一个新的胃癌相关抗原

作者用胃癌组织匀浆免疫家兔制得了一个新的胃癌相关抗原的抗血清,对其相应抗原进行了初步的免疫学、免疫化学以及临床病例的研究。该抗原存在于胃癌组织、胃癌病人体液以及胚胎某些器官内,不是CEA和αFP或其他已报导的胃癌相关抗原。临床检测胃癌病人血清的阳性率82.1%(23/28),正常人阳性率0%(0/76),其他肿瘤也有不同程度的阳性率。检测血中该抗原,可作为胃癌辅助诊断或普查的一个指标,对胃癌患者外科手术予后的观察也有一定的价值。     

肺癌患者血清及其癌组织中铁蛋白的研究

铁蛋白是体内铁的储存形式,一般情况下血清铁蛋白(SF)含量反映体内铁的储备量。但在一些恶性病变,如肺癌、肝癌、乳腺癌等疾患时,常见SF明显升高而不伴随铁储备增加,虽然此时SF升高的原因尚未完全揭晓,但SF含量与肿瘤诊断及预后的关系引起诸多学者的兴趣,近十多年来多有报道,唯结果不一,诊断价值尚在争议之中。一、对象与方法本文用酶联免疫吸附法分别对53例肺癌病人(男41冽,女12例,年龄32～70岁),14例肺部良性疾患者作了血清SF测定,并以22例健康男性(25～40岁)作正常对照,来研究SF对肺癌的诊断价值。又以双夹心法对部分病例作了癌组织中铁蛋白的免疫定位,以期探讨肺癌患者SF升高与癌组织合     

血管生成抑素的原核表达及多克隆抗体的制备

目的:在原核系统中表达并纯化人血管生成抑素（angiostatin）,制备鼠抗人血管生成抑素多克隆抗体。方法:设计引物扩增angiostatin的cDNA,然后亚克隆入原核表达载体pQE,并转化入大肠杆菌BL21中诱导表达并纯化,再用纯化的人血管生成抑素免疫小鼠并制备多抗。结果:通过重组质粒酶切和测序分析等方法,筛选出重组阳性克隆,转化入大肠杆菌BL21中诱导表达并纯化成功,再利用纯化的人血管生成抑素制备成功鼠抗人血管生成抑素多克隆抗体。结论:表达产物及多克隆抗体为下阶段深入研究提供了重要的实验材料。     

含野生型p53cDNA重组逆转录病毒的制备

目的：制备野生型p53cDNA重组体的复制缺陷型逆转录病毒。方法：设计引物PCR扩增野生型p53cDNA，用T－A克隆的方法克隆入质粒载体pGEM-T,转化JM109，提取pGEM-T/p53重组体，双酶切得到野生型p53cDNA,然后再克隆人逆转录病毒表达载体pLXSN,转化感受态大肠杆菌 JM109，筛选pL(p53cDNA)SN重组体，脂质体法转染包装细胞AM12，G－418（geneticin)筛选，收集病毒液。结果：通过PCR和重组质粒酶切筛选出重组阳性克隆，收集含pL(p53cDNA)SN重组体的逆转录病毒。结论：含pL(p53cDNA)SN重组体的复制缺陷逆转录病毒可用于转染真核细胞等进一步研究。     

野生型p53cDNA真核表达载体的构建

ｐ５３基因是癌症研究和肿瘤基因治疗中最引人注目的抑癌基因之一，据报道，大约一半左右癌症的起因是由于ｐ５３基因突变。在所有的抑癌基因中，ｐ５３基因是突变率极高的一种，它的失活会阻止细胞进入凋亡，从而使之处于持续分裂状态而增加突变及恶性转化的概率［１］。因此，研究野生型ｐ５３基因在肿瘤的基因治疗中有普遍性意义。１材料和方法１．１材料ｐＧＥＭ－Ｔ载体（Ｐｒｏｍｅｇｅ公司）；真核表达载体ｐｃＤＮＡ３．１（本室保存）；野生型ｐ５３ｃＤＮＡ由南京军事医学研究所朱敏生教授惠赠；限制性内切酶、ＴａｑＤＮＡ聚合酶…     

血管生成抑素的原核表达及纯化

目的：构建血管生成抑素（angiostatin)的原核表达载体。并转入大肠杆菌BL21中诱导表达并纯化。方法：设计引物扩增angiostatin的cDNA,然后亚克隆入原核表达载体pET32a,并转化入大肠杆菌BL21中诱导表达。结果：通过重组质粒酶切和测序分析等方法,筛选出重组阳性克隆,转化入大肠杆菌BL21中诱导表达,并纯化成功。结论：通过构建的原核表达。获得了纯化的angiostatin蛋白。     

日本血吸虫中国大陆株安徽品系基因组文库的构建

以日本血吸虫中国大陆株安徽品系为材料，采用酚－氯仿抽提，纯化基因组ＤＮＡ。经ＢａｍＨＩ酶切后，与质粒ＰＵＣ＾１８重组，转化入大肠杆菌ＪＭ１０３，转化率为１０＾４。并对重组质粒ＤＮＡ进行酶切鉴定。     

高HDL-C个体CETP基因15外显子错义突变(442D∶G)的检测及临床意义

目的证实胆固醇酯转移蛋白(CETP)基因15外显子错义突变(442D∶G)是导致高α脂蛋白血症的重要因素之一.方法建立检测CETP基因15外显子错义突变(442D∶G)的聚合酶链反应-限制性内切酶酶切片断长度多态性分析(PCR-RFLP)方法,检测50例高α脂蛋白血症(HDL-C≥1.7 mmol/L)个体CETP基因15外显子442D∶G错义突变的阳性率.结果 50例高α脂蛋白血症患者中,发现杂合子15例,纯合子1例;对照组70例,仅1例杂合子,差异有显著性(u<0.05).结论 CETP基因15外显子错义突变是导致高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的重要因素之一.     

大鼠肥大细胞组胺释放试验及方法学的探讨

从卵清蛋白免疫的SD大鼠胸腹腔中采集的肥大细胞,当以相同的变应原触发时引起肥大细胞释放组胺。用改良的荧光法测定组胺量,计算肥大细胞组胺释放率,实验结果表明,卵清蛋白免疫大鼠第3周肥大细胞组胺释放率达到高峰,在一定范围内,组胺释放率随变应原浓度增加而升高。绵羊抗大鼠IgE抗血清对正常大鼠肥大细胞亦有触发作用。这一试验可用于速发型过敏反应和抗过敏药物的研究。