食管贲门癌术后胸内吻合口狭窄原因分析

目的：探讨食管癌、贲门癌术后出现胸内吻合口狭窄的原因。方法回顾性分析2008年3月至2014年3月在我院住院且行食管胃胸内吻合手术的300例食管癌和贲门癌患者的临床资料。结果300例患者术后共发生吻合口狭窄22例,发生率为7.3%,术后发生狭窄时间为1~25个月,中位发生时间为2.5个月,其中术后1~5个月发生者19例,占86.4%;应用进口<25#吻合器吻合口狭窄发生率明显高于应用国产25#吻合器以及应用进口25#吻合器[16.0(4/25) vs 8.2(15/183) vs 6.5%(6/92)],差异有统计学意义(P<0.05);而不同手术方式、不同部位吻合后吻合口狭窄发生率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论吻合口狭窄发生与吻合器大小有关。     

组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET7/9对myogenin基因表达的影响

目的利用本组构建的小鼠组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET7/9真核表达质粒及RNA干扰(siRNA)质粒,在体外成肌细胞分化模型C2C12细胞中检测SET7/9对肌肉分化关键基因myogenin基因表达的影响。方法转染SET7/9真核表达质粒pCMV-3tag-6-SET7/9至C2C12细胞,Western blot技术验证其表达;利用实时荧光定量PCR(Real-time PCR)技术检测SET7/9对myogenin基因mRNA水平的影响;利用双荧光素酶报告系统检测SET7/9对myogenin基因启动子活性的影响;转染SET7/9的siRNA质粒,利用Real-time PCR技术检测其抑制效果以及对myogenin mRNA水平的影响。结果 SET7/9真核表达质粒pCMV-3tag-6-SET7/9可在C2C12细胞中有效表达;SET7/9可使myogenin mRNA水平升高并能够促进myogenin启动子活性升高;干扰SET7/9表达可使myogenin mRNA水平降低。结论组蛋白赖氨酸甲基转移酶SET7/9可激活肌肉分化关键基因myogenin的转录。     

方剂学教学中“知常达变”教学思路的应用探讨

常,常规、规律.变,变化、变通.常与变,即一般与特殊,原则与灵活的关系.学习既要全面掌握知识,把握一般规律,避免疏忽遗漏,残缺短板;也要学以致用,融会贯通,不呆板僵化,墨守陈规.教学过程中,教师引导学生既要“知常”又要“达变”.既强调基础知识点的深入、细化,更注重知识面的延伸和扩展.教学实践证明, “知常达变”教学思路符合学生的认知规律,使分散的知识系统化,学生在复习旧识的同时学习和掌握新知识,在潜移默化中培养学生分析和解决问题的能力,有利于提高教学质量,为教学改革提供新的思路,值得深入研究.     

基于实验室指标动态变化的2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠模型中医证候演变规律研究

目的：基于前期研究结果,观察2型糖尿病胰岛素抵抗大鼠在自然发展过程中实验室指标的动态变化与中医证候动态演变的关系。方法：雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为正常组和模型组,采用高脂高热量饮食加小剂量链脲佐菌素（30mg/kg）腹腔注射方式造模,连续观察12周。分别测定实验第0、6、8、10、12周各组血清总胆固醇（total cholesterol,TC）、三酰甘油（triacylglycerol,TAG）、高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）、低密度脂蛋白胆固醇（low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C）、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、白细胞介素6（interleukin-6,IL-6）和瘦素水平以及血浆环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）和环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate,cGMP）水平及全血比黏度、血浆比黏度。结果：与正常组相比,模型组大鼠血清TNF-α、瘦素、IL-6含量及血浆cAMP含量与cAMP/cGMP比值于第6周开始升高,持续至12周,cGMP于第6周开始下降,持续至第12周;血清TC、LDL-C和TAG含量分别于第8周和第10周开始升高,持续至第12周,血清HDL-C含量第10～12周明显降低;不同切变率下的全血黏度及血浆黏度于第10～12周显著升高。结论：结合与中医气阴不足（cAMP、cGMP、TNF-α和IL-6等）、痰浊（血脂）、血瘀证（血黏度）相关联的实验室指标和大鼠外观行为的动态变化的特点,推断出2型糖尿病胰岛素抵抗模型大鼠中医证候演变的特点,即以胰岛素抵抗为病理背景,以气阴两虚为基本病机,随造模时间延长相继出现气阴两虚、气阴两虚兼痰浊、气阴两虚兼痰瘀的病机演变趋势。     

染色质体外组装相关蛋白的表达纯化及组装体系的建立

目的提取并纯化真核细胞核内组蛋白,表达并纯化重组组蛋白、染色质组装相关因子NAP-1(nuclear assemblyprotein-1)及ACF(ATP-utilizing chromatin assembly and remodeling factor),并建立无细胞体外染色质组装体系。方法在大肠杆菌BL21中表达并应用离子交换层析纯化组蛋白,从真核细胞HeLa细胞核中提取并应用羟基磷灰石纯化组蛋白八聚体,利用杆状病毒表达系统在昆虫细胞Sf9中表达并纯化组装相关因子,应用纯化得到的蛋白在适宜条件下进行染色质体外组装,并用微球菌核酸酶酶切检测。结果获得了高纯度的原核表达的组蛋白,真核细胞组蛋白八聚体及组蛋白特异伴侣NAP-1和ACF;建立了由质粒DNA、纯化的真核细胞核内重组组蛋白、重组NAP-1、重组ACF及ATP为核心成分的体外染色质组装的无细胞系统,经微球菌核酸酶检测组装成功。结论利用体外分离纯化的多种重组蛋白,可成功构建基因的染色质模板,为在体外染色质模板上进行基因转录的调控机制研究奠定了基础。     

温肾健脾方对糖尿病大鼠肾功能、血液流变性及微循环的影响

目的 探讨温肾健脾方治疗糖尿病肾病(DN)的可能作用机制.方法 将链脲佐菌素诱导的DN大鼠36只随机分为模型对照组、温肾健脾组、缬纱坦组各12只,分别以蒸馏水10 ml/kg、温肾健脾方20 g/kg、缬沙坦胶囊25mg/kg,另取12只正常大鼠为正常对照组(蒸馏水10 ml/kg).连续给药8周后,检测各组大鼠体重、肾功能、血中蛋白水平、肾皮质层血流量及血液流变学指标.结果 与正常对照组比较,模型对照组大鼠体重显著降低,葡萄糖(GLU)、尿素氮(BUN)显著上升,总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)显著下降(P＜0.01),温肾健脾组和缬沙坦组显著改善BUN和TP水平(P＜0.05或P＜0.01).模型对照组较正常对照组肾脏皮层微循环血流量显著升高(P＜0.01),温肾健脾组和缬沙坦组较模型对照组肾脏皮层微循环血流量显著下降(P＜0.01).模型对照组较正常对照组全血黏度、血浆黏度、卡松黏度及红细胞聚集指数均显著升高(P＜0.05或P＜0.01);与模型对照组比较,温肾健脾组显著降低血浆黏度(P＜0.05). 结论 温肾健脾方治疗DN的机制可能与改善DN大鼠肾功能、降低血液黏稠度、改善肾微循环有关.     

组蛋白赖氨酸甲基化在表观遗传调控中的作用

组蛋白赖氨酸的甲基化在真核基因表观遗传调控中起着关键作用。迄今已知,在组蛋白H3中有5个赖氨酸(K4、K9、K27、K36、K79)和组蛋白H4中的1个赖氨酸(K20)可被特异的组蛋白赖氨酸甲基转移酶甲基化。这不同位点的甲基化效应是不同的,H3-K9、H3-K27、H4-K20甲基化具有抑制效应;H3-K4、H3-K36、H3-K79甲基化具有激活效应,而且组蛋白甲基化与其它组蛋白共价修饰之间以及DNA甲基化之间存在对话。     

曲古柳菌素A对肺癌A549细胞凋亡的影响

目的:检测不同浓度的组蛋白去乙酰化酶抑制剂古曲柳菌素A(TSA)对A549细胞周期及细胞凋亡的影响,探讨TSA抑制A549肺癌细胞的分子机制.方法:以流式细胞术分析,Annexin V/PI 法,免疫印迹研究 TSA 对A549 细胞的细胞周期、凋亡及Bax蛋白水平变化的影响.结果:TSA处理后,100nmol/L和400nmol/L引起细胞G0/G1及G2/M期阻滞.Annexin V/PI法显示TSA可诱导细胞凋亡.Bax蛋白的表达随着TSA浓度的增高而增强.结论:不同浓度的TSA对A549细胞周期阻滞影响不同,低浓度可诱导细胞凋亡.     

开展机能学实验培养创新人才

21世纪是全面推行素质教育的时代.传统的教育观念和教学方法已不适应时代发展的需要,深化教育和教学改革势在必行.