MiRNA-142-5p在大鼠角膜新生血管中的作用及机制研究

目的 观察microRNA-142-5p(miRNA-142-5p)对大鼠角膜新生血管(corneal neovascularization,CorNV)的作用及其与VEGF/PI3 K/AKT通路的关联情况.方法 角膜缝线法诱导SD大鼠右眼CorNV作为实验组,左眼作为对照组.取缝线后第7天的角膜进行实时荧光定量聚合酶反应(Real-time PCR,RT-PCR)检测miRNA-142-5p以及VEGF mRNA的表达水平.将miRNA-142-5pmimic转染人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs),RT-PCR检测miRNA-142-5p的表达量来验证转染是否成功.并通过RT-PCR和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测HUVECs中VEGF及PI3 K/AKT mRNA和蛋白的表达量.分别用Transwell、CCK-8法及Matrigel胶管腔形成实验检测HUVECs的迁徙、增殖及管腔形成能力.结果 成功建立CorNV模型.RT-PCR结果显示7d组miRNA-142-5p(6.799±1.683)和VEGF(3.297±0.334)的表达量较正常角膜组(normal)显著升高(P＜0.01).转染miRNA-142-5p mimic后的miRNA-142-5p的表达量显著高于空白对照及阴性对照组(P＜0.01).Transwell、CCK-8及Matrigel胶管腔形成实验结果示miRNA-142-5p提高了HUVECs的迁徙、增殖及管腔形成能力(P＜0.01).转染miRNA-142-5p mimic后HUVECs中VEGF及PI3 K/AKT的mRNA及相应蛋白的表达均明显上升(P＜0.05).结论 CorNV中miRNA-142-5p及VEGF的表达明显上调,过表达miRNA-142-5p可以显著提高HUVECs中VEGF及PI3 K/AKT通路各主要成员mRNA和蛋白的表达水平,进而促进HUVECs的迁徙、增殖及管腔形成能力.表明miRNA-142-5p可通过PI3K/AKT通路参与CorNV的调控.     

经鼻盲探气管内插管常见困难及处理

自1930年Magill发明经鼻盲探气管插管（Blind nasotracheal intubtaion,BNTI）以来,由于BNTI技术对设备依赖性小,现已在临床广泛应用,特别是在经济欠发达地区医院,BNTI是处理张口受限患者、颈短、颈椎损伤等患者气管插管的重要手段。由于系盲探操作,临床应用中常发生插管困难或失败,现将作者遇见的困难及解决办法,     

小主动脉瓣环患者生物瓣与机械瓣置换术后心功能变化的比较

目的分析比较小主动脉瓣环(直径≤21mm)患者人工生物瓣置换与人工机械瓣置换术后心功能的变化,探讨人工生物瓣置换术后是否存在植入瓣膜与患者不匹配(PPM)现象。方法40例主动脉瓣环直径≤21mm的患者,其中20例置换人工生物瓣(生物瓣组),20例置换人工机械瓣(机械瓣组)。采用彩色多普勒超声心动图于术前和术后6个月～1年期间,检测两组患者的左心室射血分数(LVEF)、左心室短轴缩短率(LVFS)、左心室重量指数、瓣膜有效开口面积/体表面积的比值(EOAI)和主动脉瓣跨瓣压差的变化,并进行对比分析。结果术后6个月～1年,两组患者LVEF、LVFS和EOAI均较术前明显升高,左心室重量指数和主动脉瓣跨瓣压差均较术前明显减小或降低。所有患者术后EOAI为0.88～1.32cm2/m2,术后6个月～1年生物瓣组与机械瓣组比较:LVEF79%±8%vs.81%±10%;LVFS43%±9%vs.37%±8%;EOAI1.11±0.14vs.0.92±0.11;左心室重量指数89.10±16.70g/m2vs.95.30±15.10g/m2;主动脉瓣跨瓣压差18.80±12.60mmHgvs.22.30±12.00mmHg,差异无统计学意义(P>0.05)。结论小主动脉瓣环患者(直径≤21mm)置换人工生物瓣术后左心功能指标明显改善,无PPM现象。     

成都市医院营销状况调查与分析

1调查背景由于“入世”后医疗领域的开放,加上我国社会主义市场经济体制的建立和医疗卫生体制改革的不断深入,使我国医院的生存发展环境发生巨大变化。面对广大人民群众日益增长的医疗服务需求,医院的建设和发展除了应遵循医疗卫生事业发展     

基于指纹图谱、网络药理学和定量分析的南五味子治疗药源性肝损伤的质量标志物研究

根据中药质量标志物(Q-marker)的理念,采用超高效液相色谱法(UPLC)建立指纹图谱和多指标定量的方法,结合网络药理学研究,筛选南五味子保肝功效的潜在质量标志物。采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》软件对15批不同产地的南五味子指纹图谱进行相似度分析,相似度在0.981～0.998。确定了18个共有成分,由聚类分析和主成分分析确定了3个差异性成分;构建“成分-靶点-通路”网络图,预测南五味子保肝的核心成分,筛选出14个与南五味子治疗药源性肝损伤(drug-induced liver injury, DILI)作用相关的核心成分,通过作用于AKT1、CCND1、CYP1A1、CYP3A4、MAPK1、MAPK3、NOS2、NQO1、PTGS2等靶点,调控脂质和动脉粥样硬化、乙型肝炎、白细胞介素-17、肿瘤坏死因子等信号通路发挥保肝作用。结合成分的可测性、特有性、有效性,预测五味子酯甲、安五脂素和五味子甲素是南五味子治疗DILI的质量标志物。15批样品中五味子酯甲、安五脂素和五味子甲素的质量分数分别为0.20%～0.57%、0.13%～0.33%、0.42%～0.70%。综上,该研...     

姜黄素通过抑制PI3K/Akt信号通路改善LPS诱导的视网膜炎症

目的:本研究旨在调查姜黄素是否能减轻动物模型和人视网膜色素上皮细胞(ARPE)-19细胞的视网膜炎症。方法:在体内,雄性C57/B6小鼠腹腔注射姜黄素3d,然后腹腔注射脂多糖(LPS;10mg/kg)诱导视网膜炎症。LPS作用24h后,通过RT-PCR检测促炎细胞因子的mRNA水平。伴刀豆球蛋白凝集素灌注标记技术评估了白细胞对视网膜脉管系统的粘附。用蛋白质定量试剂盒测量前房中的蛋白浓度。在体外,培养ARPE-19细胞。用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法测量来选择姜黄素的最佳作用浓度。在用5μg/mL LPS刺激之前,将ARPE-19细胞在有或没有姜黄素的情况下孵育1h。通过RT-PCR和ELISA测量促炎细胞因子。通过蛋白质印迹分析PI3K/Akt表达。结果:姜黄素预处理可显著抑制EIU相关白细胞粘附于视网膜血管和前房蛋白渗漏。体内应用姜黄素后,炎症细胞因子(如IL-1β,IL-6和TNF-α)的mRNA表达水平也显著降低。同时,姜黄素在ARPE-19细胞的mRNA和蛋白质水平上均显著减弱IL-6,IL-8和MCP-1的表达。姜黄素抑制LPS激活的ARPE-19细胞中的PI3K/Akt磷酸化以及NF-κB激活。结论:姜黄素对LPS诱导的视网膜炎症具有预防作用,其作用似乎与PI3k/Akt信号传导途径的抑制有关。     

nm23和TGFβ_1在人体非小细胞肺癌中的表达及其临床病理关系的探讨

目的　探讨转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因在人非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达水平及其临床病理关系。方法　应用免疫组化方法对 83例人非小细胞肺癌组织中转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因表达蛋白水平进行了研究。结果　nm2 3和TGFβ1表达水平与肺癌的TNM分期、细胞分化程度及肺癌的转移有密切关系 (P <0 .0 5 )。结论　nm2 3、TGFβ1基因表达水平同时降低 ,预示肺癌的转移和预后不良。     

黄芩不同生长发育期的指纹图谱研究

 目的建立黄芩RP-HPLC指纹图谱,考察黄芩不同生长发育期的主要化学成分的变化。方法色谱柱为Diamonsil C₁₈(4.6mm×250mm,5μm),以乙腈-水-甲酸(21∶78∶1,A)和乙腈-水-甲酸(80∶20∶1,B)为流动相进行梯度洗脱;检测波长280nm;柱温30℃;流速1.0mL·min^-1。对黄芩指纹图谱进行分析,并比较了10个化学成分含量在不同生长发育期的变化趋势。结果黄芩中主要化学成分在不同生长发育期的积累具有一定规律。苷类和苷元类成分含量在生长过程中虽发生了不同的变化,但最终二者含量均在枯黄期恢复到接近休眠期时的含量水平。结论揭示黄芩中主要化学成分在不同生长发育期的变化趋势。     

金荞麦饮片液相色谱含量测定及指纹图谱研究

目的：研究金荞麦饮片高效液相色谱指纹图谱及含量测定方法。方法：采用高效液相色谱-电化学检测法,Diamonsil C₁₈(4.6 mm×250 mm,5 μm)色谱柱；流动相为甲醇-0.1 mol·L^-1磷酸盐缓冲液(pH 2.5)；流速1.0 mL·min^-1；柱温35 ℃；参比电极为ISAAC(in-situ Ag/AgCl)；工作电极为玻碳电极；辅助电极为铂电极。结果：建立了金荞麦饮片高效液相色谱图谱,发现了6个色谱峰为共有峰,其中4个分别为没食子酸,原儿茶酸,原儿茶醛和表儿茶素的色谱峰。原儿茶酸的质量分数为0.004%～0.05%,原儿茶醛的质量分数为0.003%～0.015%。结论：该方法可用于金荞麦饮片质量控制。