单克隆抗体在医学病毒学中的应用与某些研究进展

自1975年K(?)hler和Milstein建立杂交瘤技术以来,单克隆抗体(McAb)的研究和应用已遍及生物学、医学、兽医学、农学等学科的各个领域,并取得了巨大的经济效益和明显的社会效益。本文主要谈谈McAb在病毒学中的应用与某些研究进展。     

流行性出血热病毒分子生物学研究及应用

本项目属于生物科学技术领域“863-102-10-03流行性出血热病毒基因工程疫苗研究”中的基础研究部分,从分子水平上阐述病毒结构和功能的关系,不仅对于发展基因工程疫苗所必需,而且对于了解病毒本质,继而对整个出血热的研究将会起到推动作用。本研究主要包括如下内容及特点:(1)流行性出血热病毒基因克隆及分析:病毒培养、纯化及RNA     

流行性出血热原代细胞多价纯化疫苗的研究

本研究的技术关键是优良生产毒种的选育和纯化工艺的建立以及纯化疫苗检定项目和质量标准的确定。通过反复的实验研究选育出与我国已商业化生产和销售的三种单价疫苗相匹配的三株毒种Z37,PS6和84Fli。这三株毒种毒力强,抗原性广谱,免疫原性     

最近亚洲禽流感暴发(至2005年7月)

背景：高致病性禽流感A（H5N1）病毒感染于2003年末至2004年初在亚洲8个国家（柬埔寨、中国、印尼、日本、老挝、韩国、泰国和越南）家禽中发生,上亿鸡（Birds）死亡或被宰杀.从2003年12月至2004年3月17日,在泰国确诊有12例人禽流感病例,在越南有23例,共有23人死亡.然而及至2月末,在泰国和越南新的H5病例减缓而后停止,一个月内,报告在家禽中有禽流感暴发的国家仍在继续,没有发现人到人传播的结论性证据.     

检测β3-整合素基因在汉坦病毒敏感细胞中的表达

目的 克隆表达β3-整合素基因，制备抗体，并用之进行β3-整合素表达阴性Vero细胞的分离和富集，方法 采用RT-PCR扩增克隆β3-整合素基因，亚克隆至pQE30表达质粒，在原核细胞中表达，免疫印迹实验确证其表达及免疫反应性，纯化蛋白免疫接种家兔制备抗体，补体倡导 的抗体依赖性的细胞毒实验分离富集目的细胞，免疫荧光及免疫印迹检测筛选结果，结果成功克隆β3-整合素基因，并在pQE30表达系统中得到高效表达，免疫印迹证实所表达的β3-整合素蛋白具有良好的免疫反应性，制备了高效抗体，免疫荧光及免疫印迹均未检测出β3-整合素在Vero,VeroE6,Hep-2,2BS和293等汉坦病毒敏感细胞表面的表达。结论 除β3-整合素外，汉坦病毒很可能还有别的受体。     

流行性出血热病原学研究——Ⅰ、用非疫区黑线姬鼠分离病毒及其特异性检查

在用非疫区黑线姬鼠分离EHF病毒的传代中,发现感染鼠鼠肺中存在一种可传代的EHF相关因子。用间接免疫荧光法对其特异性作了检查:101份EHF患者血清96％阳性,175份正常人及其他疾病患者血清全部阴性;20例EHF患者双份血清,18例的恢复期有4倍以上抗体滴度升高;12例EHF患者血清对KHF抗原及EHF相关因子的阴、阳性反应基本一致;抗呼肠孤病毒血清和抗类呼肠孤病毒血清等全部阴性;血清编码双盲法检查和预期结果一致;抗KHF血清对EHF患者血清的免疫荧光反应有显著阻断作用,抗呼肠孤病毒Ⅰ～Ⅲ型多价血清无此作用。上述结果可初步确定,此相关因子是流行性出血热病毒。     

新疆出血热病毒分子特征研究及诊断方法建立

新疆出血热（XHF,国际上称克里米亚刚果出血热,简称CCHF）1965年在我国新疆首次流行,该病症状严重且病死率高,每年在新疆发生区域性流行,成为当地严重的公共卫生问题,为我国已经发现的4种虫媒病毒病之一。我国1966年即开始XHF病原学研究,分离到多株病毒,但一直未开展病毒分子生物学研究以及我国分离株与国外同科病毒间分子差异及遗传关系的研究,也缺少该病的诊断方法。     

流行性出血热单克隆抗体的研究

实验用流行性出血热病毒免疫的BALB/C鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,成功地获得了三株杂交瘤细胞株(25号、32号、19号),能分泌高滴度高特异性的流行性出血热单克隆抗体。以此种细胞株制备的小白鼠腹水单克隆抗体的滴     

从罗赛鼠及社鼠中分离出流行性出血热病毒及其抗原性鉴定

本文报告从流行性出血热疫区江西省宜丰县野外捕捉的罗赛鼠和社鼠中分离出两株流行性出血热(EHF)病毒。鼠肺标本冰冻切片,用 EHF 单克隆抗体免疫荧光染色反应阳性;接种 Vero—E6细胞,经 IFA、ELISA 及电镜检查,证实为 EHF 病毒;用十种 EHF 单克隆抗体对其抗原性进行了比较研究,结果表明新分离出的两株病毒其抗原性与家鼠型 EHF 代表株 R_(22)比较接近。