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目的 通过抑制性消减杂交(SSH)技术构建丙型肝炎病毒(HCV)NS5A反式激活蛋白5(NS5ATP5)的反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库,筛选HCV NS5ATP5蛋白反式激活靶基因。方法 以HCV NSSATP5表达质粒pcDNA3.1(-)-NSSATP5转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,从中提取mRNA并合成cDNA,经RsaⅠ酶切后将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性PCR,将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR后进行测序及同源性分析。结果 成功构建人HCV NSSATP5蛋白反式激活相关基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到91个白色克隆,进行菌落PCR分析,其中86个均得到100~1000bp插入片段。挑取32个插入片段测序分析。其中包括结缔组织生长因子、纤维连接蛋白、胰岛素样生长因子结合蛋白1等重要的基因。结论 成功筛选出HCV NS5ATP5的上调基因。 相似文献
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目的建立同时测定“柴胡-白芍”药对提取物中芍药苷、柴胡皂苷a及柴胡皂苷d的超高效液相色谱法。方法采用WatersAcquityUPLC系统;色谱柱:Water sXSELECT^TM HSST3(2:1mm×100mm,2.5μm);柱温:30℃;以0.1%(体积分数)H,PO4水溶液和乙腈为流动相进行梯度洗脱;流速:0.4mL/min;检测波长:210nm。结果芍药苷、柴胡皂苷a及柴胡皂苷d3种成分基本分离,线性关系良好。芍药苷的线性范围为0.1616~1.616μg(r=1.0000),平均回收率为100.8%;柴胡皂苷a的线性范围为0.0508~0.508μg(r=0.9996),平均回收率为99.4%;柴胡皂苷d的线性范围为0.0538—0.538μg(r=0.9998),平均回收率为101.2%。结论本方法简便、快捷、准确、重复性好,可实现柴胡一白芍药对提取物的多指标质量控制。 相似文献
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目的编制青少年危险行为问卷(Youth Risk Behavior Survey Questionnaire,YRBS)中文版,并考察其信度与效度。方法 依据我国具体的文化特征,对美国的2009版本的青少年危险行为问卷进行改编为中文版的青少年危险行为问卷。通过分层整群抽样从2008年汶川特大地震9个极重灾区的110所学校的4~9年级的学生中纳入5 486人进行问卷调查。结果 内部一致,中文版青少年危险行为问卷总量表的Cronbach sα为0.730,10项分量表的Cronbach sα为-0.415~0.857。区分度,11个分量表与总量表分相关系数为0.288~0.641,每个分量表与各自分量表中的条目的相关系数为0.176~0.892,P均为0.000。因子分析:规则安全及暴力行为分量表均提取了2个公因子,其余的8个分量表,均提取1个公因子。内容效度即精神科医师及临床心理学家对该量表的内容进行评估,确保该量表有较好的内容效度。结论 青少年危险行为问卷在地震后幸存的青少年中具有较好的信度与效度,可作为该群体行为问题的一个较好的筛查工具,该结论仍有待进一步的验证及完善。 相似文献
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随着医学模式的转变 ,必须加强医学生的预防医学教育 ,以适应医学和社会发展的需要。军队卫生学属于预防医学 ,它是在预防医学的基础上结合军队特点而发展起来的。医疗设施卫生主要包括医院建筑卫生、院内感染及其预防、医院污染物的处理措施等内容。此内容的讲述对医学生将卫生学理论联系到医院实际 ,防止院内感染及人群中疾病的流行 ,提高人群健康水平 ,增强医生的自我保护能力等都有很大的帮助。调查表明 ,80 %以上的学员认为学习医疗设施卫生对今后的工作有帮助。因此 ,有必要在军队卫生学的课程中增设医疗设施卫生的内容 相似文献
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39.
目的探讨在高糖环境下人肾小球系膜细胞与内皮细胞间相互作用对TGF-β1mRNA表达的影响和茶多酚的干预作用.方法建立系膜细胞和内皮细胞共培养模型,分空白对照组、高糖组、茶多酚干预组和茶多酚对照组,培养0、12、36 h后,应用RT-PCR法检测模型中两种细胞转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达情况.结果高糖可上调共培养模型中系膜细胞和内皮细胞TGF-β1mRNA表达,其作用显著强于单独培养的系膜细胞和内皮细胞,茶多酚可降低共培养模型中细胞TGF-β1mRNA表达,且效果优于单独培养.结论(1)高糖环境下系膜细胞和内皮细胞间存在相互作用,这种作用能促进两种细胞TGF-β1mRNA高表达.(2)茶多酚通过对TGF-β1mRNA表达的抑制影响细胞间相互作用. 相似文献
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0 引言乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)不仅可引起急慢性病毒性肝炎,而且与肝纤维化和肝细胞癌(HCC) 的发生及发展密切相关.HCC是严重危害人民健康的疾病之一,在对HCC的致病机制的探索中,原癌基因也成为研究的的重点.研究发现,HBV和HCV均能调节原癌基因c—jun的激活与表达,从而导致肝细胞异常增 相似文献