不同条件下连作杭白菊内生菌群的T-RFLP分析

通过研究轮作以及有机肥处理对连作杭白菊各器官内生细菌多样性和优势菌属的影响, 揭示轮作和有机肥在缓解杭白菊连作障碍中的作用, 筛选能够增强连作白菊抗病能力的有益内生菌。实验共设4个处理组, 分别为连作处理、轮作处理、连作后施自制蚕沙发酵有机肥处理以及连作后施市售菌肥处理, 通过基于16S rDNA的末端标记限制性片段长度多态性技术(terminal restriction fragment length polymorphism, T-RFLP)分析这些处理对杭白菊各器官内生细菌多样性及优势菌属的影响。结果显示, HaeⅢ内切酶能产生更多的TRFs数, 比HinfI酶更适合用来分析杭白菊内生菌多样性。有机肥和菌肥处理组的内生菌Simpson指数与轮作组相近, 均高于连作, 说明土壤外源微生物的添加导致植物内生菌多样性提高。实验共筛选出18种优势菌属, 包括3种厚壁菌、4种放线菌和11种变形菌, 其中节杆菌属、链霉菌属、黄杆菌属和分支杆菌属等优势菌属均在轮作组和菌肥组中检测到, 而连作组中缺乏, 说明添加外源微生物与轮作处理对杭白菊的内生菌群的影响基本类似, 同时也说明这些菌的增加可能会通过影响连作白术的生长来缓解连作障碍。此外, 比较不同器官中的内生菌的多样性及优势菌数量发现, 根中最高, 茎次之, 叶中最少, 这与内生菌侵入植株方式有关。总之, 连作导致杭白菊内生细菌多样性降低, 而轮作和菌肥处理后均能通过增加土壤微生物的多样性水平从而使连作杭白菊内生细菌多样性提高, 最终达到缓解白菊连作障碍的目的。     

人参皂甙抑制肿瘤坏死因子α介导的内皮细胞炎症反应

目的 探讨人参皂甙Rb1能否抑制人脐静脉内皮细胞中肿瘤坏死因子α引起的细胞炎症反应的发生.方法 将细胞分成四组:对照组(不经任何药物处理)、肿瘤坏死因子α组、人参皂甙Rb1组和肿瘤坏死因子α加人参皂甙Rb1组,分别培养16 h.提取各组细胞mRNA,用实时荧光定量PCR和流式细胞仪测定血管细胞黏附分子1的表达水平;用标记上Calcein-AM的人单核细胞检测人脐静脉内皮细胞单分子层的黏附性;用超氧化物阴离子荧光探针DHE在流式细胞仪上测定超氧阴离子产物,并用荧光探针JC-1检测线粒体膜电位变化.结果 人参皂甙Rb1预处理能有效阻止肿瘤坏死因子α诱导的血管细胞黏附分子1 mRNA增高,并减弱由其导致的单核细胞对人脐静脉内皮细胞的黏附性增加.人参皂甙Rb1还能减少肿瘤坏死因子α诱导的超氧阴离子产物增加,并抑制由其引起的线粒体膜电位衰减.结论 人参皂甙Rb1对炎症及心血管疾病有潜在的治疗作用.     

浙贝母生长过程中生物碱的累积动态及其与根际微环境的相关性分析

[目的]探索土壤微环境对浙贝母生长和品质的影响。[方法]检测浙贝母在苗期、花期和收获期生物碱含量、土壤理化性质以及根际微生物的动态变化,并分析浙贝母根际微生物多样性、土壤理化性质与生物碱合成的相关性。[结果]浙贝母生长期的土壤氢离子浓度指数(hydrogen ion concentration,pH)和有机质含量呈先降后升的趋势,而脲酶和磷酸酶活性则先升后降,但整体呈下降趋势。根际土壤性质均表现出产区差异及种源差异,且产区之间的差异性远大于种源内差异,表明产区环境对浙贝母的生长会产生直接的影响。同时,根际细菌多样性随着浙贝母生长而下降,真菌多样性则先降后升。此外,浙贝母生物碱含量在生长早期含量最高,随着鳞茎的长大其含量随之下降。测序结果表明,浙贝母根际土壤中的细菌主要由变形菌、酸杆菌、放线菌、厚壁菌、拟杆菌以及绿弯菌等门类组成,而真菌则主要由子囊菌、毛霉、壶菌以及担子菌等门类组成。在排名前20的优势属中,Nitrosomonadaceae-uncultured、Gemmatimonadaceae-uncultured及Methylocystaceae-uncultured属随着浙贝母的生长,其变化趋势与生物碱含量的变化趋势相同。相关性分析表明,总生物碱含量与细菌Shannon指数相关(r=0.96,P0.01),但和真菌Shannon指数无相关关系(r=0.17,P0.05)。[结论]浙贝母的生长与土壤因子、根际微生物之间的关系密切,三者相互影响、相互作用,细菌的种类及多样性与浙贝母生物碱的累积密切相关,不容忽视。     

桂枝茯苓胶囊对体外人宫颈癌Hela细胞抑制作用及机理研究

目的：研究桂枝茯苓胶囊对体外培养人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用和作用机理的初步研究。方法：MTT比色法观察桂枝茯苓胶囊对人宫颈癌Hela细胞增殖的抑制作用;免疫组化检测Fas、Fas –L、Bcl-2基因的表达;western-blot和RT-PCR检测对人宫颈癌Hela细胞Caspase-3蛋白和Caspase-3 MRNA的表达影响;DNA-Ladder检测凋亡条带。结果：桂枝茯苓胶囊对人宫颈癌Hela细胞有明显的抑制作用（P〈0.01）;桂枝茯苓胶囊能促进Fas、Fas –L表达,抑制Bcl-2的表达;能增加Hela细胞Capase-3的蛋白表达;琼脂糖凝胶电泳中呈现典型的“阶梯状”图谱。结论：桂枝茯苓胶囊有体外抗肿瘤作用,其机制可能是通过促进Fas、Fas –L表达、抑制bcl-2的表达;增加Capase-3的表达实现的。     

干旱胁迫下不同家系马尾松部分生理活动的变化

探讨了土壤干旱胁迫下,不同家系马尾松部分生理活动的变化。结果表明,马尾松苗木暗呼吸速率随叶水势的下降而下降,但家系不同,其下降的幅度不同。同时,光合利用效率随叶水势、土壤水势的下降总体呈上升趋势,说明马尾松具有较高的耐旱生产潜力。此外,各家系随土壤干旱胁迫的加剧,质膜相对透性加大,膜受伤害的程度也加大,其质膜相对透性与叶水势呈线性显著相关。     

浅谈临床护理工作中沟通技巧的应用

分析沟通原则,探讨影响护患沟通交流的因素，提出在临床护理工作应用沟通技巧的建议。