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1.
912抗肿瘤作用机理的初步探讨 总被引:2,自引:1,他引:1
作者对912的抗肿瘤作用机理进行了初步探讨。观察到912对癌细胞的移植量以及不同的服用时间均表现出不同的抑瘤效应。将服用912后的小鼠的脾细胞与肿瘤细胞混合后再接种,肿瘤生长明显抑制。912对实验肿瘤动物的外周血白细胞分类、巨噬细胞的吞噬功能和E玫瑰花形成也有一定的影响。 相似文献
2.
3.
细胞性一氧化氮供体的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应 总被引:5,自引:0,他引:5
目的一氧化氮(NO)供体细胞系的建立及其对肿瘤细胞凋亡的诱导效应研究。方法采用3H-胍氨酸转换法进行NO合成酶(NOS)活性测定;亚硝酸盐检测;DNA片段的提取及凝胶电泳分析;凋亡细胞的DAPI染色观察;Westernblot分析。结果将iNOS真核表达质粒、pCMV/iNOS转染至Sp2/0骨髓瘤的变异株中,并获得能稳定表达iNOS和合成NO的重组细胞系(SPmt/iNOS),表达iNOS的效率为每升培养物含400μg蛋白。利用该细胞作NO细胞性供体,成功地证实NO能诱导Sp2/0骨髓瘤细胞发生凋亡。结论所建细胞性NO供体应用于NO的生物学功能研究具有NO合成稳定;更能模拟体内细胞间NO的信息传递过程;不需任何外源刺激即可合成NO等独特优点。所建NO供体细胞可以用于肿瘤细胞凋亡的研究。 相似文献
4.
5.
以乙肝病毒核心抗原HBcAg为载体的utrophin抗体的制备 总被引:1,自引:0,他引:1
目的构建以乙肝病毒HBc为载体的带有utrophin的两个B细胞表位多肽的融合表达质粒pHBc-2UB,表达出融合蛋白并纯化,通过免疫新西兰大白兔获得抗utrophin的抗体。方法通过DNAstarⅡ模拟出utrophin的两个显著优势的B表位。用PCR法合成片段插入HBcAg序列的78位,将该合成片段克隆至pET28a载体中,构建重组表达质粒,表达出融合蛋白HBc-2UB,纯化后免疫新西兰白兔。再将该合成片段克隆至pGEX4T-2载体中,构建重组表达质粒,表达出融合蛋白GST-2UB,用于检测两个表位的抗体。结果测序结果表明重组质粒构建成功,SDS-PAGE电泳显示融合蛋白表达正确,ELISA检测到高滴度抗体。结论以HBc呈现utrophin的B表位被成功表达和纯化,获得高滴度的与两个B表位结合的抗体,为utrophin检测和DMD治疗药物研究打下了基础。 相似文献
6.
7.
汉防己甲素对K562/A02细胞株SORCIN基因表达的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究旨在探讨汉防己甲素(Tet)在逆转K562/A02细胞耐药与耐药相关的可溶性钙结合蛋白(SORCIN)基因表达之间的关系,为Tet的临床应用提供新的理论基础。通过MTT法筛选出所需浓度Tet,与K562/A02细胞株孵育培养48小时后,通过MTT检测Tet对柔红霉素(DNR)细胞毒性的影响,用RT-PCR方法检测SORCIN基因表达的变化,用Western blot方法检测sorcin表达蛋白的变化。结果表明:在所选浓度范围内,Tet可以增强DNR对K562/A02的细胞毒作用,(Tet浓度为0,0.5,1.0,2.0mg/L时DNR和Tet的IC50分别为11.3±0.17,5.15±0.10,3.91±0.06,2.52±0.04mg/L,p〈0.01);K562/A02细胞中SORCIN基因高表达,且随着Tet浓度的增加SORCIN的表达先增强后减弱(Tet浓度为0.5mg/L时增强,1.0和2.0mg/L时减弱,p〈0.05);K652细胞中sorcin蛋白低表达,K562/A02细胞中sorcin蛋白高表达,且随着Tet浓度的增加先增强后减弱(Tet浓度为0.5mg/L时增强、1.0和2.0mg/L时减弱,p〈0.05)。结论:MTT检测显示Tet对K562/A02耐药逆转呈浓度依赖性,Tet可能通过调整SORCIN基因及蛋白的表达参与逆转K562/A02的耐药性,但并不与其耐药逆转作用完全相关。 相似文献
8.
9.
目的:通过噬菌体展示技术筛选iNOS特异性抑制肽。方法:将iNOSFAD结合区及其附近序列的基因片段装入pET-28A( ),在大肠杆菌BL21中表达,His.bind^TM亲和层析柱纯化目的蛋白,使用纯化蛋白筛选Ph.D.-12^TM噬菌体库,筛选iNOS活性抑制作用较高的噬菌体克隆,测序并合成其中具有一致序列的短肽。结果:得到具有较高表达量的目的蛋白,经His.Bind^TM柱亲和层析纯化后纯度大于95%,以纯化蛋白筛选Ph.D.-12^TM噬菌体库,经4轮筛选获得10株iNOS活性抑制作用较高的噬菌体克隆,测序发现其中5株序列完全相同,合成该12肽,初步研究表明其对iNOS表现为高浓度抑制,低浓度兴奋的作用,而对nNOS及eNOS则没有影响。结论:以iNOSFAD片段蛋白为靶蛋白筛选得到的克隆对iNOS活性具有特异性影响,可根据这些特征设计合成小分子前导药物,创造新的活性药物。 相似文献
10.
目的:探求LAK细胞对白血病疗效的监测手段。方法:用流式细胞仪测定5例成人脾淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK细胞)和21例正常人外周血淋巴细胞的DNA指数(DI)及增殖周期。结果:人脾LAK细胞的增殖活力明显高于未激活的脾淋巴细胞和外周血淋巴细胞。培养(1~14d)期间人脾LAK细胞的增殖活力高,并且稳定。在人脾LAK细胞中,未找出非整倍体细胞,DI指数在正常范围。结论:流式细胞仪可用于判断人脾LAK细胞对白血病的疗效。 相似文献