基于德尔菲法的自身免疫性甲状腺炎中医辨证分型研究

目的运用德尔菲法对自身免疫性甲状腺炎辨证分型及各证型诊断标准进行专家调研分析,制定自身免疫性甲状腺炎中医诊断标准。方法共对全国46位专家进行两轮问卷调查,利用SPSS软件分析问卷反馈的数据,评价专家意见的集中和协调程度、问卷信度情况。结果第一轮专家咨询共22名,专家积极系数为95.45%;第二轮专家咨询共24名,专家积极系数为87.5%。第一轮专家调查的内部一致信度值0.353,第二轮信度值0.613。结论符合临床实际的自身免疫性甲状腺炎中医辨证分型:肝郁痰凝证、脾肾阳虚证、痰瘀互结证、气滞痰凝证、气阴两虚证、阳虚痰凝证。     

HO-1基因转染对骨髓间充质干细胞增殖、 表型及多向分化能力的影响

目的 探讨在体外培养条件下,慢病毒载体介导的血红素加氧酶-1(HO-1)基因转染对骨髓间充质干细胞(MSC)增殖、表型及多向分化能力的影响。方法 分离培养大鼠源性骨髓MSC,利用过表达HO-1重组慢病毒载体(lenti-HO-1)将HO-1基因转染到MSC中,用荧光倒置显微镜及Western blot法分析评估转染效率。利用1.5μg/ml的嘌呤霉素筛选稳定过表达HO-1的MSC(MSC-HO-1)。用Western blot法检测MSC与MSC-HO-1内HO-1蛋白表达情况,用细胞计数法绘制MSC与MSC-HO-1的生长曲线,流式细胞仪检测MSC与MSC-HO-1表型,成骨、成脂及成软骨细胞诱导分化检测多向分化潜能变化。结果 MOI=50的 Lenti-HO-1可高效转染MSC。与MSC比较,MSC-HO-1在经过多次传代后仍能高效过表达HO-1,差异有统计学意义(P<0.05)。MSC-HO-1的增殖生长趋势、表面标志表达及多向分化潜能均与未转染的MSC相似。结论 重组慢病毒载体Lenti-HO-1可成功转染MSC并高效表达转入的基因;HO-1基因修饰对MSC增殖活性、免疫表型及多向分化潜能无显著影响。     

腹腔镜下不同子宫切除术式对子宫肌瘤患者生活质量及盆底功能的影响

目的 分析腹腔镜下不同子宫切除术式对子宫肌瘤患者生活质量及盆底功能的影响.方法 选取2018年1月至2019年1月本院收治的子宫肌瘤患者70例为研究对象,随机分为两组,每组35例.对照组实施腹腔镜下全子宫切除术,观察组实施腹腔镜下三角形子宫切除术.比较两组术中出血量、手术时间、术后下床活动时间、术后排气时间和住院时间、治疗前后患者生活质量、盆底功能、并发症发生率.结果 观察组术中出血量少于对照组,手术时间、术后下床活动时间、术后排气时间和住院时间均短于对照组(P<0.05),治疗后观察组患者生活质量优于对照组,盆底功能障碍发生率、并发症总发生率均低于对照组(P<0.05).结论 腹腔镜下不同子宫切除术式对子宫肌瘤患者生活质量及盆底功能的影响存在差异,相对于腹腔镜下全子宫切除术,实施腹腔镜下三角形子宫切除可更好改善患者的盆底功能和生活质量.     

温针灸治疗输卵管阻塞不孕症的临床疗效观察

目的在补气温经方联合输卵管通液术基础上,观察温针灸治疗输卵管阻塞不孕症的临床疗效。方法将60例输卵管阻塞不孕症患者随机分为观察组和对照组,每组30例。对照组采用补气温经方联合输卵管通液术治疗,观察组在对照组治疗基础上采用温针灸任脉穴,两组均治疗6个月经周期。比较两组的临床疗效和受孕率,并比较两组治疗前后中医证候评分、局部体征评分和中医各项主症评分的变化,以及输卵管通液术后和针灸治疗后的疼痛视觉模拟量表(VAS)评分。结果经过6个月经周期治疗后,观察组总有效率和受孕率分别为93.3%和50.0%,对照组分别为80.0%和26.7%,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);观察组中医证候评分、局部体征评分和中医各项主症评分均优于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。输卵管通液术后并经针灸治疗后,观察组VAS评分低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论在补气温经方联合输卵管通液术基础上,针灸治疗可提高输卵管阻塞不孕症的疗效和受孕率,改善中医证候和局部体征,并有效缓解卵管通液术后的疼痛。     

双参宁心胶囊对冠状动脉微循环障碍大鼠心脏功能及血流动力学的影响

目的 研究益气活血中药双参宁心胶囊对冠状动脉微循环障碍大鼠心脏血流动力学及心功能的影响。方法 大鼠随机分为6组,分别为假手术组,模型组,尼可地尔组（5 mg·kg^-1）,双参宁心胶囊高、中、低剂量（180,90,45 mg·kg^-1）组。动物按分组先给予相应药物7 d,末次给药后2 h进行模型制备。采用左心室注射内注射栓塞微球（40~120 μm,约1 000个微球）方法建立大鼠冠脉微循环障碍模型。造模术后24 h后超声心动图观察左室舒张末期内径（LVIDd）,左室收缩末期内径（LVIDs）,左室舒张末期容积（LVEDV）,左室收缩末期容积（LVESV）,每搏输出量（SV）,心输出量（CO）,左室射血分数（EF）,左室缩短率（FS）;心导管技术测定大鼠动脉收缩压（SBP）,舒张压（DBP）,左室峰压（LVSP）,左室舒张末压（LVEDP）,左室内压最大上升速率（LV+dp/dt_max）,左室内压最大下降速率（LV-dp/dt_max）,计算平均动脉（MAP）,体表标准Ⅱ导心电图计算心率（HR）;生化分析法检测肌酸激酶（CK）,肌酸激酶同工酶（CK-MB）和乳酸脱氢酶（LDH）活性;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清心肌肌钙蛋白T（cTnT）;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠心肌组半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）,B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）及Bcl-2相关X蛋白（Bax）蛋白表达;2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色观察心肌梗死面积;苏木素-伊红（HE）染色观察心肌形态学改变。结果 与假手术组比较,模型组SV,CO,EF,FS显著降低（P<0.01）,LVIDs,LVEDV显著增加（P<0.01）;与模型组比较,双参宁心胶囊各剂量组可以增加EF（P<0.05,P<0.01）和FS（P<0.01）;180,90 mg·kg^-1剂量组明显降低LVIDs,LVESV,增加LVEDV,SV和CO（P<0.05,P<0.01）。与假手术组比较,模型组SBP,DBP,MAP,LVSP,LV+dp/dt_max及LV-dp/dt_max均显著降低（P<0.01）,HR差异无统计学意义。双参宁心胶囊各剂量组对大鼠血流动力学具有一定程度改善,较模型组增加大鼠SBP,DBP,MAP,LVSP,LV+dp/dt_max,LV-dp/dt_max及HR（P<0.05,P<0.01）。与假手术组比较,模型组大鼠血清CK,LDH,CK-MB及cTnT明显升高（P<0.01）,与模型组比较,双参宁心胶囊有明显降低动物血清CK,LDH,CK-MB及cTnT的作用（P<0.05,P<0.01）。与假手术组比较,模型组大鼠心肌Caspase-3蛋白表达显著升高（P<0.01）,Bcl-2蛋白表达明显降低（P<0.05）。与模型组比较,双参宁心胶囊低剂量组心肌Caspase-3蛋白表达降低（P<0.05）;与模型组比较,双参宁心胶囊高剂量组显著增加大鼠心肌Bcl-2表达（P<0.01）。心肌TTC染色显示,与模型组比较,双参宁心胶囊各剂量组均能显著减少心肌梗死面积（P<0.01）。HE病理结果显示,双参宁心胶囊各剂量组心肌组织病理变化与模型组比较有不同程度的减轻。结论 益气活血中药双参宁心胶囊可以明显增加微球栓塞导致的冠脉微循环障碍的心脏功能,改善心脏血流动力学指标,减少心肌梗死面积,降低CK,LDH,CK-MB及cTnT等心肌损伤标志物水平,其作用机制与抑制心肌细胞凋亡起到保护心肌的作用有关。     

补肾助孕方治疗复发性流产的分子作用机制分析

目的 基于网络药理学研究补肾助孕方治疗复发性流产（RSA）的主要成分、作用靶点及作用通路,应用分子对接和体外细胞实验验证,从而揭示其潜在作用机制。方法 首先,中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）,中医药研究综合数据库（TCMID）检索和收集既往文献补肾助孕方的活性成分,应用DrugBank数据库,SwissTargetPrediction数据库等平台查找预测药物作用靶点,检索人类基因注释数据库（GeneCards）,人类孟德尔遗传数据库（OMIM）中等数据库获得复发性流产靶点,将药物与疾病预测靶点取交集。应用Cytoscape 3.7.1软件绘制“补肾助孕方-化合物-靶点-复发性流产”网络,蛋白质相互作用平台（STRING）平台构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络,分析获取核心网络。其次,采用R语言软件对共同靶点分别行基因本体（GO）功能富集分析和京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析。最后,使用Autodock Vina 1.1.2软件用来行分子对接及体外细胞实验验证补肾助孕方对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/AKT）通路的激活作用。结果 发现补肾助孕方的49个潜在活性成分可能靶向133个复发性流产相关作用靶点。GO功能富集分析获得470个细胞生物学过程,主要涉及血管形态发生、发育、细胞增殖、氧化活性等生物学过程。KEGG通路富集分析获得103条信号通路（P<0.05）,主要与PI3K/AKT信号通路、糖基化终末产物/糖基化终末产物受体（AGE/RAGE）信号通路、肿瘤坏死因子（TNF）信号通路相关。分子对接提示补肾助孕方关键活性成分山柰酚与核心蛋白蛋白激酶B1（AKT1）,血管内皮生长因子A（VEGFA）的Vina得分最低且相近。体外细胞实验证实,补肾助孕方可通过活化PI3K/AKT信号通路,上调VEGFA的表达及下游AKT1蛋白的表达水平,促进血管的生成。结论 该研究初步揭示补肾助孕方作用于血管形态发生发育、细胞增殖,明显激活PI3K/AKT通路进而上调VEGFA的表达,最终促进母胎界面血管生成利于妊娠早期胎盘的形成及早孕的维持,起到治疗RSA的作用,为后续新药研发供思路。     

不同树脂环纹数鸡血藤药材质量的分析和评价

目的考察鸡血藤断面树脂环纹数与其药材品质之间的相关性。方法醇溶性浸出物含量按照《中国药 典：一部》（2015 年版）附录XA 法测定;采用高效液相色谱法测定原儿茶酸、儿茶素、表儿茶素、芒柄花素及 染料木素的含量及建立高效液相色谱（HPLC）指纹图谱,用SPSS 对其环纹数与醇溶性浸出物及5 个化学成分进 行相关性分析。结果醇溶性浸出物的含量在3 环左右时达到一个峰值,后随着环纹数的增加,变化趋势有所 不同。不同树脂环纹数药材中原儿茶酸、儿茶素及表儿茶素的含量差异较大,而芒柄花素与染料木素的含量差 异较小,其中儿茶素与表儿茶素、芒柄花素与染料木素在不同树脂环纹药材中的动态变化趋势较为一致;除 1 环样品外,同一植株不同环纹数的药材样品具有较高的相似度;环纹数与醇溶性浸出物及5 个化学成分之 间无显著相关性。结论各指标性成分的含量与树脂环纹数之间没有一定的相关性,鸡血藤横切面的树脂环 纹数的多少不可以作为评判药材质量优劣的直观依据,但以3 环以上入药为宜。     

基质细胞衍生因子-1和血小板第4因子对体外扩增后脐血CD34+细胞黏附特性和趋化功能的影响

为了研究基质细胞衍生因子-1（SDF—1）和血小板第4因子（PF4）对扩增后脐血CD34^＋细胞归巢相关功能的影响，将纯化的脐血CD34^＋细胞接种入无血清培养液中，加入不同组合的细胞因子FST（FL＋SCF＋TPO）、FST＋SDF—1、FST＋PF4或FST＋SDF—1＋PF4，分别于培养第7、10、14天检测CD34^＋细胞扩增倍数、集落形成能力、细胞的黏附分子表达、总黏附性、趋化功能。结果表明：①加入SDF—1的实验组CD34^＋细胞及造血祖细胞集落扩增倍数高于对照组；②加入SDF—1明显上调扩增的CD34^＋细胞CD49e的表达，加入PF4明显上调扩增的CD34^＋细胞CD49e、CD54的表达，在扩增体系中加入SDF—1或PF4均能够明显提高扩增的CD34^＋细胞的总黏附性；③在扩增体系中加入SDF—1能够明显提高扩增的CD34^＋细胞的自发迁移率，但导致CXCR-4的表达和SDF—1诱导迁移率降低；而PF4能够明显提高扩增的CD34^＋细胞的CXCR-4的表达和SDF—1诱导迁移率；在扩增体系中同时加入SDF—1和PF4能够明显提高扩增的CD34^＋细胞自发迁移率和SDF—1诱导迁移率。结论：体外扩增体系中加入SDF—1和PF4能够上调部分归巢相关黏附分子的表达，保持扩增的CD34^＋细胞的黏附和迁移能力，有利于降低体外扩增对造血干／祖细胞（HSPC）归巢相关功能的不利影响，维持扩增的HSPC的归巢潜能。     

X线头影测量简易摄影法

X线头影测量用X线片是牙合齿整畸外科诊断和手术定位的重要资料之一。常规于术前摄取头颅正位和侧位X线片。文献提出:必须在头颅定位仪的严格定位下摄影,以免头位不正造成误差,降低各测量数据的分析比较价值。本单位在头颅测量X线机尚未设置前,用普通X线机及一般设备开展了X线头影测量用片的摄制工作,提供了基本上可供临床所需的X线片。所用设备为300及500mA、125及150KV两种     

甲氧明治疗腰麻下剖宫产产妇术中低血压的量-效关系

目的观察甲氧明治疗腰麻下剖宫产产妇术中低血压的量-效关系。方法选择腰麻下行剖宫产术且术中出现低血压的产妇80例,ASAⅠ或Ⅱ级,年龄24~35岁,体重52~80kg,随机均分为四组。产妇出现低血压后,分别给予甲氧明1.6mg组(A组)、甲氧明2.0mg组(B组)、甲氧明2.5mg组(C组)和甲氧明3.2mg组(D组)。计算甲氧明的ED50、ED95和95%可信区间(CI)。结果甲氧明用于治疗剖宫产术中低血压的ED50(95%CI)和EC95(95%CI)分别为1.62(1.51~1.74)mg和2.34(2.13~2.57)mg。结论甲氧明治疗腰麻下剖宫产产妇术中低血压的ED50、ED95分别为1.62mg和2.34mg。