GFP-HPVl8 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体的构建与鉴定

目的 构建人乳头瘤病毒18型早期蛋白2(HPV18 E2)删除突变体N端(TAD)、C端(DBD)与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的真核表达载体,为研究HPV18 E2基因与宫颈癌发生的关系提供实验基础.方法 用PCR扩增HPV18 E2 TAD、DBD基因序列,用EcoRⅠ和BamHⅠ双酶切pEGFP-Cl载体与TAD、DBD基因PCR产物,纯化回收后,用连接酶连接并转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆,并对其进行双酶切和测序鉴定.结果 阳性克隆质粒经双酶切后,琼脂糖凝胶电泳可见4.7 kb、618 bp和243 bp附近的片段.DNA测序结果经与GenBank登录的序列做BLAST分析,显示重组质粒分别含有618 bp与243 bp的目的基因片段,无碱基错配和移码突变,读码框完全正确.结论 成功地构建了GFP-HPV18 E2删除突变体融合蛋白真核表达载体pEGFP-C1/TAD与pEGFP-C1/DBD.     

Correlative Expression of Glutathion S-Transferase-π and Multidrug Resistance Associated Protein in Bladder Transitional Cell Carcinoma

Chemotherapylswidelyappliedlnthetreatmentofsuperficial(instravesicaIinstiIlation)andinvasive(systemicadministration)bladdercancer.However,resistancetochemotherapenticagentsstillremainsacriticalprobIemintherapy,whichkeepsamuchhigherrecurrentrateofbIaddercancerandpreventsthecureofpat1ents.Previous1y,theresearchesonthemechanismsofdrugsres1stanceusuallyconcen-trateonthemembersoftheATP--bindingcassette(ABC)transportersuperfamlly(forinstance,P--gp,MRP,LRP,etc.)['2],butatpresentincreasingevi-d…     

缺血性脑血管病患者血清NO水平变化及其临床意义的研究

目的 :探讨缺血性脑血管疾病患者不同时期血清一氧化氮 (NO)、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)的变化。方法 :检测 2 4例短暂性脑缺血 (TIA)、5 2例脑梗塞、45例脑动脉硬化患者不同时期血清NO、SOD及MDA含量变化并与 2 8例健康人对照分析。结果 :与健康对照组比较 :急性期 :血清NO水平 ,TIA组与脑梗塞组显著升高 (P <0 .0 1) ;脑动脉硬化组显著降低 (P <0 .0 1) ;各患者组SOD活性显著降低 (P <0 .0 1) ;MDA含量显著升高 (P <0 .0 1)。恢复期 :TIA组与脑梗塞组NO水平较急性期明显下降 (P <0 .0 1) ,稍高于正常人但无显著性 ;SOD活性较急性期明显升高 (P <0 .0 1) ,但仍明显低于正常人 (P <0 .0 1) ;MDA含量较急性期明显下降 (P <0 .0 1) ,稍高于正常人 (P <0 .0 1) ;MDA含量较急性期明显下降 (P <0 .0 1) ,稍高于正常人但无显著性。结论 :在缺血性损伤发展过程中 ,NO水平与SOD含量起重要作用 ,它们之间存在相互作用     

脑卒中复发危险因素的探讨及防治

目的：探讨复发性脑卒中的危险因素及其防治。方法：对脑卒中复发组５８例与对照组１９４例在高血压、糖尿病、高血脂、冠心病、饮酒、吸烟及脑卒中家族史等危险因素和初次发病后３年内的复发和预后情况进行对比分析。结果：复发组与对照组的危险因素是一致的（ｐ〉０．０５）,但复发组的后较对照组差（ｐ〈０．０５）。结论：防止脑卒中的复发主要是防治危险因素。     

缺血性脑血管患者血清NO水平变化及其临床意义的研究

目的：探讨缺血性脑血管疾病患者不同时期血清一氧化氮（ＮＯ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、丙二醛（ＭＤＡ）的变化。方法：检测２４例短暂性脑缺血（ＴＩＡ）、５２例脑梗塞、４５例脑动脉硬化患者不同时期血清ＮＯ、ＳＯＤ及ＭＤＡ含量变化并与２８例健康人对照分析。结果：与健康对照组比较：急性期：血清ＮＯ水平,ＴＩＡ组与脑梗塞组显著升高（Ｐ〈０．０１）;脑动脉硬化组显著降低（Ｐ〈０．０１）;各患者组ＳＯＤ活性显著     

大肠腺癌组织MDR1表达与肠系膜淋巴结转移关系的研究

目的　探索大肠腺癌组织多药耐药基因 (MDR1)表达与大肠腺癌分化程度及肠系膜淋巴结转移之间的关系。方法　以光敏生物素标记MDR1cDNA探针 ,链亲和素胶体金为检测系统做原位杂交 (ISH SAG)检测大肠癌MDR1mRNA表达 ,同时用LSAB法对P 糖蛋白进行免疫组织化学检测。结果　大肠腺癌MDR1mRNA表达阳性的肠系膜淋巴结转移率与MDR1表达阴性的肠系膜淋巴结转移率两者有显著性差异 (P <0 0 5) ,大肠癌MDR1表达阳性率与分化程度无显著性差异(P >0 0 5)。结论　MDR1表达高低与大肠腺癌肠系膜淋巴结转移呈正相关 ,MDR1阳性表达与细胞分化程度比较无统计学意义。MDR1表达的检测对判定化疗疗效及预后有一定的意义。     

细胞角蛋白19、20预测膀胱移行细胞癌复发的临床意义

Objective： To investigate the expressions of cytokeratin 19 （CK19） and cytokeratin 20 （CK20） in bladder transitional cell carcinoma （TCC） and their clinical significance. Methods： The expression of CK19 and CK20 was detected in 54 cases of TCC by immunohistochemical methods and image processing techniques. Results： The expression of CK19 and CK20 was significantly stronger in the recurrent group than in the non-recurrent group （P〈0.01, P〈0.001, respectively）. Conclusion： The expression of CK19 and CK20 was obviously related with biological behaviors of TCC, suggesting that CK19 and CK20 could be used to predict the recurrence of TCC.     

TUNEL技术方法的探讨

探讨末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口标记技术（TUNEL）的染色方法,以期提高特异性与敏感性。采用以去势（经手术切除睾丸）后天数不同的大白鼠前列腺,用TUNEL法染色,观察不同时期的细胞凋亡水平,对经典的TUNEL法进行改良,将染色结果与TUNEL经典法和HE染色法进行对比。结果表明采用改良法后,阳性细胞明显增加,而且着色深,凋亡指数明显增高(P<0.01)。     

人体胃癌及癌旁细胞p21^ras的表达与核型,DNA倍体关系的研究

检测２７例胃癌细胞及癌旁异型增殖和癌外正常粘膜３组中ｐ２１＾ｒａｓ表达、细胞枋 态参数和ＤＮＡ倍体分布类型。结果发现,异型增殖细胞中ｐ２１＾ｒａｓ阳性率最高。６种细胞核形态计量参数在３组之间的差异有极显著意义（Ｐ〈０．０１）,且回代正确率高达９１．３８％,这可能对胃癌和异型增殖的诊断具有意义。在２７例胃癌组织中,胃癌细胞ｐ２１＾ｒａｓ表达水平随着ＤＮＡ倍体成倍增加而逐渐下降。而且胃癌细胞ｐ２１＾ｒ     

2型糖尿病合并非酒精性脂肪肝病138例临床分析

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是目前临床上最常见的肝脏疾病之一,已明确为隐源性肝硬化和肝癌的重要前期病变,为肝功能衰竭的可能原因。常与肥胖、2型糖尿病、血脂紊乱同时存在,被视为代谢综合征的肝脏表现。如何防治脂肪肝成为临床医师面临的刻不容缓的重大课题。本研究拟通过分析我院T2DM合并NAFLD患者的临床资料,讨论相关危险因素,为临床防治提供有益的依据。