下呼吸道感染不动杆菌属耐药性的变迁及耐药机制研究

目的:了解近3年来本院下呼吸道感染不动杆菌属耐药性的变迁,并研究其对碳青霉烯类抗生素耐药的分子机制.方法:临床标本经API系统鉴定,采用国际标准琼脂二倍稀释法进行药敏检测.药敏标准参考2004年NCCLS标准判断折点.用纸片协同试验检测金属酶表型并对碳青霉烯酶基因型别如IMP、VIM、OXA-23、OXA-24进行PCR扩增.结果:不动杆菌属具有多重耐药性.对亚胺培南最敏感(86.3%),对阿米卡星(72.5%)、头孢哌酮/舒巴坦(72.5%)较敏感.检测到OXA-23型碳青霉烯酶,未发现金属酶.结论:本组资料对本院下呼吸道不动杆菌属感染的治疗和抗菌药物的选择有参考价值.产OXA-23型碳青霉烯酶是我院不动杆菌属对碳青霉烯类抗生素耐药的重要原因.     

流感嗜血杆菌在小儿呼吸道感染中的特点

目的：研究流感嗜血杆菌在小儿乎吸道感染中的特点。方法：对228例乎吸道感染患儿进行咽拭子接种培养，分离流感嗜血杆菌，检测β-内酰胺酶，进行药物敏感试验。结果：发现致病菌84株，其中流感嗜血杆菌57株，占阳性分离率的68％，b型流感嗜血杆菌4株，占流感嗜血杆菌的7．0％。流感嗜血杆菌对氨苄西林及阿奇霉素的敏感率分别为90％、86％，对阿莫西林-克拉维酸、头孢克洛、头孢呋辛、头孢噻肟、头孢曲松、头孢他啶、亚胺培南-西司他丁、氧氟沙星及左氧氟沙星高度敏感。β—内酰胺酶阳性率为11％(6／57)，此部分菌株对氨苄西林耐药。结论：流感嗜血杆菌为小儿乎吸道细菌感染的主要病原体，其产酶率不高，对常用的含耐酶基因的青霉素类及第二、三代头孢菌素敏感。     

多重聚合酶链反应检测超广谱β内酰胺酶方法的研究

目的 建立超广谱β内酰胺酶(ESBLs)多重聚合酶链反应(multiplex PCR)的检测方法并对其进行应用评价。方法 通过排序比较选择TEM、SHV和CTX—M型基因编码区保守序列设计型特异性通用引物，建立多重PCR体系，对产ESBLs标准株及54个疑产ESBLs临床分离株进行ESBLs的检测，并通过PCR产物克隆测序及美国临床实验室标准化委员会表型确认试验的平行检测，对该法进行应用评价。结果 多重PCR法对纸片法阳性株及阴性株ESBLs检出率分别为94．3％(33／35)和26．3％(5／19)；测序结果证实了该法的特异性，且敏感性较高。84．2％(32／38)ESBLs基因型为CTX—M型，15．8％(6／38)为SHV型。结论 该法的建立为临床检测ESBLs及其分子流行病学研究提供了一种特异和敏感的工具。     

CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶基因的定点突变研究

目的 研究产CTX-M-14型超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)功能性基因片段的结构特征。方法 质粒电转移及质粒谱分析以定位CTX-M-14型基因；耐药质粒酶切基因文库(鸟枪法)技术及其计算机辅助在线分析以了解此酶功能性基因片段的分子结构特征；对。Ash-104→Glu、Gly-232→Ala、Set-237→Ala和Asp-240→Glu进行定点突变研究。结果 CTX-M-14基因定位在85kb可转移多重耐药的质粒上；采用鸟枪法克隆到1．8kb、2．4kb、3．1kb产CTX-M-14的功能性基因片段，序列分析显示其定位在耐药质粒上转座子基因结构中；Asn-104→Glu突变可显著降低CTX-M-14型ESBLs对头孢噻肟的水解能力。结论 CTX-M-14基因定位在耐药质粒上转座子基因结构中；Asn-104可能是CTX-M型ESBLs重要的活性位点。     

头孢硫脒体外抗菌活性测定

我们测定了头孢硫脒(仙力素)的体外抗菌活性,并与头孢唑林、头孢呋辛钠、头孢他啶体外抗菌活性进行了对比.结果表明,头孢硫脒对肺炎球菌、化脓性链球菌、MSSA、MSSE和卡他莫拉菌有较强的抗菌活性,优于头孢唑林、头孢呋辛钠和头孢他啶,对流感嗜血杆菌的抗菌作用,与头孢呋辛钠,头孢他啶体外抗菌活性相近,优于头孢唑林.头孢硫脒对肠球菌的体外抗菌活性稍差于万古霉素.头孢硫脒对MRS、MRSE亦有一定的抗菌活性,但明显高于万古霉素对MRSA和MRSE的MIC90值.体外杀菌活性测定结果表明头孢硫脒对检测的细菌的MBC值只高于MIC值1到2个浓度,提示头孢硫脒有较好的杀菌活性.     

内毒素在大肠杆菌和白色念珠菌混合感染小鼠中的作用

【目的】探讨内毒素对大肠杆菌和白色念珠菌混合感染病情的影响。【方法】建立小鼠大肠杆菌、白色念珠菌单独及混合感染模型 ,对比大肠杆菌内毒素代替大肠杆菌 ,多粘菌素B拮抗内毒素活性 ,观察各组小鼠生存期、血浆内毒素水平及肺组织中的菌落数。【结果】大肠杆菌或大肠杆菌内毒素和白色念珠菌同时感染组 ,小鼠生存期明显短于各自单独感染组(P <0 0 5 ) ;大肠杆菌和白色念珠菌同时感染组 2 4h后 ,血浆内毒素水平高于大肠杆菌单独感染组 (P <0 0 1) ;大肠杆菌和白色念珠菌同时感染组 2 4h和 4 8h后 ,白色念珠菌和大肠杆菌菌落数高于各自单独感染组 (P <0 0 5 ) ;内毒素和白色念珠菌同时感染组 2 4h和 4 8h后 ,白色念珠菌菌落数高于白色念珠菌单独感染组 (P <0 0 5 )。【结论】内毒素可造成大肠杆菌和白色念珠菌混合感染加重 ,缩短生存期     

难治性性病性慢性前列腺炎的病原学检测—附76例报告

性病性慢性前列腺炎临床上较常见，疗效又往往欠佳，不少患者虽应用过多种抗生素治疗，但临床症状仍持续存在。为进一步探讨其病因，我们对76例难治性性病性慢性前列腺炎患者的前列腺按摩液（前列腺液）进行病原学检测，现将结果报告如下。     

用浓度梯度法比较6种β-内酰胺类药物体外抗菌活性

采用浓度梯度法(Etest)检测6种β-内酰胺类抗菌药物对100株临床分离菌的最低抑菌浓度(MIC),比较其体外抗菌活性.报告如下: 1 材料     

产质粒介导AmpC酶细菌的耐药性及分子流行病学研究

目的：了解产质粒介导AmpCβ内酰胺酶革兰阴性菌耐药性及分子流行病学情况。方法：收集40株产质粒介导AmpC酶革兰阴性菌，Kirby-Bauer纸片扩散法检测耐药性；肠杆菌科基因组内重复-致序列-聚合酶链反应(ERIC-PCR)进行克隆株的DNA分型，确定同源性。结果：40株产质粒AmpC酶菌株对第一代头孢菌素类、头霉素类明显耐药，对第三代头孢菌素、单环菌素、氟喹诺酮类和氨基糖苷类均有不同程度的耐药，对第四代头孢菌素及碳青霉烯类均较敏感。大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌各17株，ERIC-PCR图谱可以分为28个不同克隆。结论：40株产质粒介导AmpC酶的革兰阴性菌呈多克隆模式，第四代头孢菌素和碳青霉烯类药物可作为治疗产质粒介导的AmpC酶细菌感染的有效药物。     

产质粒介导AmpC酶和ESBLs细菌的耐药性及β-内酰胺酶基因型研究

目的　了解我院同时产质粒介导AmpC酶和超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌的耐药性及其 β 内酰胺酶的基因型特征。方法　 110株临床分离无重复肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌耐药株 ,采用酶提取物三维实验检测AmpC酶 ,美国临床实验室标准委员会 (NCCLS)表型筛选和确认实验检测ESBLs ;琼脂二倍稀释法测定抗生素对同时产AmpC酶和ESBLs菌株的最低抑菌浓度 (MICs) ;等电聚焦实验测定 β 内酰胺酶等电点 (pIs) ;质粒接合实验定位耐药基因 ;PCR通用引物扩增AmpC酶与ESBLs基因及其序列测定以确定其基因亚型。结果　同时产AmpC酶和ESBLs菌株在肺炎克雷伯菌与大肠埃希菌中的检出率分别为 7.7% (5 6 5 )、8.9% (4 4 5 )。该类产酶菌株产 2～ 3种pI5 .4～ 9.0 β 内酰胺酶 ,对第三代头孢菌素、氨曲南、头孢美唑和含酶抑制剂复合制剂的敏感性极低 ,但对亚胺培南均敏感。 9株质粒中均检出AmpC酶基因DHA 1亚型 ,其中 1株同时检出ACT 1亚型 ;ESBLs基因亚型分别为CTX M 14、CTX M 3、CTX M 9,各有 4、3、2株 ;有 3株还携带广谱酶TEM 1基因。结论　我院存在同时产质粒介导DHA 1、ACT 1型AmpC酶和CTX M型ESBLs肺炎克雷伯菌、大肠埃希菌流行株 ,药敏检测结果显示对大多数新型广谱 β 内酰胺类抗生