CD3AK/iNOS细胞对慢性粒细胞原代细胞白血病体外净化效应

本研究旨在探讨免疫细胞性一氧化氮供体CD3AK/iNOS细胞对慢性粒细胞白血病(CML)原代白血病 细胞的体外净化效应。培养并扩增PA317/iNOS细胞并用G418筛选;用NIH3T3细胞测定病毒滴度,分离外周血 单个核细胞并用抗CD3单克隆抗体激活;病毒感染靶细胞CD3AK及用G418筛选,用逆转录-聚合酶链反应 (RT PCR)检测CD3AK/iNOS中iNOScDNA的转录;用硝酸还原酶法检测CD3AK/iNOS细胞培养上清中NO含 量以及iNOS活性;用系列稀释半定量巢式RT PCR检测CML患者白血病原代细胞经CD3AK/iNOS细胞净化后 bcr/abl融合基因的表达水平。结果表明,PA317/iNOS细胞能稳定合成并分泌重组逆转录病毒颗粒;NIH3T3细胞 测定病毒滴度为1.0×105CFU/ml;RT PCR检测发现CD3AK/iNOS细胞中有iNOScDNA的转录;CD3AK/iNOS 细胞培养上清中NO含量和iNOS活性较CD3AK细胞明显升高。上述两项指标,经统计学检验,均有显著性差异 (P<0.001,P<0.001)。系列稀释半定量RT PCR检测发现,经CD3AK/iNOS细胞净化后CML患者白血病细胞 bcr/abl融合基因的表达明显下调。实验结果统计分析表明,CD3AK/Neo细胞组净化后与CD3AK/iNOS细胞组净 化后bcr/ablmRNA表达的比较具有显著性差异(P<0.001)。结论:逆转录病毒可介导iNOS基因转入CD3AK细 胞,成功地构建了CD3AK/iNOS;CD3AK/iNOS能明显地增加NO含量和iNOS活性,应用CD3AK/iNOS可能成 为一个有效的AHSCT体外净化方法。     

香砂六君子汤在消化道肿瘤患者化疗中的应用--附89例临床资料

自 2 0 0 0年 5月至 2 0 0 2年 7月 ,笔者在消化道肿瘤患者化疗中应用香砂六君子汤以降低化疗毒副作用 ,改善消化道症状 ,效果较满意 ,现报告如下。1　临床资料所有患者均经病理学确诊 ,为同期住院病人 ,共89例。随机分为二组 ,治疗组 4 8例 ,对照组 4 1例。治疗组 4 8例中 ,男性 4 0例 ,女性 8例 ;年龄 30～ 76岁 ,平均年龄 61 14± 11 37岁 ;其中胃癌 2 4例 ,食道癌 9例 ,贲门癌 3例 ,大肠癌 12例 ;肿瘤病理学分型 :腺癌 2 2例 ,鳞癌 13例 ,分化差的癌 8例 ,粘液腺癌 2例 ,乳头状腺癌 2例 ,印戒细胞癌 1例 ;临床分期 :3期 9例 ,4期 39例。…     

重组逆转录病毒质粒pLNCX/iNOS的构建

目的　构建含一氧化氮合酶 (iNOS)基因的重组逆转录病毒 pLNCX/iNOS质粒。 方法　用PCR技术从pCMV/iNOS质粒中扩增出iNOS全长DNA ,用限制性内切酶HindⅢ和ClaⅠ对i NOSDNA和逆转录病毒质粒pLNCX分别进行双酶切。在T4连接酶的作用下 ,构建重组逆转录病毒质粒 pLNCX/iNOS ;用脂质体介导的方法把重组质粒DNA转染进入包装细胞PA317中 ,经过G418筛选出抗性克隆。通过NIH3T3细胞测定病毒液的病毒滴度。结果　经过酶切分析证实PCR扩增的iNOSDNA基因序列与鼠源性iNOS基因序列完全一致。重组质粒经酶切分析与预期的结果一致。G418筛选出 16个抗性克隆 ,能稳定合成并分泌重组逆转录病毒颗粒。NIH3T3细胞测定病毒滴度为 2 1× 10 4 CFU/ml。结论　逆转录病毒载体 pLNCX可有效地介导iNOS的转染     

艾迪注射液治疗消化道恶性肿瘤的临床经验

有研究报道，艾迪注射液可提高晚期消化道肿瘤患的生活质量，减轻化疗的毒副反应，增加患对化疗的耐受性。艾迪注射液为从人参、黄芪、刺五加、斑蝥等中药中应用现代科学方法精制提取的一种具有抗肿瘤和免疫调节双相作用的抗癌药物。我们自1998年6月至2000年6月对65例     

低剂量5氟脲嘧啶联合低剂量顺铂方案与FOLFOX-4方案治疗AGC的临床研究

局部进展与转移性胃癌 (AdvancedGastricCan cer,AGC)占胃癌的 6 0 %～ 80 %。具有三高 (发病率高、转移率高、死亡率高 )和三低 (早诊率低、切除率低、五年生存率低 )的特点 ,是当今治疗难题。小剂量 5 氟脲嘧啶持续输注联合低剂量顺铂方案简称小剂量FP方案 ,在晚期消化道肿瘤应用广泛 ,国内外均见报道。法国学者De·Gramont设计的FOLFOX 4方案在欧洲多中心三期试验中治疗初治晚期结直肠癌患者 ,取得总有效率 5 1 2 %的疗效 ,目前该方案亦常用于治疗各期胃癌。2 0 0 1～ 2 0 0 3年江苏省肿瘤医院采用小剂量FP方案和FOLFOX 4方案…     

低剂量5-氟尿嘧啶持续静注联合顺铂,周剂量紫杉醇治疗晚期胃癌的临床研究

目的评价低剂量5-氟尿嘧啶(5-Fu)持续静注联合顺铂(DDP)，周剂量紫杉醇(TPF方案)治疗晚期胃癌的疗效及其毒性反应。方法28例晚期胃癌，应用5-Fu250mg／m^2．d，经静脉微量泵持续24小时注射，DDP6mg／m^2．d，1小时，每周5天，紫杉醇90mg／次／周，均连用3周：间隔一周重复。治疗2周期后，按WHO标准评价疗效和毒性。结果全组可评价病例28例，其中CR2例，PRD例，NC9例，PD7例，总有效率42．9％。毒副反应主要为骨髓抑制，消化道反应和脱发，大多数病人能耐受。结论PTF方案是治疗晚期胃癌较为理想的方案。     

阴茎癌综合治疗的探讨

目的探讨不同病期阴茎癌患者予术前辅助化疗、手术、术后化疗、放疗等综合治疗的选择与效果。方法2003年-2008年对37例不同病期阴茎癌患者部分术前辅助化疗2个疗程,术后化疗4-6个疗程,主要为博莱霉素顺铂、氨甲碟呤单用或联合用药,单药主要以博莱霉素为主。予术前辅助化疗、手术、术后化疗、放疗等综合治疗。结果本组37例病人中,直接一期手术者10例(27.0%),术前辅助化疗者27例(73.0%)。化疗的27例病人术后病理证实有化疗反应19例(70.3%),无化疗反应8例(29.6%)。27例病人有5例病情进展,于化疗1-2个周期间停止改手术加放疗。单纯手术者有3例多发或伴有淋巴结转移而再次手术加化疗及放疗。经随访均取得满意疗效。结论术前辅助化疗可予患者控制病情,缩小病灶,提高治疗效果。术后病理有化疗反应预示患者预后良好。     

化学治疗联合靶向COX-2 siRNA对大鼠胃癌组织JAM-1、E-cadherin及β-catenin蛋白表达的影响

目的探讨化学治疗联合靶向环氧合酶-2(COX-2)siRNA对大鼠胃癌组织连接附着分子1(JAM-1)、E钙黏素(E-cadherin)及β-连环素(β-catenin)蛋白表达的影响。方法 45只健康SD大鼠按照随机数字表法分为观察组、阴性对照组和对照组,每组各15只。观察组采用化学治疗联合COX-2siRNA转染的胃癌细胞接种干预,阴性对照组采用化学治疗联合阴性siRNA转染的胃癌细胞接种干预,对照组采用未经siRNA转染的胃癌细胞接种干预,比较3组大鼠胃癌组织的COX-2、JAM-1、E-cadherin及β-catenin蛋白表达水平。结果经COX-2siRNA转染的胃癌SGC7901细胞凋亡率显著高于阴性siRNA转染组(P=0.000)和未经转染的SGC7901组(P=0.000);观察组大鼠肿瘤体积抑制率[(75.8±5.4)%]显著高于阴性对照组[(11.9±4.7)%](P=0.000);观察组COX-2蛋白表达显著低于阴性对照组(P=0.000)和对照组(P=0.000);观察组大鼠肿瘤组织JAM-1、E-cadherin及β-catenin蛋白表达阳性率显著高于阴性对照组和对照组(P0.05)。结论化学治疗联合靶向COX-2siRNA可有效抑制大鼠胃癌组织中的COX-2蛋白表达,从而抑制肿瘤组织侵袭转移相关黏附分子JAM-1、E-cadherin、β-catenin蛋白表达,提高治疗效果。     

混合抗原多肽负载树突状细胞治疗恶性黑色素瘤的临床研究

目的 探讨MAGE-3、Tyr、MART-1、GP-100多肽联合负载自体树突状细胞(dendritic cells,DC)治疗术后恶性黑色素瘤(malignant melanoma,MM)的安全性和近期临床疗效.方法 分离23例HLA-A2+MM患者外周单核细胞,体外诱导DC并用MAGE-3、Tyr、MART-1、GP-100四种多肽抗原进行负载,观察MM患者的免疫应答与近期临床反应.结果 治疗过程中未出现不良反应;第一次DC注射后患者外周血清中IL-2、IL-12和IFN-γ水平即明显上升;DTH试验阳性率为50%(5/10),CD8+IFN-γ+细胞比例升高2倍者达60%(6/10);1例患者转移灶完全消失,4例转移灶缩小50%以上,4例有较小反应,11例病情保持稳定,3例病情进展.结论 MAGE-3、Tyr、MART-1、GP-100多肽联合负载自体DC免疫治疗方法可明显改善晚期MM患者非特异免疫功能,有效激发特异性T细胞免疫应答,控制并缓解病情.     

三阴乳腺癌中Ki-67、P53、E-cadherin的表达及临床意义

目的 分析三阴乳腺癌患者的临床病理特征与其手术标本中三项免疫组化指标表达情况的关系,并探讨其临床意义.方法 观察120例ER、PR和HER-2均为阴性的三阴乳腺癌患者手术标本中Ki-67、P53和E-cadherin的表达情况,对其临床病理特征作回顾性分析.结果 发现Ki-67的表达与肿瘤大小(T分期)、腋窝淋巴结数目、病理类型、局部及远处转移等明显相关(P＜0.05);P53的表达与肿瘤的肿瘤大小(T分期)、腋窝淋巴结数目、病理类型有关:Ki-67、P53高表达及E-cadherin低表达的5年无病生存率、总生存率明显较低(P＜0.05);E-cadherin的表达与乳腺癌病理组织学分级以及淋巴结转移相关(P＜0.05).结论 免疫组化指标 Ki-67、P53和E-cadherin作为三阴乳腺癌的分子指标,对三阴乳腺癌诊断、治疗选择和预测、预后有重要意义.