血管内皮生长因子C正、反义真核表达载体的构建及鉴定

目的克隆血管内皮生长因子C（VEGF-C）基因,构建VEGF-C正、反义真核表达载体,鉴定并分析其基因序列。方法从处于对数生长期的人SGC-7901细胞中提取组织总RNA,用RT-PCR方法扩增出VEGF-C基因的正、反义全长cDNA。利用大肠杆菌转化并制备质粒pCI-neo和pcDNA3。分别用XbaI＋EcoRⅠ及HindⅢ＋EcoRⅠ双酶切两组质粒和VEGF-C cDNA,并将正、反义VEGF-C cDNA克隆到真核表达载体pcDNA3和pCI-neo中。酶切鉴定、质粒双向测序鉴定重组基因。结果扩增出VEGF-C基因全长cDNA,大小约1.3kb。克隆出正、反义重组质粒为pcDNA3-sense VEGF-C,pCI-neo-antisense VEGF-C,电泳结果显示条带大小约6.8kb。碱基测序证实重组质粒中导入的DNA片段碱基序列与预期的设计路线相符且两片段互补、方向相反。结论正确克隆VEGF-C基因,成功构建了VEGF-C正、反义真核表达载体,为下一步研究反义VEGF-C转染VEGF-C基因高表达的肿瘤细胞后对其体外生长的影响创造了条件,也为进一步研究VEGF-C在胃癌新生淋巴管的形成和转移中的作用奠定了基础。     

经尿道输尿管镜取石术62例报告

我科自从2 0 0 1年11月至2 0 0 3年3月应用尿道输尿管镜取石以来,收治病人6 2例,疗效良好。现报告如下。1　临床资料本组6 2例,男2 8例,女34例,年龄18～73岁。结石大小为0 .5～1.7cm ,上段结石6例、中段结石2 2例,下段结石34例,其中2例为体外冲击波碎石术后石街形成。2　结果入院后均经尿道输尿管镜取石,治疗结果见表1。本组5例失败,其中2例为结石上移至肾盂内,未能取出;2例为输尿管腔扭曲,未能顺利进镜到达结石部位;1例结石为肉芽组织包裹难以处理。表1　输尿管镜取石治疗结果结石位置例数取石成功取石失败成功率%上段6 4 2 6 6 .7中段2 2 …     

联合止血在经耻骨上前列腺摘除术中的应用

目的　探索耻骨上经膀胱前列腺摘除术的有效止血方法。方法　对 116例耻骨上前列腺切除术采用缝扎止血 ,电凝止血 ,明胶海绵压迫止血等方法进行术中止血 ,术后给予温热生理盐水持续膀胱冲洗。记录术中出血量及术后导尿管引流冲洗情况。结果　 116例术中出血约 80～ 2 2 0ml,平均 12 0ml。除 1例术前贫血而输血外 ,均未输血。术后尿液转清最快 1小时 ,最慢 72小时 ,术后出血少 ,未发现术后远期出血等并发症。结论　多途径联合止血方法是前列腺切除术中有效的止血方法。     

从咽拭子中分离出溶血巴斯德氏菌1例

患者,女,36岁,因咽部不适到本院门诊就诊。体温36.8℃,咽部红肿,WBC:8.9×10~9/L,分类:N0.78,L0.22,血红蛋白:15g/L,诊断为急性咽炎。 细菌培养及分离:将咽拭子标本接种于血平板上,放入5％CO_2孵箱,37℃,经24小时培养后观察。血平板上呈灰色露珠状小菌落,菌落周围有β溶血环,挑取菌落涂片,革兰氏染色,镜检,细菌似呈革兰氏阳性的杆菌,菌体两级浓染,拉丝试验阳性。经三次传代后细菌转变为典型的短棒状革兰氏阴性     

PET冷灌装果蔬汁饮料生产线HACCP研究

本次研究以10％真鲜橙PET冷灌装生产线作为研究对象,应用HACCP的原理和方法,通过现场调查和实验室分析,鉴定和评估可能导致污染发生的各种危害因素及其危险性的基础上,确定了四个关键控制点,并确定了相应的关键限值,并对每一关键控制点建立了监控、纠偏措施,制定了验证程序,对每一关键控制点的关键限值进行了有效性的验证,建立了记录保持系统。体系建立后,员工的产品安全意识普遍提高,产品质量稳定,产品合格率明显提高,表明建立的HACCP体系可靠、有效。     

治疗性ERCP与PTCD在胆道梗阻中的临床应用

经皮肝穿刺胆管造影引流 (percuteneous transhepaticchtangcograph drainage,PTCD)在临床中应用多年 ,对胆管疾病有一定的诊断价值 ,且对胆道梗阻的患者可起到引流、减压、退黄的作用。内镜逆行胰胆管造影 (endoscopic retrogradeCholangiopancreatograph,ERCP)经过不断的技术改进和发展 ,目前已经在疾病的诊断和治疗中广泛应用 ,特别是经内镜胆管引流术 (endoscopic biliary drainage,EBD)在阻塞性胆道疾病的治疗中更有独特之处 ,现总结分析如下。1　临床资料1.1　一般资料2 0 0 0年 1月至 2 0 0 1年 12月经 ERCP术行 EBD 3 2例(…     

西比灵、双氯芬酸钠、谷维素联合治疗偏头痛的疗效观察

1998年至今,我们用西比灵、双氯芬酸钠、谷维素联合治疗偏头痛患者130例,获得显著效果,现将结果报告如下。1 资料和方法1.1 病例选择 根据1998年国际头痛协会制定的偏头痛诊断标准,选择病程≥6月、每月发作频率≥1次的普通或典型性     

儿童哮喘病病因及防治

支气管哮喘即哮喘病,是在气道高反应性的基础上,由于各种诱因反复长期存在所引起的广泛性气道狭窄与阻力增加的一种慢性炎症过程,临床表现为哮鸣与呼吸困难。儿童哮喘病是儿童时期一种以发生可逆性气道阻塞为特点的常见病,典型病例多见于4～5岁以上儿童,男女之比为2～3∶1。国内总发病率为0.2～2.0％。好发于春秋二季,夏季病情减轻或缓解,而在青春期前后缓解率高达30～50％,女孩较男孩稍早,这与女孩发育期稍早于男孩相一致。 1 病因 1.1 遗传因素:(内源性哮喘)刘长云等对304例支喘患儿遗传咨询发现,本病有明显遗传倾向,统计     

改良madigan前列腺切除术92例报告

良性前列腺增生 (BPH)是泌尿外科的常见病 ,在BPH的治疗中 ,开放性手术解除梗阻彻底 ,远期疗效好[1] 。然而 ,出血、术后膀胱痉挛、尿道狭窄及尿失禁等是开放性手术有待解决的问题。madigan前列腺切除术 (MPC)因保持了膀胱颈及尿道解剖的完整性而使术后并发症明显减少 ,以其痛苦小、易管理、恢复快而倍受欢迎。但也有一定的局限性。实践中 ,我们体会到只有选择病例恰当、术中显露良好、止血可靠和术后妥善处理才能顺利完成手术并达到满意效果。为了寻找安全有效、并发症少、痛苦小的治疗方法 ,我科在MPC原术式上进行了改进 ,1998年 7月…     

单一试剂测定血清无机磷

报道钼酸铵显色法测定无机磷，该试剂稳定，血清标本不需去蛋白，可直接测定，线性达６．０ｍｍｏｌ／Ｌ，回收率９８．４％，批内ＣＶ为１．７２％，与紫外法对比：Ｙ＝０．９８４Ｘ＋０．１１，适合于手工和自动生化分析仪测定。