AnnexinⅠ N末端肽对哮喘大鼠肺泡灌洗液PGD2、IL-5水平及肺功能检测气道反应性的研究

目的:通过对哮喘大鼠肺泡灌洗液(BALF)中PGD2、IL-5水平及肺功能的检测,探讨Annexin Ⅰ的N-末端肽段Ac2-26在W istar大鼠哮喘模型气道炎症中的作用。方法:清洁级雌性Wiatar大鼠40只随机分为4组,分别为正常对照组(A组),哮喘组(B组),地塞米松治疗组(C组)和Ac2-26治疗组(D组),以卵清蛋白复制大鼠哮喘模型,ELISA法检测肺泡灌洗液中PGD2、IL-5含量,乙酰甲胆碱(MCH)诱发气道高反应性。结果:B组大鼠BALF中PGD2以及IL-5水平均明显高于A组(P<0.01)。C组和D组大鼠BALF中PGD2和IL-5水平均明显低于B组(P<0.01)。C组和D组比较也具有统计学意义。结论:本实验在成功地建立哮喘动物模型基础上,观察到了AC2-26治疗组在改善气道炎症反应作用中较地塞米松治疗组弱,抗炎作用还有待于研究。     

支气管肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞、白细胞介素-17及干扰素-γ与成人哮喘控制水平相关性研究

目的 探讨支气管肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞(eosnophils, EOS)、白细胞介素-17(interleukin-17, IL-17)及干扰素-γ(interferon-γ, IFN-γ)与成人哮喘控制水平相关性。方法 选取本院2018年12月—2021年6月收治的51例成人哮喘患者为病例组,同期于本院行气管镜肺泡灌洗检查的20例健康成人作为对照组。获取2组支气管肺泡灌洗液,检测其EOS、IL-17、IFN-γ水平。评估哮喘ACQ-5评分。结果 病例组支气管肺泡灌洗液EOS、IL-17水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);随着哮喘控制程度的下降,支气管肺泡灌洗液EOS、IL-17水平逐渐增加,IFN-γ逐渐下降,差异有统计学意义(P<0.05);EOS、IL-17与哮喘ACQ-5评分成正相关关系,差异有统计学意义(P<0.05)。IFN-γ与哮喘ACQ-5评分无显著相关性(P>0.05)。受试者工作特征曲线分析显示,IL-17诊断哮喘灵敏度及特异度较高,EOS特异度高,IFN-γ灵敏度高。结论 成人哮喘支气管肺泡灌洗液EOS、IL-17水平升高,I...     

γ-维生素E对哮喘小鼠血清及肺泡灌洗液嗜酸性粒细胞趋化因子的影响

目的 探讨γ-维生素E(γ-T)对哮喘的治疗作用及机制。方法 将40只雄性Balb/c小鼠(4周,18~20 g)随机分为正常组、哮喘组、地塞米松组及γ-T治疗组。给予小鼠腹腔注射及雾化吸入卵白蛋白建立哮喘气道炎症反应模型,分别给予地塞米松及γ-T,正常组仅给予生理盐水。28 d后处死小鼠,留取血清及肺泡灌洗液。ELISA法测定各组血清及肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞趋化因子(eotaxin)的含量。用one-way ANOVA检验组间差异,P＜0.05具有统计学意义。结果 哮喘组小鼠血清及肺泡灌洗液中eotaxin浓度均较正常组升高,地塞米松组及γ-T组均较哮喘组下降。在血清中地塞米松组下降最明显,γ-T组次之,γ-T组与哮喘组,γ-T组与地塞米松组相比差异无统计学意义(P>0.05);在BALF中,γ-T组的eotaxin下降最明显,与哮喘组相比,二者间差异明显(P<0.05);γ-T组与地塞米松组相比,二者差异无统计学意义(P>0.05)。 结论 γ-T有利于减少哮喘小鼠肺组织eotaxin,γ-T可能是有用的抗哮喘药物。     

胸腺和活化调节趋化因子在哮喘大鼠中的作用及布地奈德干预的影响

目的 探讨胸腺和活化调节趋化因子(thymus and activation regulated chemokine, TARC)在哮喘大鼠中的作用及吸入布地奈德干预对TARC的影响。方法 30只SD大鼠采用随机区组设计分为正常对照组、哮喘组及布地奈德干预组。以卵清白蛋白(ovalbumin, OVA)致敏激发法制备大鼠哮喘急性模型, 干预组于14 d雾化吸入布地奈德进行干预。于最后1次雾化后24 h, 尾静脉取血, 支气管肺泡灌洗留取灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid, BALF), 留取右肺组织标本。行血清和BALF中细胞计数, 应用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清和BALF中上清液中嗜酸粒细胞(Eos)、IL-4及TARC的水平。采用免疫组化法测定肺组织中TARC及IL-4蛋白的表达。结果 1) 哮喘组大鼠血清及BALF中的Eos、IL-4和TARC水平均高于对照组(P<0.05);肺组织中IL-4及TARC的蛋白表达也高于对照组(P<0.05);布地奈德干预后上述各项指标值均低于哮喘组(P<0.05), 布地奈德干预组的各项指标与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。2)哮喘组大鼠肺组织中TARC的蛋白表达与IL-4呈正相关(r=0.50, P<0.05)。结论 哮喘大鼠中TARC含量明显增高, 吸入布地奈德可降低TARC的水平。提示TARC在哮喘的发病中起重要的作用, 下调TARC可能是激素治疗哮喘的一个重要机制。     

羌活提取物抗哮喘的研究

目的研究羌活提取物对小鼠哮喘模型的末梢血液内炎性细胞及肺泡灌洗液(BALF)内IL-4、IL-5、IL-6水平是否有抑制作用,探讨羌活预防和治疗哮喘作用。方法本实验中利用鸡卵清蛋白(OvalbuminOVA)诱导BALB/C小鼠建立小鼠哮喘模型,将羌活提取物分低、中、高剂量组分别在小鼠激发前1小时给予2㎎/ml、10㎎/ml、50㎎/ml羌活提取物雾化吸入20ml时间为25min,处死小鼠后取末梢血通过Diff-quik染色检测嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞的数量,利用酶联免疫吸附法检测BALF中IL-4、IL-5、IL-6水平。结果大,中剂量组与模型组和小剂量组相比,嗜酸性粒细胞显著减少(p<0.01);IL-4、IL-5、IL-6水平显著降低(p<0.05)。结论羌活提取物能有效的预防OVA诱导的小鼠哮喘发作。     

CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠血清 IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液中IL-4、IL-25、IL-33的水平变化影响

目的 研究非甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸 (CpG ODN)联合热休克蛋白70(HSP70)/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠肺部炎症、血清IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-25、IL-33水平变化的影响,为联合 CpG ODN -HSP70/CD80 DNA疫苗治疗哮喘提供实验依据。方法 2019年6-9月选用 6~8周龄BALB/c小鼠32只, 卵清蛋白(OVA)加氢氧化铝[Al(OH)₃]佐剂致敏的方法制备小鼠哮喘模型, 随机分成4组,分别为对照组、哮喘组、HSP70/CD80DNA疫苗组及联合疫苗组(CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗组),HE染色观察肺组织病理形态学改变,ELISA法检测血清IL-4、IL-13、IFN-γ和BALF中IL-4、IL-25、IL-33水平变化。结果 肺组织HE染色结果显示HSP70/CD80疫苗联合CpG ODN治疗组小鼠肺组织炎症反应较哮喘组明显减轻,气道周围炎症细胞浸润显著减少。ELISA结果显示与对照组比较,哮喘组血清IL-4及IL-13水平显著增高(P<0.05),血清IFN-γ水平明显下降(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);支气管肺泡灌洗液(BALF)结果显示与对照组比较,哮喘组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著增高(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著下降(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著降低(P<0.05)。结论 CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗能抑制小鼠体内产生IL-4、IL-13、IL-25、IL-33, 增强小鼠体内产生IFN-γ,减轻哮喘小鼠气道炎症。     

CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠血清 IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液中IL-4、IL-25、IL-33的水平变化影响

目的 研究非甲基化CpG基序的寡聚脱氧核苷酸 (CpG ODN)联合热休克蛋白70(HSP70)/CD80DNA疫苗对哮喘小鼠肺部炎症、血清IL-4、IL-13、IFN-γ及支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-25、IL-33水平变化的影响,为联合 CpG ODN -HSP70/CD80 DNA疫苗治疗哮喘提供实验依据。方法 2019年6-9月选用 6~8周龄BALB/c小鼠32只, 卵清蛋白(OVA)加氢氧化铝[Al(OH)₃]佐剂致敏的方法制备小鼠哮喘模型, 随机分成4组,分别为对照组、哮喘组、HSP70/CD80DNA疫苗组及联合疫苗组(CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗组),HE染色观察肺组织病理形态学改变,ELISA法检测血清IL-4、IL-13、IFN-γ和BALF中IL-4、IL-25、IL-33水平变化。结果 肺组织HE染色结果显示HSP70/CD80疫苗联合CpG ODN治疗组小鼠肺组织炎症反应较哮喘组明显减轻,气道周围炎症细胞浸润显著减少。ELISA结果显示与对照组比较,哮喘组血清IL-4及IL-13水平显著增高(P<0.05),血清IFN-γ水平明显下降(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组血清IL-4及IL-13水平显著降低(P<0.05),血清IFN-γ水平明显升高(P<0.05);支气管肺泡灌洗液(BALF)结果显示与对照组比较,哮喘组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著增高(P<0.05);与哮喘组比较,HSP70/CD80DNA疫苗组和联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著下降(P<0.05);与HSP70/CD80DNA疫苗组比较,联合疫苗组BALF IL-4、IL-25、IL-33水平显著降低(P<0.05)。结论 CpG ODN联合HSP70/CD80DNA疫苗能抑制小鼠体内产生IL-4、IL-13、IL-25、IL-33, 增强小鼠体内产生IFN-γ,减轻哮喘小鼠气道炎症。     

哮喘豚鼠肺泡表面活性物质分泌的实验研究

目的 探讨哮喘豚鼠肺泡表面活性物质分泌的影响,为哮喘的防治提供实验依据.方法 卵蛋白致敏复制哮喘豚鼠模型,用高效液相色谱法测定各组豚鼠支气管肺泡灌洗液(Broncho-alveolar lavage Fluid,BALF)中磷脂成分的含量.结果 哮喘豚鼠肺表面活性物质主要活性成分磷脂酰胆碱(Pc)、磷脂酰乙醇胺(Pe)的含量正常对照组显著降低,中药循经敷贴后能显著升高Pc、Pe的含量,与生理盐水、地塞米松各组比较差异均有统计学意义(P<0.05).结论 中药敷贴对哮喘有治疗作用,明显促进肺表面活性物质的磷脂分泌可能为其作用机制之一.     

肺炎支原体肺炎患儿血清及支气管肺泡灌洗液IL-6、IL-10水平的变化

目的探讨肺炎支原体肺炎患儿血清及支气管肺泡灌洗液白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)的水平变化及临床意义。方法选取该院2015年6月-2016年4月收治的68例肺炎支原体肺炎患儿作为研究组,另选取同期健康体检儿童68例作为健康对照组。比较两组及研究组不同时期患儿血清及支气管肺泡灌洗液IL-6、IL-10分泌情况。结果研究组患儿血清及支气管肺泡灌洗液IL-6、IL-10水平较健康对照组均明显升高,差异具有统计学意义(P0.05);研究组急性期患儿血清及支气管肺泡灌洗液IL-6水平较健康对照组均明显升高,差异具有统计学意义(P0.05);研究组急性期、恢复期患儿血清及支气管肺泡灌洗液IL-10水平较健康对照组均明显升高,差异具有统计学意义(P0.05);研究组恢复期患儿血清及支气管肺泡灌洗液IL-6水平与健康对照组比较差异无统计学意义(P0.05);研究组急性期、恢复期患儿血清与支气管肺泡灌洗液IL-10水平比较差异无统计学意义(P0.05)。结论 IL-6、IL-10在小儿肺炎支原体肺炎的发病过程中起着重要作用,且对小儿肺炎支原体肺炎的诊断具有重要意义。     

格列苯脲和尼可地尔对哮喘大鼠BALF中IL-4/IFN-γ表达及气道重塑的作用

目的：观察钾离子通道开放剂尼可地尔和阻滞剂格列苯脲对哮喘大鼠肺泡盥洗液（BALF）中IL-4/IFN-γ的影响以及对气道重塑的作用。方法：SD雄性大鼠50只,随机分为正常对照组、哮喘模型组、尼可地尔组、地塞米松组和格列苯脲组。采用卵清蛋白（OVA）致敏复制大鼠哮喘模型,模型成功后取相关组织分别进行图像分析测定各组支气管壁各层的厚度、ELISA检测肺泡盥洗液（BALF）中IL-4/IFN-γ表达情况。结果：哮喘模型组和格列苯脲组支气管平滑肌明显增厚（P〈0.05）,有典型的气道重塑表现,尼可地尔组和地塞米松组无明显增厚;尼可地尔组和地塞米松组IL-4表达低于哮喘模型组和格列苯脲组,IFN-γ表达高于哮喘模型组和格列苯脲组（P〈0.05）。结论：尼可地尔通过开放KATP通道,能够明显改善哮喘大鼠气道炎症和抑制哮喘大鼠气道重塑的形成,其可能机制与IL-4表达降低,同时IFN-γ表达升高有关。