RPL15在K562细胞向红系分化过程中的功能和机制研究

目的　研究RPL15基因在K562细胞向红系诱导分化过程中的表达变化,并确定其对珠蛋白表达及红系分化的影响。方法　用氯化血红素诱导K562细胞向红系分化,采用实时荧光定量PCR（qPCR）及Western blot法检测RPL15在K562红系分化过程中的表达情况。利用RNA干扰（RNAi）技术抑制K562细胞中RPL15的表达,进而通过四甲基联苯胺染色、qPCR及流式细胞技术检测K562细胞中血红蛋白、红系分化相关基因以及CD235a和CD71表达的变化。结果　在K562细胞向红系分化过程中,RPL15的mRNA及蛋白水平均呈先升高后下降趋势。与对照组相比,干扰RPL15表达后,向红系分化24、48和72 h的K562细胞血红蛋白染色阳性率均明显下降;向红系分化的K562细胞中α-、β-、ε-、γ-珠蛋白及红系分化相关基因GATA1和HSP70相对表达量均明显下调（均P＜0.05）;而抑癌基因P53的mRNA表达水平显著上调（P＜0.01）。同时CD235a+CD71+ K562细胞比例在RPL15干扰后显著降低（P＜0.01）。结论　抑制RPL15表达可抑制K562细胞向红系分化,提示RPL15正调控红系分化过程。同时P53相关通路、GATA1及HSP70可能参与了RPL15对红系分化的调控过程。     

雄黄砷的蓄积性研究

目的 研究大鼠长期给予雄黄后砷在血液、肝脏、肾脏和脑组织中的蓄积性,以探讨雄黄的毒性机制,为临床安全用药提供科学依据.方法 ①将禁食16 h后的雄性SD大鼠随机分为对照组(4只)和雄黄0.16g·kg-1组(28只).雄黄组灌胃给药1次,于给药后0.5,1,2,4,8,16,36 h时间点各取4只大鼠,取全血、心脏、肝脏、肾脏、肺和脑组织,测定砷含量.②将SD大鼠随机分为对照组和雄黄0.16,0.08,0.02g·kg-1剂量组,每组10只(雌雄各5只).各剂量组每日灌胃给药1次,共给药3个月.于末次给药后16 h取血、肝、肾、脑,测定砷含量.结果 单次给予雄黄0.16 g· kg-1后,一定量的砷能吸收进入体内,分布于血液和心、肝、肺、肾、脑等主要脏器,达峰时砷含量从高至低依次为血液＞肾＞肺＞肝＞心＞脑.血液中砷水平远高于其他脏器中砷水平,这一分布特点可能为雄黄治疗白血病的基础.雄黄反复给药3个月后,血液、肝脏、肾脏和脑组织均有一定程度的砷蓄积.在相同的雄黄剂量组,肾脏的砷蓄积倍数最高,其次是肝脏.然而在砷含量方面,血液中的砷含量远高于其他脏器的砷含量,砷含量由高至低的顺序为血液＞肾脏＞肝脏＞脑.雄黄长期用药时可造成肝、肾组织轻度病理变化,可能与肝、肾组织的砷蓄积相关.但未见血液与肝肾毒性相关的生化指标变化,说明肝脏与肾脏毒性较轻.结论 雄黄的可溶性砷可吸收入体内,广泛分布于主要脏器中.长期用药后,砷可在血液、肾脏、肝脏、脑组织蓄积,其中肾脏、肝脏砷蓄积与肝、肾毒性有关.血液是砷分布水平最高的部位,可能是雄黄治疗白血病的基础.     

高效液相色谱-电化学检测法测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量

目的:建立可测定金荞麦饮片中表儿茶素含量的高效液相色谱-电化学检测法。方法:采用DiamonsilC₁₈(4.6 mm×250 mm,5μm)柱,流动相甲醇-0.1 mol.L^-1磷酸盐缓冲液(1∶3,pH 2.5),流速1.0 mL.min^-1,柱温35℃,参比电极ISAAC(in-situ silver/silver chloride),工作电极玻碳电极,检测电位+600 mV。结果:表儿茶素的线性范围为0.004 875～1.56μg,r=0.999 9;平均回收率为100.7%,RSD 1.9%(n=5)。9批不同市售来源的金荞麦饮片中表儿茶素的含量存在差异。结论:该方法重复性好,可以用来测定金荞麦饮片中表儿茶素的含量。     

高效液相色谱法测定山楂中枸橼酸的含量

 目的建立山楂中枸橼酸的高效液相含量测定方法。方法 高效液相色谱法,Zorbax-sb C₁₈柱,磷酸二氢铵-磷酸缓冲液为流动相,流速1.0 mL·min^-1;检测波长为210nm;柱温25℃。结果枸橼酸回归方程Y=3510.8+56992.3X,r=0.999 9,线性范围0.79～15.96μg。生山楂中枸橼酸平均回收率为103.4％,RSD=0.9％;焦山楂中枸橼酸平均回收率为98.8％,RSD=2.8％(n=5)。结论该方法简便易行,可用于山楂饮片中枸橼酸的含量测定。     

中国民营医院发展现状与趋势研究

采用文献分析法对我国民营医院的发展现状和趋势进行分析,结果认为我国民营医院发展速度较快,但规模偏小、医疗市场份额低,整体水平还远不具备与公立医院分庭抗衡的实力;在发展和政策支持上民营医院地区间发展不平衡,东部优于中西部;民营医院的发展面临空前大好的政策环境,以公有制医疗机构为主体,多种所有制形式与经营方式并存,公平竞争、共同发展的医疗服务体系新格局开始逐步形成.     

角巩膜穿孔伤一期手术技巧探讨

目的　探讨角巩膜穿孔伤一期急诊手术在视功能重建过程中的重要作用。方法　对168眼角巩膜穿孔伤进行回顾性分析,单纯角巩膜修补术3 6眼,角巩膜修补 虹膜复位术93眼,巩膜修补 热凝 硅胶外加压术2眼,角巩膜修补 白内障摘出2 4眼。角膜修补 白内障摘出 人工晶状体植入术13眼。结果　全部病例伤口均甲级愈合。术前视力无光感6眼,光感～0 . 0 4者84眼,0. 0 5～0 .2 5者71眼,0 . 3～1. 0者7眼。术后视力无光感4眼,光感～0. 0 4者3 9眼,0. 0 5～0. 2 5者92眼,≥0 . 3者3 3眼。脱盲率5 2 . 2 2 %。脱残率3 6. 62 %。结论　角巩膜穿孔伤一期手术水平决定了伤眼治疗结果,应把角巩膜伤口的缝合视为屈光手术。     

PEG 6000处理对黄芩种子萌发和幼苗生长的影响

目的 以PEG 6000溶液模拟干旱胁迫条件,研究黄芩种子的萌发和幼苗生长对干旱胁迫的响应.方法 分别用10%和20%PEG 6000处理黄芩种子,对种子的含水量、萌发率、萌发势、萌发指数、幼苗鲜质量及各器官的长度进行测量.结果 PEG 6000处理对黄芩种子的含水量、萌发率和幼苗的生长均产生影响.结论 10%PEG6000浸种4 h、20%PEG 6000浸种1 h可以提高黄芩种子的萌发率,可以选择20%PEG 6000处理黄芩种子8 h作为模拟干旱条件,用于幼苗黄芩抗旱材料的选育工作.     

nm23和TGFβ_1在人体非小细胞肺癌中的表达及其临床病理关系的探讨

 目的　探讨转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因在人非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达水平及其临床病理关系。方法　应用免疫组化方法对 83例人非小细胞肺癌组织中转移抑制基因nm2 3及转化生长因子 β1基因表达蛋白水平进行了研究。结果　nm2 3和TGFβ1表达水平与肺癌的TNM分期、细胞分化程度及肺癌的转移有密切关系 (P <0 .0 5 )。结论　nm2 3、TGFβ1基因表达水平同时降低 ,预示肺癌的转移和预后不良。     

黄柏中盐酸小檗碱提取实验方法的改进

目的 :为建立规范化的中药原料生产基地和提供优质的中药原料药提供依据。方法 :比较研究几种从黄柏中提取盐酸小檗碱的传统方法 ,有酸水法、石灰乳法和醇提法等。并对传统方法进行了改进。结果 :石灰乳法提取效率优于其它方法。结论 :本方法简便可靠 ,成本低 ,适合工业化生产。用于指导实践 ,取得良好经济效益和社会效益     

超声技术在中草药成分提取中的应用

综述了近几年来国内超声技术在中草药成分提取中的应用,并讨论超声提取中需要注意的有关问题。