牙龈卟啉单胞菌FtsZ第322位的甘氨酸在细胞分裂中的作用

目的：探讨牙龈卟啉单胞菌FtsZ（PgFtsZ）第322位的甘氨酸在细菌细胞分裂过程中的作用。方法：通过site—directed mutagenesis技术,采用megaprimer方法,使用三个引物进行两轮的PCR,构建Pg—FtsZ第322位甘氨酸的点变异型质粒pYW9（ZG322P,携带PgFtsZ第322位甘氨酸由脯氨酸取代的点变异型基因）和pYW10（ZG322H,携带PgFtsZ第322位甘氨酸由组氨酸取代的点变异型基因）,然后将质粒pYW9、pYW10和pEZ1（携带野生型PgFtsZ的基因）分别转化到Escherichia coli BL21（DE3）pLysS中进行表达、分离和纯化目的蛋白质。同时将载体pET3a也转化到E．coli BL21（DE3）pLysS中作为阴性对照。进一步通过免疫印迹法鉴定构建的点变异型ZG322P和ZG322H。E．coli的形态通过显微镜观察。结果：野生型PgFtsZ的过表达导致E．coli细胞分裂的明显抑制,含质粒pEZl的E．coli和仅含有载体作为对照的E．coli相比延长大约20倍。然而点变异型ZG322P和ZG322H的过表达并未引起E．coli细胞分裂的抑制,即含质粒pYW9的E．coli和含质粒pYW10的E．coli表现出正常的形态,与仅含有载体作为对照的E．coli细胞的形态相似。免疫印迹分析表明野生型PgFtsZ、点变异型ZG322P、ZG322H在相同位置出现阳性带,并且表达水平相似。结论：牙龈卟啉单胞菌FtsZ第322位的甘氨酸在细菌细胞分裂中起着重要的作用。     

正常和炎症人牙髓组织Cu，Zn─SOD活性比较研究

本文分别对正常和慢性炎症人牙髓组织各１５例、急性炎症牙髓组织５例，进行Ｃｕ，Ｚｎ─ＳＯＤ活性测定。。结果显示，Ｃｕ，Ｚｎ─ＳＯＤ活性均数，正常牙髓为１５１．０３±５８．３４Ｕ／ｇ（湿重），慢性炎症牙髓为１２１．７２±７７．９６Ｕ／ｇ（湿重），急性炎症牙髓为２１３．２８±４６．５７Ｕ／ｇ（湿重）．提示Ｃｕ，Ｚｎ─ＳＯＤ活性在慢性炎症牙髓组织中比在正常牙髓中显著降低（ｐ＜０．０５），而在急性炎症牙髓组织中则比正常牙髓显著升高（ｐ＜０．０１）。这为研究急、慢性牙髓炎ｃｕ，Ｚｎ─ＳＯＤ活性变化规律提供了依据。     

牙龈卟啉单胞菌与龈沟液中白细胞介素8关系的研究

目的:探讨龈沟液(GCF)中白细胞介素8(IL -8)在慢性牙周炎病程中的变化、IL- 8与牙周临床检测指标以及同龈下菌斑中细菌含量的相关关系。方法: 5名非牙周炎患者的10颗牙周健康牙和30名慢性牙周炎(CP)患者的70颗牙(其中10颗为健康牙, 60颗为牙周炎患牙)纳入本研究。采集观察牙的GCF样本、龈下菌斑样本,同时记录所有牙的牙龈指数(GI)、牙周袋探诊深度(PPD)、临床附着丧失水平(CAL)。用ELISA法检测样本中IL -8的水平,用厌氧菌培养技术培养菌斑标本,用PCR法检测菌斑中的牙龈卟啉单胞菌(Pg),结果:慢性牙周炎组的GCF中IL -8的总量高于临床牙周健康组,而IL -8的质量浓度在各组中无差异。GCF中IL- 8浓度与GI、PPD、CAL无相关关系,而IL -8的总量与GI、PPD、CAL呈正相关关系。龈下菌斑中Pg的检出量与GCF中IL- 8的含量间未发现有相关关系。结论:慢性牙周炎患者龈沟液中IL- -8量增加与龈沟液分泌增加有关而与牙龈卟啉单胞菌检出CFU无关。     

葡萄糖酸锌治疗复发性口腔溃疡的疗效观察

复发性口腔溃疡是口腔粘膜的常见病,多发病,病因复杂,周期长,严重影响生活质量,许多治疗手段疗效均不很显著.本实验证实补锌对治疗复发性口腔溃疡有较好的疗效,且无副作用,价格便宜,应推广使用.     

龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌牙龈素基因片段的检测

目的：检测慢性牙周炎患者龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis）的2个基因片段kgp-cd和rgpB-cd,探讨2个基因片段的存在和缺失与牙周临床指标之间的关系.方法：选择慢性牙周炎患者龈下菌斑84个,对P.gingivalis阳性的龈下菌斑样本进行kgp-cd和rgpB-cd基因片段检测;根据2个基因片段的有无,将P.gingivalis分为A型和B型,采用SPSS11.5统计软件包,用t检验和x2检验分析不同基因型P.gingivalis与牙周临床指标的关系.结果：A型P.gingivalis在慢性牙周炎中的检出率高于B型（P＜0.05）,分别为85.29%和14.71%.不同基因型P.gingivalis引起的牙周袋探诊深度和牙龈出血倾向存在显著性差异（PD：t=2.85,P＜0.05;BOP：P＜0.05）.结论：kgp-cd和rgpB-cd基因与P.gingivalis的致病性有关.     

侵袭性牙周炎患者血清抗牙龈卟啉菌表面抗原抗体滴度和亲和力的研究

临床上通过检测抗牙龈卟啉菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)表面抗原脂多糖(lispopolysaccharide，LPS)的血清抗体滴度和亲和力来评估体液免疫反应在侵袭性牙周炎(aggressive periodontilis，AgP)中抵御Pg的作用。研究表明，在评估体液免疫反应在抵御牙周致病菌的作用时，抗体滴度更有价值。然而，抗体水平和亲和力之间的关系目前尚存有争议。此研究旨在探讨AgP患者血清中抗Pg表面抗原的IgG抗体的滴度和抗体亲和力之间的关系。     

鼠半胱氨酸蛋白酶抑制物cystatin S 对人口腔牙龈卟啉菌生长的抑制

目的：观察鼠半胱氨酸蛋白酶抑制物ｃｙｓｔａｔｉｎＳ对人口腔牙龈卟啉菌（Ｐｏｒｐｈｙｒｏｍｏｎａｓｇｉｎｇｉｖａｌｉｓ）生长的影响。方法：用琼脂扩散法检查了ｃｙｓｔａｔｉｎＳ对人口腔数种牙龈卟啉菌生长的抑制情况。结果：虽然对不同菌株其影响程度略有差异，对实验用牙龈卟啉菌３８１，３８１Ｐ，ＡＴＣＣＷ５０，Ｗ８３，３３２７７，ＮＣＴＣ１１８３４，ＶＰＩ１４０１８生长均有抑制作用，并且具有药物浓度依赖性。结论：鼠半胱氨酸蛋白酶抑制物ｃｙｓｔａｔｉｎＳ对人口腔牙龈卟啉菌生长有抑制作用。     

牙龈卟啉单胞菌胞外蛋白对牛主动脉内皮细胞存活的影响

目的:探讨牙周致病菌牙龈卟啉单胞菌胞外蛋白对体外培养牛主动脉内皮细胞(BAECs)存活的影响.方法:盐析法提取牙龈卟啉单胞菌胞外蛋白;不同浓度的胞外蛋白(200、300、400、500、600μg/mL)分别作用于体外培养的BAECs 24 h,对照组为无细菌胞外蛋白作用的BAECs;另外,用400μg/mL胞外蛋白分别作用于BAECs 6、12、24、36h,对照组细胞同样培养6、12、24、36 h,比较实验组与对照组BAECs存活率的变化;采用台盼蓝染色法检测BAECs存活率.采用SPSS 10.0软件包对数据进行独立样本t检验.结果:当作用于BAECs的牙龈卟啉单胞菌胞外蛋白浓度在200～600μg/ml.范围内时,BAECs存活率均低于对照组(P<0.05),且随细菌蛋白浓度增加而降低;在36 h内,随着时间的延长,实验组和对照组的BAECs存活率均有下降,但实验组降低的幅度大于对照组(P<0.05),显示细菌胞外蛋白对BAECs存活率的影响具有时间依赖性.结论:牙龈卟啉单胞菌胞外蛋白可导致体外培养的牛主动脉内皮细胞存活率降低,并呈现剂量和时间依赖性.     

牙龈卟啉菌内毒素的化学组成和结构分析

作者采用牙龈卟啉菌４７Ａ－１株与大肠杆菌Ｏ＿（５５）４４３３６株，进行了内毒素活性、化学组成及其结构关系等研究和比较。结果：牙龈卟啉菌４７Ａ－１株精制内毒素含有５５．０％糖类、３６．０％脂类、１．６％蛋白质和０．３％磷，但不含２－酮－３－脱氧－Ｄ－甘露糖－辛酮糖酸（ＫＤＯ）。该内毒素在电镜下呈圆形和末端膨大的短杆状结构，其超微结构与光滑型大肠杆菌内毒素有所不同，但与粗糙型大肠杆菌内毒素相似。该内毒素的红外光谱与大肠杆菌Ｏ＿（５５）４４３３６株内毒素极其相似，表明两者为同型结构物。研究结果证实，牙龈卟啉菌内毒素具有细菌内毒素的基本特征。