五虎汤抑制STAT3蛋白调控树突细胞自噬治疗RSV诱发哮喘小鼠

目的 探讨五虎汤对呼吸道合胞病毒（RSV）诱发哮喘小鼠模型的治疗作用机制、肺组织信号传导及转录激活因子3（STAT3）蛋白表达的影响。方法 100只SPF级雌性BALB/c小鼠,用RSV复合鸡卵清蛋白（OVA）雾化吸入激发哮喘,造模成功后随机分为正常组、模型组、阳性药组（地塞米松,1.82 mg·kg^-1）,STAT3抑制剂组（STATTIC,3.75 mg·kg^-1）,STAT3诱导剂组（colivelin,1.0 mg·kg^-1）及五虎汤低、中、高剂量组（1.6,3.2,6.4 g·kg^-1）,并给予相应药物干预2周。使用动物呼吸机检测小鼠气道反应性值;采用苏木素-伊红（HE）,过碘酸希夫（PAS）及马松（Masson）染色分别观察小鼠肺组织病理学改变、杯状细胞分泌黏液和气道胶原沉积情况;酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清中白细胞介素-6（IL-6）,白细胞介素-10（IL-10）,白细胞介素-17（IL-17）含量;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定转化生长因子-β₁（TGF-β₁）,α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA） mRNA在肺组织中的表达;透射电镜检查肺组织自噬体;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺组织树突细胞（DC）中自噬相关蛋白5（ATG5）,Sequestosome 1（SQSTM1）蛋白表达及肺组织中STAT3,磷酸化（p）-STAT3蛋白表达情况。结果 与正常组比较,模型组小鼠气道反应性增高（P<0.01）,肺组织周围炎性细胞浸润,杯状上皮细胞过度化生和气道胶原广泛沉积,血清中IL-6和IL-17含量显著升高,IL-10含量显著降低（P<0.01）,肺组织中TGF-β₁,α-SMA mRNA表达增加（P<0.01）,肺组织自噬体数量增加,肺组织DC中ATG5蛋白表达上升,SQSTM1表达降低（P<0.01）,肺组织中STAT3,p-STAT蛋白表达水平显著升高（P<0.01）;与模型组比较,五虎汤和STATTIC均可明显降低哮喘小鼠气道高反应性（P<0.05,P<0.01）,有效缓解RSV诱发哮喘小鼠肺组织病理情况,降低血清中IL-6和IL-17表达含量（P<0.01）,升高哮喘保护细胞因子IL-10含量（P<0.01）,降低肺组织中TGF-β₁,α-SMA mRNA水平（P<0.01）,进一步增加自噬小体数量,显著增强肺组织DC中ATG5水平及下调SQSTM1水平（P<0.05,P<0.01）,并可下调肺组织中STAT3及p-STAT3水平（P<0.01）。结论 五虎汤可能通过抑制STAT3蛋白,上调肺组织DC自噬水平,从而有效改善RSV诱发哮喘小鼠气道炎症、气道重塑,降低气道高反应性。     

从干预信号转导探讨咳喘宁防治病毒诱发小儿哮喘的新思路

以哮喘发生、发展的始动环节为突破点,以防止伏痰的形成为主要目的 ,首次将信号转导途径作为咳喘宁防治病毒诱发哮喘机理研究的新靶点进行探索性研究,为中医药防治本病开辟一条新的途径,为探索中医化痰法及中医药防治儿童哮喘研究提供新的思路。     

多元化教学方法在《中西医结合儿科学》教学中的实践与体会

在我国高等教育改革与深化的新形势下,为了实现培养全新应用型人才的目标,提高学生的实践能力,创新能力和综合素质,在辨析了教学方法与教学效果的关系,以及《中西医结合儿科学》教学的侧重点的基础上,对《中西医结合儿科学》教学中教学方法的多元化方面进行了实践与探索。     

咳喘宁口服液对支气管哮喘大鼠PI3K信号转导途径的影响

目的观察咳喘宁口服液对呼吸道合胞病毒诱发支气管哮喘(以下简称“哮喘”)大鼠CD4+、CD8+T细胞内磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)-110α表达的影响,探讨其防治病毒诱发哮喘的机理。方法将SD大鼠随机分为磷酸盐缓冲液(PBS)对照组、模型组、地塞米松＋沙丁胺醇组(阳性药组)和咳喘宁组。建立卵白蛋白哮喘大鼠模型,并以呼吸道合胞病毒激发哮喘。采用磁珠结合法分离CD4+、CD8+T细胞,使用流式细胞仪检测T细胞内PI3K-110α的表达水平。结果模型组大鼠CD4+、CD8+T细胞百分率及CD4+、CD8+T细胞内PI3K-110α的表达水平显著高于PBS对照组、阳性药组及咳喘宁组,差异有统计学意义(均P＜0.01)。经Pearson相关分析,各组大鼠CD4+、CD8+T细胞百分率与CD4+、CD8+T细胞内表达的PI3K-110α的表达水平无明显相关性。结论 CD4+、CD8+T细胞参与了哮喘免疫平衡调节,其表达的PI3K在病毒诱发哮喘模型中明显增高。咳喘宁口服液能抑制CD4+、CD8+T细胞内PI3K的表达,可能是其治疗哮喘的免疫机制之一。     

咳喘宁对哮喘豚鼠IL-13的调节作用

目的观察咳喘宁对哮喘豚鼠的IL-13调节作用。方法将40只豚鼠随机分为:正常对照组,不做任何处理;模型组,用卵清蛋白诱喘;咳喘宁治疗组,使用卵清蛋白诱发哮喘后,用咳喘宁治疗;地塞米松组,使用卵清蛋白诱发哮喘后用地塞米松治疗。采用酶联免疫双抗体夹心(ELISA)法检测各组血中和肺泡灌洗液中IL-13的水平。结果与模型组比较,咳喘宁组血和肺泡灌洗液中的IL-13水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),其作用较地塞米松略差,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论咳喘宁防治哮喘的作用机制与降低IL-13水平有关。     

奥苏贝尔有意义学习理论对中西医结合儿科学教学的启示

有意义学习理论是奥苏贝尔教育心理学中的最重要的观念之一,论文在学习有意义学习的基本内涵、有意义学习的条件及有意义学习的心理机制的基础上,阐述了有意义学习理论对中西医结合儿科学教学的一些启示。     

咳喘宁治疗病毒诱发小儿哮喘及对患儿Th亚群的调节作用

目的：观察咳喘宁防治病毒诱发小儿哮喘的临床疗效及对患儿Th亚群细胞因子表达的影响。方法：将120例病毒诱发哮喘患儿随机分为咳喘宁治疗组60例和西药对照组60例，观察两组临床疗效及患）Lb-清中IL-12、IL-4的含量变化。结果：治疗组总有效率91．67％，临床控制率35％，均明显优于对照组（分别为P〈0．01、P〈0．05）；咳喘宁能显著提高患儿血中IL-12、降低IL-4，其作用明显优于对照组（P〈0．01）。结论：咳喘宁防治病毒诱发小儿哮喘具有较好疗效，其作用机制可能与提高患儿IL-12水平、降低IL-4水平有关。     

截哮口服液对RSV感染小鼠IL-4,IL-5的影响

目的：观察截哮口服液对RSV感染小鼠血清中IL-4、IL-5的影响。方法：将70只小鼠随机分成截哮口服液高剂量组、中剂量组、低剂量组、病毒唑组、模型组、正常组，用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）测定各组小鼠血清中IL-4、IL-5的水平。结果：截哮口服液各剂量组与病毒唑组比较IL-4均有显著差异（P〈0．05）；中剂量组、病毒唑组与模型组比较IL-4有显著差异（P〈0．05）。中剂量组与病毒唑组比较IL-5有显著差异（P〈0．05），中剂量组和病毒唑组与正常组比较IL-5有显著差异（P〈0．05），中剂量组与高剂量组、低剂量组、模型组比较IL-5有显著差异（P〈0．05）；高剂量组和低剂量组比较IL-5无显著差异。结论：截哮口服液对呼吸道合胞病毒感染小鼠血清中IL-4、IL-5有降低作用。     

中医药治疗小儿过敏性紫癜用药规律探讨

过敏性紫癜（ henoch －schonlein purpura, HSP）为小儿常见病、起病急,临床表现多变且易复发、少数难治愈,其发病率逐年上升,严重影响儿童健康及生活质量［1］。中医药治疗HSP疗效显著而稳定,能有效防止其复发,且可预防和治疗并发症。我们通过收集近年来有关中医药治疗小儿HSP的验方,对其基本证型治疗中用药情况进行统计,并运用数据挖掘技术中关联规则方法分析,探讨其用药规律,旨在为中医儿科临床治疗HSP的合理用药提供依据。     

咳喘宁对RSV诱发哮喘大鼠ICAM-1表达的影响

目的：研究咳喘宁对RSV诱发哮喘大鼠气道重塑形态学及ICAM-1表达的影响,阐明其防治哮喘的作用机制。方法将60只幼年SD雄性大鼠随机分为6组,即正常组,模型组,泼尼松与沙丁胺醇治疗组（简称泼+沙治疗组）,咳喘宁大、中、小剂量组,每组10只。用卵清蛋白复制大鼠哮喘模型,并予呼吸道合胞病毒（RSV）激发哮喘。大鼠处死后肺组织行HE染色观察炎症反应;图像分析软件测定支气管壁厚度及气道壁面积;免疫组化pv-9000二步法检测ICAM-1表达水平。结果与模型组相比,各治疗组炎症反应较轻。各治疗组支气管壁厚度及气道壁面积改变较小,与模型组相比差异有统计学意义（P<0.01）;咳喘宁中剂量组较泼+沙治疗组作用略差,但差异无统计学意义（P>0.05）;咳喘宁大、小剂量组与泼+沙治疗组相比,其作用明显较差,有统计学意义（P<0.05）。各治疗组与模型组比较,其肺组织中ICAM-1表达均降低,有显著性差异(P<0.01);泼+沙治疗组ICAM-1表达稍低于咳喘宁中剂量组,但差异无统计学意义（P>0.05﹚。结论咳喘宁可有效抑制气道重塑,其机制可能与降低肺组织中ICAM-1表达有关。