萸连巴布剂的镇痛抗炎作用、刺激性及过敏性研究

目的:通过观察萸连巴布剂的镇痛抗炎作用、刺激性及过敏性,对萸连巴布剂的药效学及安全性进行评价,为萸连巴布剂的临床应用提供实验依据。方法:角叉菜胶致炎法致大鼠足肿胀;化学刺激法造小鼠镇痛抗炎模型;分别观察外用萸连巴布剂高、中、低3个剂量(含生药12,6,3 g.kg-1外用涂抹)组对足跖肿胀度、扭体次数及毛细血管通透性的影响。健康家兔分别单次和多次给药,进行完整与破损皮肤的皮肤刺激性试验;健康豚鼠,通过致敏接触和激发接触给药进行皮肤过敏试验。结果:萸连巴布剂中、低剂量组能明显降低大鼠足肿胀度,中剂量组作用时间持续时间较长。高、中剂量组降低毛细血管通透性,高、中、低3个剂量组能减少扭体次数,与赋形剂组比较均有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。单次给药和连续给药,完整皮肤和破损皮肤组均未出现红斑、水肿等刺激反应。豚鼠皮肤未出现过敏反应。结论:萸连巴布剂具有镇痛抗炎和消肿的作用,对家兔完整皮肤、破损皮肤均无刺激性,对豚鼠皮肤不会引起过敏反应。     

雪莲细胞培养物活血化瘀及抗炎作用研究

目的:观察雪莲细胞培养物的活血化瘀及抗子宫内膜异物炎症的作用。方法:以注射肾上腺素加冰浴的方法建立大鼠急性血瘀模型进行血液流变学检测(全血黏度、血浆黏度、血浆纤维蛋白原含量、红细胞压积、血小板聚集率),以子宫引入异物的方法建立大鼠子宫内膜炎症模型,观察致炎子宫肿胀程度并检测炎性介质。结果:连续给药7 d,雪莲细胞培养物低剂量组(35mg/kg)可明显降低急性血瘀模型大鼠的血浆纤维蛋白原含量,与模型组比较差异有统计学意义;雪莲细胞培养物高、中、低剂量组(140、70、35 mg/kg)可明显降低全血黏度10、全血黏度200,与模型组比较差异有统计学意义;雪莲细胞培养物高、中剂量组(140、70 mg/kg)对于大鼠子宫内膜异物的炎症有显著抑制作用,可以明显降低致炎子宫的肿胀率;雪莲细胞培养物高、中、低剂量组(140、70、35 mg/kg)可明显降低致炎大鼠血清中TNF-α含量,与模型组比较差异有统计学意义。结论:雪莲细胞培养物具有一定的活血化瘀作用,对大鼠子宫内膜炎症有一定的抑制作用。     

不同组方艾康片对细菌性和急性血清病肾炎的疗效研究

目的:研究不同组方的艾康片在实验动物肾炎模型中的疗效,以获得更优药物组方。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、阿莫西林组、原方大剂量组、原方小剂量组、缺苦参大剂量组、缺苦参小剂量组,每组10只;膀胱内注射大肠杆菌(E. coli)制备细菌性肾炎模型,治疗后培养膀胱穿刺液;日本大耳白兔随机分为正常组、模型组、雷公藤片组、原方大剂量组、原方小剂量组、缺苦参大剂量组、缺苦参小剂量组,每组6只,注射牛血清白蛋白制备急性血清病肾炎模型,检测循环系统免疫复合物(Circulating immune complexes,CIC)、血肌酐(Creatinine,Cr)和尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)。结果:在感染性细菌性肾炎模型中,与假手术组比较,模型组大鼠的膀胱穿刺液全部有细菌生长,提示造模成功;与模型组比较,阿莫西林组、原方小剂量组、缺苦参小剂量组大肠杆菌培养阳性的大鼠比例均明显下降(P 0.05)。在急性血清病肾炎模型中,与模型组比较,所有给药组的血清CIC含量均明显降低(P 0.05,P 0.01)。结论:艾康片2种组方的较小剂量对于E. coli感染性大鼠模型具有较为显著的疗效;在急性血清病肾炎模型中2种组方在降低CIC方面都显示出了有效性。综合2种疾病模型来看,原方药效更优。     

黄芪注射液对小鼠免疫功能的影响

黄芪注射液腹腔给药,对正常小鼠和氢化泼尼松小鼠胸腺有增重作用,并增加氢化泼尼松小鼠网状内皮系统吞噬功能;增加环磷酰胺小鼠血清溶血素抗体生成能力;增强正常及荷瘤小鼠淋巴细胞转化能力     

不同色泽紫石英镇静催眠抗惊厥作用的研究

目的:考察不同色泽紫石英的镇静催眠抗惊厥作用。方法:以小鼠的急性毒性试验考察不同色泽紫石英23#,25#,29#的急性毒性,以小鼠自主活动、睡眠时间及戊四氮引起的惊厥试验考察不同色泽紫石英20 g.kg-1,连续ig 3 d的镇静催眠抗惊厥作用。结果:不同色泽紫石英对小鼠未见急性毒性反应,不同色泽紫石英小鼠自主活动次数均有所减少,但无显著性差异,不同色泽紫石英都能明显延长戊巴比妥钠阈剂量小鼠的睡眠时间,与戊巴比妥钠具有协同作用,其中23#,25#有显著性差异(P<0.05或P<0.01),不同色泽紫石英对小鼠惊厥发作数没有明显影响,惊厥潜伏时间未有延长。结论:紫石英对小鼠没有明显毒性反应,可减少小鼠自主活动次数、延长戊巴比妥钠小鼠睡眠时间,与戊巴比妥钠具有协同作用,对惊厥发作数和惊厥潜伏时间没有明显影响。紫石英具有一定的镇静安神的作用,不同色泽紫石英在药效方面没有显著性差异。     

萸连巴布膏抗消化性溃疡的药效学研究

目的:以镇痛、抗炎及抗消化性溃疡为药理指标,对萸连巴布膏的药效学进行评价,为萸连巴布膏的临床应用提供实验依据。方法:幽门结扎法建立大鼠胃溃疡模型;角叉菜胶致炎法致大鼠足肿胀;化学刺激法造小鼠镇痛抗炎模型;分别观察外用萸连巴布膏高、中、低3个剂量组(大鼠12,6,3 g.kg-1,小鼠6,3,1.5 g.kg-1)ig对溃疡指数、溃疡抑制率及发生率、足肿胀度、扭体次数及毛细血管通透性的影响。结果:外用萸连巴布膏降低溃疡指数,呈剂量依赖性,仅高、中剂量组升高胃蛋白酶的排出量,降低溃疡发生率。萸连巴布膏高、低剂量组能明显降低大鼠足肿胀度,中剂量组作用时间持续时间较长。高、中剂量组均降低毛细血管通透性,高、中、低剂量组均能减少扭体次数,与赋形剂组比较均有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论:萸连巴布膏具有明显的抑制胃溃疡,镇痛抗炎和消肿的作用,为探索经皮给药治疗胃肠疾病的可行性提供了实验依据。     

理中汤对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响

目的:观察理中汤对Caco-2细胞肽转运载体(PepT1)转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予理中汤处理,并设立空白及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,用Western blot法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:理中汤处理组Caco-2细胞15,30,60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(4.52±0.57),(6.34±0.57),(7.29±0.64),(8.23±0.67)μmol/孔,高于空白对照组(P<0.05),后者分别为(2.42±0.68),(3.15±0.76),(5.62±0.20),(6.54±0.54)μmol/孔;理中汤与Rp-8-Br-cAMP合用组15,30,120 min时点分别为(2.68±0.46),(4.13±0.46),(6.73±0.43)μmol/孔,明显低于相应时点单用理中汤组(P<0.05);理中汤处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值理中汤组为(0.326±0.031),高于空白对照组(0.220±0.019)(P<0.01);理中汤对Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达未见明显作用,但与cAMP抑制剂合用,理中汤能逆转Rp-8-Br-cAMP下调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达的作用。结论:理中汤具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与其促进胞浆中PepT1蛋白嵌入胞膜中发挥转运二肽的功能有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。     

6-姜酚对Caco-2细胞PepT1转运功能的影响

目的:观察6-姜酚对Caco-2细胞肽转运载体PepT1转运二肽的能力及其蛋白、mRNA表达的影响。方法:Caco-2细胞融合后连续培养28 d后给予6-姜酚处理,并设立正常对照组及cAMP抑制剂对照组,用放射性同位素示踪技术比较Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的能力,采用Western blot方法测定Caco-2细胞膜上PepT1蛋白的表达,荧光定量PCR方法测定PepT1 mRNA(SLC15A1)的表达水平。结果:6-姜酚处理组Caco-2细胞60,120 min时点Glycyl-Sarcosine吸收转运累计量分别为(6.84±0.46),(8.61±0.54)μmol/孔,高于正常对照组(P<0.05),后者分别为(5.62±0.20)、(6.54±0.54)μmol/孔;6-姜酚与Rp-8-Br-cAMP合用组120 min时点为(6.92±0.67)μmol/孔,明显低于相应时点单用6-姜酚组(P<0.05);6-姜酚处理后Caco-2细胞膜PepT1蛋白表达增加,PepT1表达与内参GAPDH表达灰度比值6-姜酚组为(0.317±0.022),高于空白对照组(0.220±0.019)(P<0.01);荧光定量PCR结果,6-姜酚能上调Caco-2细胞SLC15A1 mRNA表达,但与cAMP抑制剂合用后该抑制作用被阻断。结论:6-姜酚具有促进正常培养Caco-2细胞转运二肽化合物Glycyl-Sarcosine的作用,该作用可能与上调PepT1蛋白及mRNA表达有关,该过程调控与胞内第二信使cAMP有一定的关系。     

戊己丸不同配伍对小檗碱、巴马汀吸收的影响

目的:应用大鼠原位循环肠肝灌流模型,考察戊己丸不同配伍对戊己丸中黄连代表成分小檗碱、巴马汀的吸收的影响。方法:采用L9(34)正交设计得到戊己丸12个配伍方(3个单味药和9个配伍方),经十二指肠给药,于不同时间(0,1,5,10,15,30,60,90,120 min)采集灌流液,LC-MS检测小檗碱、巴马汀的含量,计算其吸收分数,吸收速率常数(Ka)。结果:吴茱萸与小檗碱、巴马汀的吸收分数,吸收速率常数(Ka)之间呈负相关,并得到了促进小檗碱、巴马汀吸收的最优配伍比例黄连-吴茱萸-白芍3∶1∶3。结论:吴茱萸抑制黄连代表成分的吸收,而且黄连、吴茱萸、白芍配伍比例不同,小檗碱、巴马汀的吸收量、吸收速度也有较大差异。     

金铃子散不同配比方对大鼠肝药酶CYP1A2活性的影响

目的:通过比较金铃子散不同配比方对大鼠肝药酶CYP1A2活性的影响,探讨其配伍规律。方法:按L9(34)正交表,设计9个不同配比组方。体外实验采用大鼠肝药酶孵育体系,测定不同配比方对CYP1A2的半数抑制浓度(IC50);体内实验采用大鼠口服金铃子散不同配比方5 d后注射探针药物非那西丁,通过微透析探针采集肝脏部位样品,HPLC测定非那西丁及其代谢物对乙酰氨基酚浓度,winNonlin软件统计拟合药代参数。结果:川楝子、延胡索单味提取物和配比方1～9对肝药酶CYP1A2的IC50分别为(0.025 2±0.005 2),(0.012 1±0.007 9),(0.091 9±0.015 0),(0.071 9±0.005 3),(0.028 2±0.004 5),(0.075 4±0.015 5),(0.062 8±0.003 3),(0.091 9±0.015 0),(0.197 6±0.027 3),(0.159 1±0.008 1),(0.131 1±0.008 5)g.L-1,无显著抑制酶CYP1A2活性。体内实验,药代参数显示金铃子散不同配比方均能诱导CYP1A2活性,影响酶活性强弱顺序是:诱导剂组(方3)>方4(方5)>方9(方6,方1,方2,方8,川楝子,延胡索组)>方7>正常对照组。结论:金铃子散不同配比方对肝药酶CYP1A2活性有诱导作用,且诱导作用的强弱与配比有一定的相关性。