染料木素对体外培养胎鼠海马神经元细胞活力及其形态的影响

目的:观察染料木素(Genistein,Gen)对正常胎鼠海马神经元细胞培养条件下的活力及其形态影响。方法:取16～18d孕龄SD胎鼠海马组织进行原代培养海马神经元。采用MTT比色法检测0.01μg/ml、0.02μg/ml、0.04μg/ml、0.08μg/ml、0.16μg/ml、0.32μg/ml、0.64μg/ml、1.28μg/ml、2.56μg/ml、5.12μg/mlGen组及空白组对海马神经元分别作用24h、48h、72h的细胞活力及其形态变化。结果:1Gen对海马神经元细胞活力的最佳剂量为0.32μg/ml;Gen在0.01μg/ml、0.02μg/ml、0.04μg/ml、0.08μg/ml、0.16μg/ml、0.32μg/ml呈剂量依赖性增强;而0.64μg/ml、1.28μg/ml、2.56μg/ml、5.12μg/mlGen各组的细胞活性呈剂量依赖性下降。2Gen各剂量度组对海马神经元细胞的最明显促进生长时间是24h;Gen作用48h和72h时细胞活力则呈下降趋势。30.32μg/mlGen干预24h海马神经元细胞的形态最佳;0.01μg/ml、0.02μg/ml、0.04μg/ml、0.08μg/ml、0.16μg/ml、0.32μg/mlGen各组随剂量的增加对海马神经元细胞的生长促进作用明显增强,细胞形态呈轴突树突明显连接成网,胞体折光性好,细胞碎片少;大于0.32μg/mlGen剂量的效应结果则反之,随剂量增大其作用明显呈副效应变化,其细胞形态的轴突树突网状结构不明显,胞体折光性差,且呈崩解趋势,细胞碎片明显增。结论:Gen对体外培养胎鼠海马神经元细胞生长活力作用的最佳剂量为0.32μg/ml,最佳效应时间是24h。     

高效液相色谱法测定风痛定胶囊中盐酸小檗碱的含量

目的建立风痛定胶囊中盐酸小檗碱的含量测定方法。方法用高效液相色谱法对制剂中盐酸小檗碱进行定量分析,色谱柱:Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-1 g·L-1磷酸(每100 mL加十二烷基磺酸钠0.02 g)(43∶57);流速:1.0mL·min-1;检测波长:265 nm。结果盐酸小檗碱在质量浓度0.020 4~0.102 mg·mL-1范围内线性关系良好,r=0.999 9;平均加样回收率为99.6%,RSD为0.4%。结论该方法准确、专属性强、重复性好,可有效控制风痛定胶囊中盐酸小檗碱的含量。     

固相萃取小柱净化-气相色谱法测定蛴螬的有机氯农药残留

目的建立测定蛴螬中9种有机氯类农药残留量的方法。方法采用超声提取,固相萃取小柱净化,气相色谱法进行测定。结果所测定农药的回收率为84.0%～107.4%,样品中六六六的4种异构体、滴滴涕的4种异构体和五氯硝基苯的含量均符合国家的相关规定。结论该方法操作简便,灵敏,适用于蛴螬有机氯类农药的检测。     

龙眼的化学成分及药理作用研究进展

目的对龙眼的各部分化学成分和药理作用进行综述,为龙眼的进一步开发利用和临床用药提供参考。方法查阅大量国内外相关文献,进行总结分析。结果龙眼是具有补血安神、健脑益智、补养心脾功效的药食两用的滋补佳品,近年来对其假种皮(果肉)、果皮(壳)、种子(核)、花、叶等不同部分所含化学成分和药理作用已有部分研究。结论龙眼作为中国南方的主要经济作物,其药用价值也很高,但目前对其研究还不够多,需进一步全面深入研究。     

Aβ_(25-35)诱导大鼠胚胎海马神经元凋亡的形态学影响

目的:观察染料木素(Genistein ,Gen)对Aβ-amyloid peptide fragment 25-35(Aβ25-35)诱导胎鼠海马神经元细胞损伤前后形态学指标的变化.方法:取16～18 d孕龄胎鼠海马组织进行神经元细胞的原代培养,细胞培养72 h后进行实验.Gen浓度为0.32 mg/L,用0.01 μmot/L 17β-雌二醇为阳性对照组,细胞损伤模型采用2 5 mg/L Aβ25-35建立.实验分6组,即Gen组、Gen模型组、雌二醇组、雌二醇模型组、空白组和空白模型组.海马神经元培养完毕,将Gen、17β-雌二醇比AB25-35提前4 h加入培养液,继续孵育24 h后观察海马神经元细胞形态学:活细胞形态、细胞核Hoechst33342和PI双染色以及神经元NSE和Tunel双染色等指标的变化水平.结果:①空白模型组海马神经元细胞树突轴突基本消失,未见网状结构,细胞胞体没有折光性,细胞碎片很多;和空白模型组相比较,Gen模型组细胞可见明显树突轴突,并可连接成网状结构,细胞胞体部分可见折光性,细胞碎片明显减少.Gen模型组和雌二醇模型组细胞形态差异不大.②空白模型组可见大量坏死细胞核(红色),仅有少量正常细胞;和空白模型组相比较,Gen模型组坏死细胞核的数量明显减少,而正常细胞核的数量明显增加.Gen模型组和雌二醇模型组差异不大.③空白模型组可见大量坏死细胞核着色(Tunel黄绿色),而胞体染色(NSE红色)不可见;和空白模型组相比较,Gen模型组坏死细胞核的数量明显减少,而正常细胞的数量明显增加,且胞体可连接呈网状结构.Gen模型组和雌二醇模型组细胞形态差异不大.结论:①Gen模型组较空白模型组能明显改善AB25-35诱导损伤后海马神经元细胞形态学各指标,且和雌二醇模型组比较差异不大;②Gen对Aβ25-35诱导的海马神经元起保护因子或抗凋亡因子的作用,Gen有一定的神经保护作用;③Gen对Aβ25-35诱导海马神经元的神经保护作用机制可能与海马部位存在一定的雌激素受体从而引起雌激素水平变化有关.     

纳洛酮治疗小鼠柯萨奇病毒诱发病毒性心肌炎的实验研究

目的:研究纳洛酮治疗病毒性心肌炎(viral myocarditis,VMC)小鼠的作用机制.方法:120只BALB/c 小鼠以柯萨奇病毒(coxsackievirus B3,CVB_3)诱导制作VMC模型,在隔离实验室饲养.分别在接种病毒后72 h各组给药至21 d,CVB_3组i.p.2500 mg/kg生理盐水(n=60);纳络酮组i.p.2 mg/kg(n=60);另取40只BALB/c,小鼠作为对照组,同法接种100μL不含病毒的Eagle液,72 h后i.p.给予2500 mg/kg生理盐水.在病毒感染第5、7、14、21、28天,各组随机取8只小鼠,处死,留取心肌组织.观察小鼠死亡率与心肌组织病理改变,并采用RT-PCR和Western blot技术检测CVB_3感染后各时间点小鼠心肌组织中K-阿片受体(K-opioid receptor,kOR)mRNA和蛋白质的表达水平.结果:CVB_3感染后第5、7、14、21天,CVB_3组KOR mRNA表达量显著高于对照组(P<0.01);kOR蛋白质的表达量在CVB_3感染后第7、14、21天明显高于对照组(P<0.05).CVB_3感染后第7、14、21天纳洛酮组小鼠死亡率和病理组织改变低于CVB_3组,kCOR mRNA和蛋白质的表达量低于CVB_3组(P<0.05).结论:CVB_3诱导性VMC小鼠心肌细胞的KOR基因和蛋白质水平明显上调,纳洛酮对VMC小鼠保护作用与抑制KOR基因和蛋白质水平有关.     

桂皮醛治疗CVB3诱发的小鼠病毒性心肌炎研究

目的 探讨桂皮醛（CA）对柯萨奇病毒B3（CVB3）诱发的小鼠病毒性心肌炎（VMC）作用及其机制。方法 除正常对照组外,其他小鼠经腹腔注射CVB3m0.1 mL建立病毒性心肌炎BALB/c小鼠模型。于接种病毒72 h后,CA不同剂量治疗组分别灌胃给予CA22.5,28.1,37.5 mg&#8226;kg^-1,RA组腹腔注射黄芪注射液50 mg&#8226;kg^-1,模型组与正常对照组灌胃给予0.9%氯化钠溶液2 500 mg&#8226;kg^-1,连续给药21 d。观察接种病毒后第7天心肌组织病理学变化,测定血清乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK MB）含量;测定接种病毒后第14天血清一氧化氮（NO）含量,第14天心肌诱导型一氧化氮合酶（iNOS）以及核因子κB（NF κB）表达,行心肌组织光镜病理检查与评分;第21天行心肌组织光镜病理检查。计算小鼠累积死亡率和中位生存时间。结果与模型组比较, CA28.1,37.5 mg&#8226;kg^-1治疗组小鼠死亡率显著降低（均P＜0.01）,中位生存时间延长,感染第7天心肌病毒滴度降低,血清CK、CK MB、LDH释放减少（均P＜0.05）。血清NO含量明显降低（P＜0.01）,感染第14天心肌iNOS、NF κB表达（P＜0.05）与病理评分均明显改善。结论CA有治疗CVB3m诱发的小鼠病毒性心肌炎作用,其作用机制可能与抑制NF κB与iNOS表达相关。     

Toll-NF-κB信号转导通路与病毒性心肌炎研究现状

Toll样受体是天然免疫系统识别病原微生物的主要受体,在天然免疫反应中具有重要的作用.研究发现TollNF-κB信号转导通路能够引起一系列细胞因子合成增加,而这些细胞因子在病毒性心肌炎(viral myocarditis;VMC)的发病过程中发挥重要作用.探讨VMC时Toll-NF-κB信号转导通路的作用,对于揭示VMC的发病机制和筛选有效治疗药物具有重要意义.     

安迪粉针剂抗肿瘤作用的实验研究

目的　探讨安迪粉针剂 (简称安迪 )对小鼠移植性肿瘤的抑制作用 ,以及对其免疫功能的影响。方法　采用小鼠移植性肿瘤即艾氏腹水癌 (ECA)、肉瘤180 (S180 )、肝癌 (HCA)、Lewis肺癌模型 ,以 5 - FU为阳性对照组 ,观察 2 5 ,1 2 ,6 mg·kg-1安迪的抗肿瘤作用 ,并采用小鼠溶血素实验和小鼠迟发性变态反应实验观察安迪对荷瘤小鼠免疫功能的影响。结果　不同浓度安迪对体外 ECA肿瘤细胞的蓝染率分别为 1 0 0 % ,96 % ,89% ,6 5 %和 49% (P <0 .0 1 ) ;安迪对 S180 、HCA和 Lewis移植瘤的抑制率分别达 42 .1 %～ 5 4 .8% ,3 8.2 %～ 5 3 .5 %和42 .1 %～ 5 5 .3 % (P <0 .0 1 ) ;对小鼠腹水型 HCA的生命延长率为 1 1 0 .4%～ 1 3 6 .1 % (P <0 .0 1 ) ;与阳性对照组比较 ,安迪对荷瘤小鼠免疫功能无抑制作用。结论　安迪具有较强的抗肿瘤作用 ,且对荷瘤小鼠免疫功能无影响