套种对浙贝母根际土壤细菌群落结构和功能基因的影响

[目的]通过研究套种对浙贝母根际土壤细菌结构及功能基因的作用,探讨其改善浙贝母连作障碍的微生态机制。[方法]采用田间试验,将浙贝母与不同作物套种,利用Miseq测序及基于16S rRNA扩增子测序结果预测微生物群落(Phylogenetic Investigationof Communities by Reconstruction of Unobserved States,PICRUSt)功能分析解析浙贝母根际细菌群落结构及功能基因结构的组成差异。[结果]浙贝母与其他作物套种后,根际细菌的结构和多样性发生了明显改变。与单种浙贝相比,套种提高了根际细菌的多样性,其中浮霉菌门、酸杆菌门、放线菌门相对丰度显著上升。在属水平上,酸杆菌门的GP1属、GP2属、浮霉菌门的副球菌属以及放线菌门的放线菌属相对丰度明显升高,且生姜套种组中GP1属、GP2属以及副球菌属均为最高水平。细菌功能差异分析表明,套种提高了细胞壁/膜内源物质合成、次级代谢产物合成/转运/代谢、无机离子转运代谢以及防御机制4个方面功能基因丰度,而生姜套种组中这4个方面功能基因丰度最高。[结论]套种通过提高浙贝根际土壤细菌多样性,增加了生长促进细菌以及生防菌的含量,提高了浙贝产量以及药效成分含量。从微生态角度来说,浙贝母与生姜套种是最有利的方式。     

基于Miseq测序技术分析不同元胡产区土壤细菌功能基因组成与差异

[目的]分析元胡道地产区和非道地产区根际土壤细菌功能基因的组成和差异,在基因层面上探究根际土壤细菌对元胡生长的影响。[方法]将同一种源的元胡分种在不同产区,在收获期采集其根际土,Miseq测序检测元胡根际微生物及功能基因组成,与COG以及KEGG数据库进行比对。[结果]陕西非道地产区和浙江道地产区根际细菌组成种类相似,组成丰度在优势菌中差异明显:门水平上酸杆菌门、厚壁菌门浙江组较高,变形菌门、拟杆菌门浙江组较低;属水平上酸杆菌属Gp1浙江组较高,鞘氨醇单胞菌属、疣微菌某属浙江组较低。根际细菌功能基因经COG及KEGG数据库分析,分别被注释到24个功能分类和41个信号通路中,基于COG数据库的24个功能分类差异分析发现,陕西非道地产区和浙江道地产区的元胡根际细菌功能基因在RNA加工和修饰、染色质结构和动力学、糖类运输和代谢等15个分类中均存在差异;基于KEGG数据库的41个信号通路差异分析发现,陕西非道地产区和浙江道地产区的元胡根际细菌功能基因在糖代谢、氨基酸代谢、细胞生长等21个通路中存在差异。基于功能的聚类分析、主成分分析及NMDS分析显示道地和非道地产区元胡根际细菌土壤功能基因组成呈现明显地域差异,陕西三组聚为一类,浙江三组聚为一类。[结论]元胡土壤细菌功能基因组成在道地和非道地产区间差异较大,功能基因组成与元胡生长密切相关,与药材道地性的产生也可能具有相关性。     

高通量测序揭示杭白芍根际真菌群落年际变化

[目的]通过研究杭白芍根际真菌群落年际变化探讨真菌对杭白芍生长的影响。[方法]采用田间实验,收集不同种植年份的白芍根际土壤及非根际土,提取宏基因组DNA,利用真菌引物进行PCR,再利用454焦磷酸测序检测1~4年生杭白芍的根际土真菌多样性和组成。[结果]测序结果表明,杭白芍根际真菌多样性Shannon指数由高到低依次为:2年生3年生4年生1年生。虽然1年生的最低,但多样性并不是逐年递增。无论种植年限如何,杭白芍根际的真菌均由子囊菌、毛霉、担子菌、球囊菌、壶菌、梳霉以及捕虫霉等真菌组成,其中子囊菌占绝对优势,其相对丰度均在71.4%以上,说明子囊菌与白芍的生长关系密切。比较后发现,尽管种植年限不同,但其优势真菌的种类在门、纲、目、科、属等层次都差别不大,说明种植年限对杭白芍根际的影响不大。比较根际与非根际土的差异,说明杭白芍的根际真菌组成主要由物种和土壤因子共同决定,与种植年限无关。[结论]杭白芍根际真菌群落的年际变化不受种植年限影响,其真菌的种类组成主要由杭白芍与土壤因子共同决定。     

浙贝母中内生菌的多样性及组成分析

[目的]研究浙贝母器官内生菌群,以期探明浙贝母道地性的形成机制,为开发其潜在的内生菌资源提供理论依据.[方法]本实验用PCR-变性凝胶梯度电泳（DGGE）对浙贝母的根、鳞茎、地上茎以及叶中的内生菌多样性和组成进行了检测和分析.[结果] DGGE结果表明,浙贝母不同器官中的内生菌多样性和结构均有差异.根部条带明显比其它器官多,内生细菌多样性指数最高（2.69）,而且出现不少特异性条带;茎中的细菌多样性为2.44;叶中最低,仅2.21.测序结果表明,浙贝母中的内生细菌主要为蓝细菌、根瘤菌、睾丸酮假单胞菌、伯克氏菌属和燕麦噬酸菌,后两种菌均为β-变形菌,该菌的存在可能会对浙贝母的生长产生不利影响,而根瘤菌和丛毛单胞菌则对其生长有利.根部特异性细菌包括蓝细菌（B4）、伯克氏菌属（B23）、根瘤菌（B5、B24）以及3种不可培养细菌（B6-B8）.与细菌相比,内生真菌DGGE图谱在不同器官之间的差异更小,大部分为共有条带,只是亮度有差异.当然也有特异条带,如曲霉属（F10）仅在鳞茎中出现.镰孢菌属（F11）以及2种不可培养的真菌（F5、F6）为根部特有.与细菌不同,地上茎中的真菌Shannon指数最高（2 82）,其次是鳞茎和根,叶最低2.53.利用DGGE检测到浙贝母的内生真菌主要为侧齿霉、镰孢霉和曲霉,而利用传统方法还分离到交链孢霉、青霉、拟茎点霉、葡萄孢、卵形孢霉、枝链孢霉、毛壳菌、丝核菌以及束丝菌等属,说明对浙贝母而言,传统方法更适合.[结论]浙贝母不同器官中内生细菌和真菌的多样性及组成均存在差异,但地下鳞茎和地上茎差异较小;真菌的器官差异不如细菌明显.浙贝母内生菌的分布跟其它植物明显不同,其菌群组成主要取决于浙贝母宿主植物本身.不同的内生菌占据不同生态位,执行不同功能,有的对促进浙贝母的生长,而有的则影响生?     

蚕沙发酵有机肥对连作杭白菊根际细菌群落的影响

[目的]在杭白菊连作3年的土壤上采用小区实验方法施用蚕沙发酵有机肥,探讨施用蚕沙发酵有机肥对连作杭白菊根际土壤细菌群落的影响。[方法]田间实验设置3个处理组,依次为轮作组(杭白菊与玉米进行轮作),连作组(杭白菊连作3年),施肥组(在杭白菊连作田,第3年种植初期每株施用蚕沙发酵有机肥15 g)。在收获期进行采样,用HaeⅢ、HinfⅠ分别进行酶切后,采用末端限制性片段长度多样性(T-RFLP)检测。[结果]连作组、轮作组和施肥组的HaeⅢ酶切后Shannon指数分别为:3.08、3.24、3.24,HinfⅠ酶切后Shannon指数分别为3.31、3.60、3.57,可见连作组的细菌多样性明显低于轮作组和施肥组,说明连作使杭白菊根际细菌生物多样性下降,而轮作和施肥则可显著提高根际细菌多样性水平。对优势菌属进行比对分析发现,不同处理组间有较大的差异。连作组的9种优势菌属中梭酸属(Clostridium)、植原体属(Phytoplasma)、黄单胞菌属(Xanthomonas)为致病菌属;施肥组的8种优势菌属中梭酸属和黄单胞菌属为致病菌属,另6种为有益菌;轮作组的8种优势属中仅有梭酸属为致病属,其余7种均为有益菌。由此推测,施肥和轮作处理均会改变根际细菌群落结构,主要体现在减少致病菌的伤害。此外,在施肥组中还发现有被誉为生防菌的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。[结论]施用蚕沙发酵有机肥,能有效提高连作杭白菊的根际土壤细菌多样性水平,降低病原菌优势,促进功能菌和有益菌的生长,通过改善微生态环境缓解连作障碍。     

60Co-γ辐射对元胡品质及根际菌群的作用

[目的] 研究60Co-γ辐射对元胡品质的直接影响及对根际微生态的间接影响。 [方法] 利用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)法和高通量测序检测不同剂量射线辐射对元胡品质的影响和辐射后根际细菌群落结构和多样性的变化。[结果] 随着60Co-γ辐射剂量的增加,元胡的鲜重、干重、粒径及膨大率均明显增加,但其主要药效成分的含量并未显著提升。研究元胡根际土壤的菌群发现,与无辐射组比较,辐射组的生物多样性指数更高,表明辐射会改变元胡根际菌群多样性,其中80 Gy辐射组的细菌多样性最高。从菌群组成来看,各组在细菌的门以及优势属的分类水平上差异无统计学意义(P＞0.05),而一些含量低于4%的非优势菌变化明显,其数量随辐射剂量增加而增加,表明元胡经过射线辐射后,根部菌群可能会发生变化,在根部富集一些新的细菌,从而提高细菌多样性。 [结论] 60Co-γ照射会显著影响元胡的产量和大小,但对药效成分的改变不显著。辐射可能会通过提高根际土壤的非优势菌水平,甚至富集一些新的细菌来提高根际土壤细菌多样性。综合来看,60～80 Gy是元胡的最佳诱变剂量。     

浙贝鳞茎及根际土中元素含量在不同产区和物候期的差异及相关性分析

[目的]研究浙贝及土壤中无机元素的含量,探讨根际土与浙贝鳞茎中元素的相关性以及元素对浙贝道地性形成的作用,为浙贝的栽培提供科学理论指导。[方法]采用电感耦合等离子体发射光谱仪（ICP-OES）和微波消解仪测定不同产区、种源和物候期的浙贝及土壤中15种无机元素的含量,并进行聚类、吸收系数和相关性分析。[结果]聚类分析结果表明,浙贝土壤和鳞茎中的元素含量特征主要以产区来划分,说明产区外环境对浙贝母元素吸收的影响大于种源和生长物候期等因子。浙贝鳞茎中重金属元素Pb、Cd的变异系数都较大,微量元素的变异程度比常量元素大。浙贝对P、S、Mg的吸收系数均大于100%为富集元素,而B、Fe、Al等元素的吸收系数均在1%以下为高贫富集元素,说明富含P、S、Mg等元素的土壤可能对浙贝生长有利。相关性分析表明,鳞茎中的B元素与土壤中的B呈现极显著正相关,除此之外,鳞茎中的B与还与土壤中的Ca、Fe、K、Mg、Mn、Zn、Cr等呈极显著正相关;而鳞茎中的Cu、Cd等重金属与土壤中的元素大部分呈显著负相关,说明这些元素之间会相互作用,或促进或拮抗,从而影响植物的生长。[结论]产区环境对浙贝母元素特征的影响效果大于种源及物候期的影响,浙贝鳞茎中元素与土壤中的元素关系复杂,其中鳞茎中的B、Cu、Cd与土壤元素关系密切而复杂,在研究和栽培中值得进一步关注。     

根际促生菌研究进展及其在药用植物上的应用

当代根际微生态系统理论认为根际是植物、土壤和微生物相互作用的重要界面,也是物质和能量交换的结点,而根际微生物正是根际微生态系统的重要组成部分。根际微生物区系主要以细菌为主,能够促进植物生长、防治病害、增加作物产量的有益微生物被称为根际促生菌(plant growth-promo-     

不同茬口对当归根际微生物数量和产量的影响

目的 研究当归正茬、迎茬、重茬和三茬4个不同茬口对根际土壤主要微生物类群、产量及麻口病出成率的影响.方法 对不同茬口根际土壤采用稀释平板法进行微生物培养,细菌用牛肉膏蛋白胨琼脂培养基,真菌用马丁氏培养基,放线菌用改良高氏1号培养基.结果 迎茬、重茬和三茬根际土壤中的细菌数量分别比正茬降低了15.76%、30.67%和34.24%,真菌分别比正茬增加了24.73%、119.28%和135.77%,微生物多样性指数分别比正茬降低了47.90%、78.84%和80.63%,当归总产量分别比正茬下降了10.59%、29.52%和57.85%,麻口病出成率分别是正茬的1.37、2.52和4.12倍.结论 随着连作年限增加,土壤可培养微生物总数减少,其中细菌和放线菌数量减少,真菌数量明显增加,对连作表现出较高的敏感性,微生物多样性指数明显减小,当归一等归出成率和总产量明显下降,而三等及等外当归出成率及麻口病出成率显著增加.     

水苏糖对地黄根际土壤微生物失衡的影响

目的通过水苏糖铵盐培养液对土壤细菌生长的影响,证明水苏糖对土壤细菌具有"筛选作用"。方法采用比浊法,在初始菌悬液浓度一致的前提下,每2h于600nm处测定菌悬液的吸光度值并绘制生长曲线,以定量分析水苏糖对土壤细菌生长的影响情况。结果大多数土壤细菌不能很好地利用水苏糖,仅少数土壤细菌在水苏糖培养液中生长良好。结论大多数土壤细菌不能很好地利用水苏糖作为其能源物质,因此可能造成根际细菌的种类和数量大幅下降,仅少数可较好利用水苏糖的土壤细菌活动旺盛,这些能够良好利用水苏糖的土壤细菌有可能作为"优势菌"大量繁殖,从而造成地黄根部土壤微生物失衡。     

麻疹的双相移位研究进展

近年新生儿、婴儿、成人麻疹患者逐年增加,临床表现一般仍较典型,成年人麻疹患者全身中毒症状较重。麻疹抗体检测结果阳性是主要的诊断依据。麻疹发病的双相移位的机理可能是,免疫保护力不足,婴儿出生时麻疹抗体力低。孕期母传胎的麻疹抗体减弱,母经乳汁传给婴儿的抗体减弱,成人麻疹抗体水平逐年下降。预防措施是怀孕前给予育龄妇女麻疹疫苗接种,鼓励母乳喂养,麻疹疫苗计划免疫适当提前,在成人追加麻疹疫苗的免疫,加强病毒变异的研究等。     

87株幽门螺旋杆菌VacA等位基因的分析

目的以研究方法LiPA（Line Probe Assay）分析VacA等位基因的表达,了解幽门螺旋杆菌致病机理的理解。方法从三个不同城市87位进行胃镜检查患者的胃粘膜中培养出幽门螺旋杆菌,提取DNA,用LiPA方法分析VacA等位基因。结果（1）87位患者以sic（88．5％）和m2a（63．2％）分布为主,未发现s1b和s2;（2）混合菌株感染率为41．4％,远远高于西方国家,其中上海的混合感染率最高（62．5％）,与北京（41．0％）和南宁（20．8％）相比具有显著性差异,P〈0．01;（3）北京、海、南京三个不同城市s1、m等位基因亚型分布率存在差异;（4）溃疡病和非溃疡病患者m1和m2的分布率没有显著性差异。结论我国幽门螺旋杆菌多重菌株感染率较高,不同的m基因型与消化性溃疡的发生无显著性相关。     

尿液pH值对红细胞检验影响的探讨

[目的 ]通过尿液 pH值对红细胞检验影响的观察 ,更加科学、准确地诊断血尿和血红蛋白尿。[方法 ]采用干化学分析仪检测和尿液显微镜红细胞计数 ,观察 180例正常人尿标本加入正常人血标本后 ,不同 pH值 ,不同时间内 ,观察红细胞溶解情况。 [结果 ]pH <5 .5以下时 ,随着时间的延长 ,红细胞溶解现象明显。 1h后观察有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;2h后有非常显著性差异 (P <0 .0 1)。[结论 ]pH <5 .5时对红细胞计数影响较大 ,易致红细胞发生溶解现象 ,出现假性血红蛋白尿 ,对血尿和血红蛋白尿很难区分 ,给临床诊断造成不便 ,更易引起漏诊和误诊。     

阴道炎1236例病原检查分析

对１２３６例阴道炎患者的阴道分泌物作直接镜检和病原菌分离培养检查；结果，细菌感染９００例，念珠菌２３４例，滴虫１０２例。９００例细菌经鉴定；葡萄球菌３００例，阴道加特纳菌２７６例，淋病奈瑟菌１７０例，其它细菌１２４例。结果表明，葡萄球菌，阴道加特纳菌，淋病奈瑟菌是细菌性阴道炎最常见的致病菌。     

喉癌主癌灶手术切缘的临床特点分析

目的探讨研究喉癌主癌灶手术的安全切缘在临床上的特点。方法回顾性分析2007年6月—2011年3月已经确诊喉癌的患者100例,随机分成A、B两组,A组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取镜下观察分析;B组为观察组50例,主要采取手术切缘后,然后采取肉眼观察分析,将结果进行临床特点分析比较。结果早期的喉癌患者和晚期的喉癌患者的阳性切缘例数,差异无统计学意义（P〉0.05）;晚期的阳性切缘发生次数高于早期的阳性切缘发生次数,差异有统计学意义（P〈0.05）。声门上区[SG]2、3和5、10mm;跨声门型[TG]2、3mm和5、10mm的切缘对比,差异有统计学意义（P〈0.05）。SG、G、TG、IG的2mm和3mm,5mm和10mm对,差异无统计学意义（P〉0.05）。肉眼阳性切缘观察39个,镜下阳性切缘观察43,两者差异无统计学意义（P〉0.05）。结论依据原发不同部位、不同分期和不同范围选取适合的切线,就可以有效地减少阳性切缘的发生。     

碱量法测定壳多糖脱乙酰度的方法探讨

目的：评价壳多糖脱乙酰度测定的减量法的影响因素。方法：通过实验评价碱量法的精准度及样本含潮量等因素对测定结果的影响,并对汪氏推荐计算公式和本文作者提出的改良公式作出评价。结果：碱量法测定壳多糖脱乙酰度受样本性状、含潮率、反应体系中酸量的影响。改良公式更能反映样本实际脱乙酰度。结论：碱量法简便易行,评价指标在可接受范围,可用于壳多糖研制中的质量评价。     

上颌骨牙源性囊肿刮除手术的疗效观察

目的探讨对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术的临床疗效。方法对我科在2010年1月～2017年9月收治的73例上颌骨牙源性囊肿患者行囊肿彻底刮除手术治疗,对患者术区肿胀消退、术后伤口感染、伤口愈合、牙龈再附着、术后复发、骨质改建、骨质修复等情况随访观察。结果 73例患者术后肿胀消退时间为1～4 d。73例患者术后均未发生伤口感染,伤口均一期愈合。所有患者牙龈再附着情况好,术后均未见复发。术后未见并发症。骨质改建效果好,骨质修复的效果因影像学资料过少,缺乏客观依据,暂不下有效结论。结论对上颌骨牙源性囊肿患者进行囊肿彻底刮除手术,术后患者的恢复情况良好,值得在临床治疗上进行推广。     

儿童腹痛328例病因诊断及分析

目的：根据儿童急性腹痛的特点，诊断儿童腹痛应综合临床及相关检查提供的依据，做出准确诊断，给予适当治疗。方法：对临床328例腹痛患儿进行选择性辅助检查和分析。结果：小儿腹痛病因复杂，腹腔内疾病占64．63％，共17种病因；腹腔外疾病占35．37％，共6种病因。结论：仔细询问病史、认真体格检查、密切观察病情、针对性地选择辅助检查，在儿童腹痛的诊断上具有重要的意义。     

扩张兔皮肤超微结构的变化

目的：动态观察扩张兔皮肤超微结构的变化。方法：选用2--3kg新西兰大白兔64只，分为2大组，快速扩张组和常规扩张组，每组32只，每大组再分为4组，为扩张完成后即时、1周、12周、24周组。每组8只，其中4只为实验组，另4只植入扩张器不扩张作为对照组。透射电子显微镜观察各组皮肤超微结构的变化。结果：表皮扩张后经历--由扩张刺激引起的创伤至完全修复的过程。扩张后即时真皮中成纤维细胞大量增生，功能由静止转向活跃，胶原纤维碎裂成片，弹力纤维部分断裂，炎症细胞浸润；扩张后1周常规扩张组基底膜连续性基本恢复。显示成纤维细胞合成功能活跃。扩张后12周、24周，成纤维细胞趋于稳定、形态狭长，部分胶原排列紊乱，部分有似癜痕样改变。结论：扩张刺激可致兔皮肤创伤。扩张后真皮不可完全修复。     

芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用

目的观察芹黄素对大鼠缺血视网膜功能恢复的作用。方法30只Long-Evans大鼠用动脉结扎法造成视网膜缺血模型,其中治疗组20只腹腔注射芹黄素,对照组10只注射溶媒二甲基亚酚。用视觉电生理仪检查视网膜功能恢复情况。结果芹黄素治疗组视网膜功能恢复明显好于对照组(P<0.05)。结论芹黄素能促进大鼠缺血视网膜的功能恢复。