136株革兰阴性杆菌ESBLs和AmpC酶的检测

随着抗生素的广泛使用,细菌的耐药性已成为人们关心的热点问题.已发现越来越多的革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性.细菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和1-型β-内酰胺酶(AmpC酶)是革兰阴性杆菌对β-内酰胺类抗生素产生耐药性的机制之一.     

蛋白芯片技术检测幽门螺旋杆菌的毒素抗体

目的:利用蛋白芯片技术检测病人血清中幽门螺旋杆菌(Hp)毒素相关蛋白(CagA)、空泡毒素(VacA)及尿素酶抗体(Ure),并与免疫印迹技术进行客观分析评价。方法:对145例临床诊断Hp感染的病人留取血清,深低温冻存同时作蛋白芯片检测和免疫印迹检测。结果:经x~2检验,前述两种方法检测 CagA、VacA、Ure抗体的结果对比均P>0.05。结论:蛋白芯片技术与免疫印迹技术相比,检测结果均差异无显著性。蛋白芯片法操作简单,样品用量少,具有快速、准确、检测指标多等优势,是一种很有发展前途的检验技术。     

B型钠尿肽固相时间分辨免疫荧光分析法的建立及其临床应用

目的采用一种新的铕螯合物BHHCT,制备高灵敏度荧光标记物,建立B型钠尿肽(BNP)固相时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA)。方法使用2株匹配的单克隆抗体,其中1株可以识别BNP分子C-端区,另1株生物素化单抗能识别分子内环结构,分别作为捕获抗体和检测抗体,并利用制备的SA-BHHCT-Eu3 作为示踪物,建立双抗体夹心法,检测正常对照组和心功能Ⅰ~Ⅳ级心力衰竭患者组血液BNP含量。结果本法测定BNP的灵敏度为12pg/ml,批内和批间CV分别为3.9%和5.2%,平均回收率为97.3%,线性范围为20~4000pg/ml。对照组(n=110)、心功能Ⅰ级(n=31)、Ⅱ级(n=30)、Ⅲ~Ⅳ级(n=25)各组血浆BNP浓度分别为(69±37)、(84±46)、(346±134)和(932±326)pg/ml;心衰各组BNP水平显著高于对照组(P<0.05或P<0.001)。以BNP100pg/ml为cutoff值,诊断心力衰竭(HF)的特异性为82.4%,敏感性为91.6%。结论应用铕螯合物BHHCT建立的固相TrFIA法测定BNP,是一个很好的诊断心衰和监测其严重程度的实验诊断指标。     

结核分枝杆菌快速药敏方法学研究进展

在结核病防治过程中 ,结核分枝杆菌耐药尤其是多重耐药结核分枝杆菌 (ＭＤＲ ＴＢ)问题已成为有效控制结核病的重要障碍[1] 。ＭＤＲ ＴＢ的产生与临床不规范治疗密切相关 ,而规范的治疗需要快速敏感的药敏试验为指导。建立快速敏感的结核分枝杆菌药敏试验方法已成为有效控制结核病的首要条件[2 ] 。然而目前分枝杆菌药敏试验仍多采用传统方法即绝对浓度法、比例法和抗性比例法 (ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｒａｔｉｏｍｅｔｈｏｄ) ,这些方法均具有生长依赖性 ,在得到分离菌株后需要 3～ 4周才能获得药敏试验结果[3 ] 。建立于 2 0世纪 80年代的…     

阿莫西林-克拉维酸钾(14:1)颗粒剂生物等效性研究

目的:测定阿莫西-林克拉维酸钾(14:1)颗粒剂生物等效性。方法:18名健康男性志愿者分别采用2制剂、2周期(周期间隔为5 d)双交叉试验方法,口服受试和参比片剂1片(每片含阿莫西林600 mg,克拉维酸钾42.9 mg),采用微生物学方法测定血浆中药物浓度。结果:受试及参比制剂的主要药动学参数分别为:阿莫西林AUCo-sh分别为(25.5±4.12)mg·h/L和(25.0±4.05)mg·h/L;Cmax分别为(9.95±1.45)mg/L和(9.48±1.66)mg/L。克拉维酸钾的AUC0-8h分别为(1.38±0.467)mg·h/L和(1.46±0.508)mg·h/L;Cmax分别为(0.648±0.586)mg/L和(0.586±0.167)mg/L。结论:经统计分析结果显示两制剂生物等效。     

胰酶消化痰液提高痰液真菌培养阳性率

为寻找提高痰液真菌培养阳性率及准确快速鉴定真菌的方法 ,我们用胰酶消化的和未消化的 2 0 0份痰液同时作真菌培养 ,并用两种方法鉴定真菌 ,对结果进行比较分析 ,报告如下。1　材料与方法1.1　标本来源　 2 0 0份痰液标本均来自我院近期临床呼吸道感染患者。1.2　试剂1.2 .1　 10 ｇ/Ｌ胰酶　称 10 ｇ胰酶 (美国Ｄｉｆｃｏ公司 )加入 1Ｌ无菌 ｐＨ 7.4,0 .0 1ｍｏｌ/ＬＰＢＳ中。1.2 .2　沙保罗培养基 (ＳＤＡ)　按常规法配制[1] 。1.2 .3　柯玛嘉念珠菌显色培养基 (ＣＨＲＯＭａｇａｒ)　按试剂说明书配制。1.2 .4　ＡＰＩ2 0ＣＡＵＸ鉴定…     

BIO-RAD质控物的基质效应浅析

自 1 974年基质效应首次报道以来[1 ] ,基质效应对测定的干扰越来越受到重视。实验室在分析时不用考虑新鲜标本的基质效应 ,而以其他不同于新鲜标本的物质 (如质控物 )作为样本测定时 ,由于其具有不同的物理、化学特性 ,就会使测定结果产生偏差 [2 ]。本实验室存在几种生化检测系统 ,使用的方法不一样 ,经常需用质控品比较不同仪器和不同方法间结果的一致性 ,由于基质效应的存在 ,质控物在两种检测系统结果一致并不说明各仪器、方法间没有误差 ;而测定结果不一致 ,是仪器、方法本身的误差造成的 ,还是由于质控物的基质效应引起的 ,也很难判…     

Alu—PCR用于非小细胞肺癌手术患者预后的研究

目的建立Alu—PCRDNA指纹分析方法，研究癌组织DNA指纹改变在临床非小细胞肺癌患者手术预后中的意义。方法收集24例临床确诊非小细胞肺癌患者手术切除之新鲜肿瘤组织和距离肿瘤边缘5cm以上之正常肺组织，以及7例非肿瘤肺组织和10例正常体检者的外周血白细胞。用酚／氯仿抽提法提取其DNA，以Alu特异性引物，扩增Alu序列之间的基因组，得到肿瘤和正常组织的DNA指纹，并对患者手术后随访，观察DNA指纹的改变在患者预后中的意义。结果实验中7例正常肺组织（非肿瘤）和10例正常体检者外周白细胞，用Alu—PCR方法所产生的DNA指纹条带呈单态性，作为指纹分析中的正常对照；24例肺癌临床标本中，有12例肿瘤组织DNA指纹与正常组织指纹有差别，占50％，表现为DNA条带的缺失、增加和条带强度的差异。未能获得能提示患者预后情况的特异性的指纹条带；DNA指纹有改变的患者（10例）术后1年死亡率（80％）显著高于DNA指纹未改变者（9例）术后1年死亡率（22．2％）（Χ^2=6．343，P=0．023）。结论采用Alu—PCR方法所得到的临床非小细胞肺癌肿瘤组织的DNA指纹改变是多样性的，未能发现提示预后的特异性的指纹条带；Alu—PCR指纹分析提示，DNA指纹有改变的患者预后比没有改变的患者预后差。     

酶法肌酐试剂对血清钙镁测定结果的影响

目的应用全自动分析仪分析酶法肌酐试剂对血清钙和镁测定结果的影响。方法分别对混合血清单独检测钙和镁，以及测肌酐后再测定钙和镁，比较前后差异；将混合血清均分为6份，分别加入不同量的酶法肌酐试剂后检测钙和镁，并以加等量的蒸馏水作为对照，比较前后差异。结果混合血清单独测定钙和镁均值（mmol／L）分别为2．38、0．95，测肌酐后再测均值（mmol／1．）分别为2．16、0．86，前后比较差异有显著性；混合血清加入酶法肌酐试剂后测得钙和镁浓度较对照组为低，且降低程度与加入量相关。结论酶法肌酐试剂中与H2O2显色的物质TOOS为含羟基和甲氨基等配基的配位体，属硬碱，能与属硬酸的钙和镁离子形成稳定的络合物，从而影响钙镁离子测定。     

我国临床微生物检验中的若干问题

随着现代信息技术和医学生物学 ,特别是医学分子生物学的发展 ,医学微生物学检验技术近年来也获得了长足的进步 ,并逐渐成为指导临床感染诊断和治疗的重要依据。然而 ,目前我国的医学微生物学检验事业远未达到令人满意的程度 ,还有许多问题需要我们去思考、研究和解决 ,需要我们医学微生物学科和临床医学的同道们通力合作共同奋斗。一、我国医学微生物检验的发展现状改革开放以来 ,随着国民经济的飞速发展 ,检验医学和其他医学学科一样 ,发生了深刻的变化。从仪器设备上讲 ,在全自动生化分析仪、血液分析仪、尿液分析仪和免疫分析仪进入检验…