手术治疗分析（附16例报道并文献复习）

目的 总结西藏自治区脑结核瘤的诊治经验。方法 回顾性分析西藏自治区人民医院2013年9月至2021年9月手术治疗的16例脑结核瘤的临床资料。结果 15例为脑内单发病灶行开颅显微镜下手术切除病灶;1例多发病灶,手术切除小脑蚓部较大病灶以及左侧丘脑较小病灶。术后均给予标准抗结核治疗2个月,停用吡嗪酰胺,其它3联化疗3个月～1年。16例术后病理检查均诊断为脑结核瘤。1例小脑半球较大病灶术后并发严重肺部感染、电解质紊乱,最终死亡;其余15例术后随访1年,改良Rankin量表评分0分,未见复发。结论 西藏地区结核病高发,对颅内占位性病变,需重视与脑结核瘤鉴别。部分具有手术指征的脑结核瘤,积极手术治疗,联合术后规范抗结核治疗,疗效满意。