转换西罗莫司治疗肾移植后高胆红素血症的临床观察

目的：对转换西罗莫司（SRL）并撤除钙调磷酸酶抑制剂（CNI）类药物对高胆红素血症影响及其安全性和可行性进行临床观察。方法：2006年2月～2007年11月对肾移植后伴有高胆红素血症患者37例转换SRL并撤除CNI类药物，观察转换后总胆红素（TB）水平变化、血清肌酐（Scr）变化和不良事件发生情况。结果：TB和直接胆红素（DB）由转换前的30．45μmol／L和10．10μmol／L下降至转换后的12．13μmol／L和3．7μmol／L（P〈0．01）。Scr和血尿酸（Ua）转换后较转换前均有较明显降低，肌酐清除率（Ccr）有所提高。移植肾和患者全部存活。不良事件主要为高脂血症。结论：转换SRI．治疗肾移植后高胆红素血症是有效和安全的。     

CTLA4Ig和西罗莫司短期联合使用延长异种胰岛移植物的存活

目的 观察细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4融合蛋白(CTLA4Ig)与西罗莫司(SRL)联用阻断共刺激通路对异种胰岛移植物存活的影响.方法 取C57BL/6小鼠,腹腔注射链佐星,制成糖尿病模型.采用随机单位组设计分组法将糖尿病小鼠分为7组,各组均于小鼠左肾包膜下移植SD大鼠胰岛300胰岛当量.CTLA4Ig组分别于移植当天及移植后第2、4、6天腹腔注射CTLA4Ig 0.5 mg/d;SRL组分别于移植当天及移植后第1、2天给予SRL灌胃,0.2 mg·kg-1·d-1,其后隔天用药1次,共用2周;MRI组分别于移植当天及移植后第2、4天腹腔注射仓鼠抗小鼠CD154单克隆抗体(MR1)0.5 mg/d;CTLA4Ig和SRL联用组(SRL联用组)、CTLA4Ig和MRl联用组(MR1联用组)以及CTLA4Ig、MR1和SRL联用组(三药联用组)各药物的剂量与用法同上述各组;对照组仅行胰岛移植,不予以药物.观察至移植后200 d,通过监测受者血糖水平来判断排斥反应的发生情况.记录各组移植物的存活(即无排斥反应)时间.发生排斥反应者,或未发生排斥反应、移植物存活时间＞200 d者,取移植胰岛,行HE染色及免疫荧光染色,进行组织学观察.结果 对照组移植物存活时间中位数为17 d,该组最终均发生排斥反应.SRL组、MRl组和CTLA4Ig组移植物存活时间中位数分别为34 d、98 d和77 d.均明显长于对照组(P＜0.05),三组中分别有90%(9/10)、62.5%(5/8)和83.3%(5/6)的小鼠发生排斥反应.SRL联用组移植物存活时间中位数为130 d,明显长于上述4组(P＜0.01),有50%(3/6)的小鼠发生排斥反应.MR1联用组以及三药联用组移植物存活时间中位数均＞200 d,分别有42.9%(3/7)和25%(2/8)的小鼠发生排斥反应.组织学检查结果显示,对照组发生排斥反应时,其移植胰岛破坏严重,可见大量CD4+和CD8+淋巴细胞及巨噬细胞浸润,并可见IgG、IgM和补体C3沉积.其它组发生排斥反应者的组织学改变与对照组相似.SRL联用组存活200 d的小鼠,其移植胰岛组织中未见或仅有少量炎症细胞浸润,胰岛素和胰高血糖素染色阳性,未见IgG、IgM和补体C3沉积.结论 短期联合使用CTLA4Ig和SRL能显著延长小鼠体内大鼠来源的胰岛的存活时间.     

雷帕霉素加重蛋白负荷肾病大鼠肾脏的损害及氯沙坦的保护作用

目的 观察雷帕霉素对蛋白负荷肾病大鼠肾脏组织和肾功能的影响及氯沙坦的保护作用，并探讨相关机制。 方法 采用牛血清蛋白（BSA）诱导Wistar雌性大鼠建立蛋白负荷的肾病大鼠模型，根据处理不同分成模型对照组、雷帕霉素组（单纯使用雷帕霉素，Rapa组）和氯沙坦组（同时使用雷帕霉素和氯沙坦）。检测不同时间点各组大鼠的尿蛋白量（24 h）和肾功能水平，并对肾组织进行光镜和电镜检查。 结果 实验第7 天，Rapa组和氯沙坦组大鼠尿蛋白量（24 h）均显著高于模型组（均P < 0.05），但氯沙坦组大鼠尿蛋白量（24 h）较Rapa组有明显缓解（P < 0.05）。实验第14天，Rapa组大鼠尿蛋白量（24 h）仍显著高于模型组（P <0.05），而氯沙坦组与模型对照组间的尿蛋白量（24 h）差异已无统计学意义。肾组织光镜检查显示Rapa组大鼠肾小管管腔中的蛋白管型明显增加；而氯沙坦组的蛋白尿和蛋白管型较Rapa组有明显减少；电镜结果显示Rapa组肾脏可见明显的肾小球局灶性足突融合。 结论 雷帕霉素增加蛋白负荷肾病大鼠的蛋白尿水平，其主要机制可能与雷帕霉素损伤肾小球足细胞后导致肾小球滤过屏障的改变有关；氯沙坦可以减轻雷帕霉素所致的大量蛋白尿。     

反相高效液相色谱法测定西罗莫司及其有关物质

目的 :为西罗莫司研制过程中提供质量控制。方法 :色谱柱为ZorboxSB C1 8(4 6mm× 2 50mm ,5μm) ;流动相为乙腈—水 (65∶35) ;流速为 1ml/min ;柱温为 62℃ ;紫外检测波长为 2 77nm。结果 :方法具有较高的专属性 ;精密度日内RSD为 0 35 % ,日间RSD为 0 96 % ;线性范围为 0 0 0 0 0 1～ 30 μg(r=0 9999) ;最低检测限 (LOD)与最低检测量 (LOQ)分别为 0 0 2 5ng与 0 0 8ng。结论 :建立了一种专属、灵敏、快速、简便的测定西罗莫司及其有关物质的反相高效液相色谱方法     

BK virus-associated viruria and viremia in a patient with lymphangioleiomyomatosis after lung re-transplantation: A case report and review of the literature on BK virus infection post-lung transplantation

The BK virus (BKV) is a member of the polyomaviridae family of DNA viruses. BKV reactivates under a highly immunosuppressed state and causes renal dysfunction. In renal transplant patients, BKV infection leads to tubular impairment and loss of transplanted kidney grafts. However, few studies have reported on the relationship between BKV and lung transplantation. Adjustment of the dosage of immunosuppressants is needed in some cases, but the treatment method has not been established.Here, we report a case of BKV-associated viruria and viremia in a patient with lymphangioleiomyomatosis (LAM) after lung re-transplantation. A 44-year-old female refractory LAM patient who had undergone lung re-transplantation 3 months earlier was diagnosed with BKV-associated viruria and viremia. Urine cytology indicated decoy cells and the urine and serum polymerase chain reaction test was positive for BKV. As scheduled after re-transplantation surgery, immunosuppressive drugs were progressively reduced. This patient was considered to have experienced spontaneous BKV-associated viremia and viruria. Review of the literature suggested that 17%–42% of BKV-associated viruria cases have been reported after lung transplantation, but cases of BKV-associated nephropathy are rarely reported. Based on the present case, doctors involved in lung transplantation should monitor patients for BKV infection. Decoy cell monitoring by urine cytology is a useful screening method in the follow-up observation after lung transplantation. Early-stage interventions may prevent BKV-associated nephropathy even in patients who have developed BKV viremia, and sirolimus can be administered to patients with histories of BKV infection if they are carefully monitored.     

西罗莫司在肾移植术后远期各类并发症患者中的转换应用

目的 探讨以钙调磷酸酶抑制剂(CNI)为主要免疫抑制方案的肾移植受者术后远期发生各类并发症时,应用两罗莫司(SRL)转换治疗方案的有效性及安全性.方法 肾移植术后远期38例采用CNI的患者因发生各类并发症而转换为SRL治疗,其中慢性移植肾肾病(CAN)17例、肿瘤10例、糖尿病3例、移植肾动脉狭窄(TRAS)球囊扩张术后2例、CNI毒性肝损害2例、丙型肝炎病毒(HCV)感染2例、面容改变1例及马兜铃酸肾病1例.SRL首剂负荷剂量为4～6 mg,维持剂量为1～2 mg/d,血SRL浓度维持在4～8 μg/L.使用SRL当天,CNI的用量减少一半,并在达到血SRL目标浓度的2～4周内逐渐撤除.转换后对患者随访了3～46个月,动态观察血常规、血肌酐、血糖、血脂及尿蛋白等指标,观察不良反应及监测急性排斥反应、移植肾功能丧失和肺部感染等并发症的发生.结果 转换治疗后.17例CAN患者中12例肾功能明显好转,血肌酐水平由转换前的(195.8±40.0)μmol/L降至(159.1±37.5)μmol/L(P<0.05);10例肿瘤患者中7例存活良好,2例发生肿瘤远处转移,1例死亡,血肌酐水平由转换前的(102.8±28.0)μmol/L降至转换后3个月的(77.8±25.6)μmol/L(P<0.05);2例TRAS球囊扩张术后患者肾功能恢复正常,TRAS未再发生;3例糖尿病患者血糖水平有所改善;2例CNI肝毒性者转换后肝功能恢复正常;2例HCV感染者肝功能稳定,病毒RNA拷贝水平下降;1例面容改变者症状明显好转;1例马兜铃酸肾病者未发生肿瘤.转换治疗后,所有患者均未发生急性排斥反应,不良反应主要为高脂血症3例、蛋白尿3例及白细胞减少1例.结论 肾移植术后采用CNI者发生CAN等远期并发症时,将CNI转换为西罗莫司治疗是安全,有效的.     

国产与进口西罗莫司洗脱支架置入后血管内超声随访的对比

目的 利用血管内超声对比观察国产与进口西罗莫司洗脱支架对冠心病患者支架术后新生内膜增生的抑制作用.方法 2003年5月至2007年3月,对215例冠心病患者(317处病变)置入西罗莫司洗脱支架,并在术后1年行冠状动脉造影和血管内超声(IVUS)检查.其中Firebird组108例患者(147处病变)置入国产西罗莫司洗脱支架(Firebird支架),Cypher组107例患者(138处病变)置入进121西罗莫司洗脱支架(Cypher支架).结果 两组患者一般临床情况差异无统计学意义.两组靶病变部位、病变长度、狭窄程度及病变类型差异均无统计学意义,但Firebird组术后最小管腔直径大于Cypher组[(2.88±0.43)mm比(2.78±0.33)mm,P＜0.05].随访定量冠状动脉造影分析显示,Firebird组与Cypher组支架内晚期管腔丢失[(0.17±0.29)mm比(0.16±0.27)mm,P＞0.05]和节段内晚期管腔丢失[(0.18±0.36)mm比(0.20±0.32)mm,P＞0.05]差异均无统计学意义.IVUS分析显示,与Cypher组比较,尽管Firebird组支架面积[(6.99±2.25)mm~2比(6.46±1.71)mm~2,P＜0.05]、管腔面积[(6.89±2.30)nm~2比(6.36±1.73)mm~2,P＜0.05]、支架体积[(162.5±68.9)mm~3比(140.8±57.9)mm~3,P＜0.01]、管腔体积[(160.4±69.5)mm~3比(138.6±57.6)mm~3,P＜0.01]及最小支架面积[(5.40±1.85)mm~2比(4.92±1.43)mm~2,P＜0.05]均较大,但两组的内膜增生容积[(2.09±5.46)mm~3比(2.23±6.50)mm~3,P＞0.05]和内膜增生容积百分数[(1.68±5.84)%比(1.59±4.10)%,P＞0.05]差异均无统计学意义.结论 Firebird支架置人后再狭窄的发生率较低,抑制内膜增生作用与Cypher支架相似.     

他克莫司和雷帕霉素对肝癌肝移植患者Foxp3~+ Treg产生的影响

目的探讨他克莫司和雷帕霉素对肝癌肝移植患者Foxp3+Treg产生的影响。方法挑选符合Milan标准肝癌肝移植患者,按随机数法分为Rapa组和Tac组,每组20例,第2～12月间每月抽取外周血应用流式细胞术(FCM)检测Foxp3+T细胞及研究中间进行一次肝穿刺活检证实排斥反应。结果 FCM检测外周血Foxp3+T细胞阳性率比较雷帕霉素组明显高于他克莫司组,移植肝穿刺活检亦证实雷帕霉素组排斥反应较他克莫司组并未增加。结论雷帕霉素在肝癌肝移植中排斥反应较他克莫司并未增加,甚至有更好的免疫耐受结果。     

Paclitaxel/sirolimus combination coated drug-eluting stent: in vitro and in vivo drug release studies

Paclitaxel and sirolimus are the two major drugs for the treatment of coronary arterial disease in current drug-eluting stents. The two drugs can effectively inhibit the in-stent restenosis through their independent pathways and show synergistic effect in preventing tumor tissue growth. We hypothesize that the combination of the two drugs in a drug-eluting stent (DES) can also effectively suppress the neointima growth in the stented artery. The present work was focused on the investigation of paclitaxel/sirolimus combination release profiles from a novel biodegradable polymer (poly (D, L-lactide-co-glycolide)/amorphous calcium phosphate, PLGA/ACP) coated stent both in vitro and in vivo. For the in vitro, the drug releasing profiles were characterized by measuring the drug concentration in a drug release medium (Dulbecco's phosphate buffered saline, DPBS, pH 7.4) at predetermined time points. For the in vivo, a rat aorta stenting model was employed. The results showed that both paclitaxel and sirolimus had a two-phase release profile both in vitro and in vivo, which is similar to the drug release profile of their individual coated DESs, and there is no evident of interference between two drugs. The data suggest that paclitaxel and sirolimus can be combined pharmacokinetically in a DES for the treatment of coronary arterial diseases.     

人工神经网络模型在肾移植患者西罗莫司个体化给药中的应用

目的:建立人工神经网络用于估算西罗莫司血药浓度的方法。方法:收集56例肾移植患者口服西罗莫司的182份全血浓度数据,采用遗传算法配合动量法优化网络参数,建立人工神经网络,并对测试数据进行处理,验证测试结果。结果:人工神经网络平均预测误差(MPE)与平均绝对误差(MAE)分别为(0.31±1.14)、(0.89±0.77)ng·mL-1,32例/次(88.9%)血药浓度数据绝对预测误差≤2.0ng·mL-1。人工神经网络模型准确性及精密度优于多元线性回归及非线性混合效应模型。结论:人工神经网络模型可用于预测西罗莫司血药浓度,指导个体化给药。