肝动脉缺血对犬肝细胞损害的实验研究

摘要：目的:探讨肝动脉缺血对犬肝细胞的损害。方法:对２０只犬进行肝动脉阻断，不阻断门静脉，分别于阻断前、阻断后２０，４０，６０min取肝组织进行活检，用常规ＨＥ染色和ＢＣＬ-２免疫组化染色并进行灰度测定。结果:肝动脉阻断２０min，肝细胞已有明显损害，阻断６０min有不可逆性严重损害，ＢＣＬ-２免疫组化灰度测定，阻断前与阻断后各时点差异均有高度显著性（P<0.0001），其中２０min和４０min与６０min之间差异有高度显著性(P<0.001)。结论:肝动脉阻断20min，肝细胞有明显损害，肝动脉阻断60 min，肝细胞有不可逆性损害。     

圈套寡核苷酸影响腹腔巨噬细胞炎症介质表达的实验研究

目的 设计合成靶向核因子—κB(NF—κB)的哑铃形圈套寡核苷酸(0DNs)，并检测其抗炎效应。方法 提取大鼠腹腔巨噬细胞(pMφ)，随机分为正常对照组、单纯内毒素(LPS)组、圈套0DNs处理组、无关圈套0DNs处理组和脂质体处理组。收集正常对照组和单纯LPS组LPS刺激后1，2，6，12，18，24k上清及细胞；采用阳离子脂质体按质量比为4：1的比例分别介导2，4，8mg/L圈套0DNs转染大鼠pMφ细胞，6k后用LPS刺激，收集转染后8，12，18k上清及细胞。细胞免疫组化法分析LPS刺激前后p65表达与分布变化，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测上清中肿瘤坏死因子—α(TNF—α)、白细胞介素—6(IL—6)蛋白表达，逆转录—聚合酶链反应(RT—PCR)法检测TNF—α、IL—6和IL—10mRNA转录。结果 4，8mg/L剂量哑铃形圈套0DNs可明显抑制LPS诱导的大鼠pMφTNF—α、IL—6转录和表达。结论 靶向NF—κB的哑铃形圈套0DNs具有拮抗炎症介质转录和表达的功能。     

胰岛素抵抗综合征辨治初探

胰岛素抵抗综合征 ,又称“X综合征”或“代谢综合征”。其主要表现包括高胰岛素血症、血脂紊乱、高血压、高血糖及超重或肥胖等。目前认为 ,胰岛素抵抗综合征是诱发心血管疾病的危险因素 ,而其中心环节即为胰岛素抵抗。胰岛素抵抗及其继发的血糖、血脂代谢紊乱是产生冠心病、糖     

腹腔镜胆囊切除术并发症原因探讨及预防措施

目的 探讨腹腔镜胆囊切除术并发症发生的原因及预防处理措施。方法 回顾分析我院1999年以来行腹腔镜胆囊切除术（LC）的638例病人的临床资料。结果 发生并发症18例，其中腹腔内出血3例，胆管损伤1例，胆漏3例，胆道残余结石5例，肝下积液2例，切口感染3例，钛夹游走1例。结论 胆管损伤、胆漏和胆总管残余结石是LC的主要并发症；绝大部分并发症是能够预防和治愈的。     

钱秋海治疗甲状腺功能亢进症经验

<正>钱秋海教授是山东省第一批五批名中医药专家师承教育指导老师,从医30余年,对甲状腺疾病、糖尿病的治疗有丰富经验,介绍如下。1病因病机甲亢的发生与情志因素和环境因素有密切关系,如《诸病源候论》:"瘿者,由忧恚、气结所生。"亦曰:"饮沙水,沙随气入于脉,搏颈下而成。"先天天癸亏虚,肝血亏耗,冲任失养,阴精不足,脏腑津液失调,遇有情志内伤,肝气郁结,脾失健运,湿痰凝聚,则气郁痰阻,结于颈前见颈前肿大。钱师认为,本病病     

核因子-κB在大鼠门静脉分支结扎后肝细胞凋亡中的作用

目的：探讨核因子-κB(NF-κB)在大鼠门静脉分支结扎后结扎侧肝细胞凋亡中的作用。方法：Wistar大鼠60只，随机分成对照组和门静脉分支结扎组。观察术后第12，24，48，72小时以及第168小时(第7天)和第336小时(第14天)肝脏大体结构和血浆转氨酶的变化。运用凝胶阻滞分析(EMSA)检测术后结扎侧肝脏NF-κB的活性，用TUNEL法对结扎侧肝细胞凋亡进行定量分析，电镜下观察结扎侧肝脏的超微结构改变。结果：70％门静脉分支高位结扎后，结扎侧肝叶呈进行性萎缩变小，对侧则成比例的代偿性增生。在整个观察过程中，全肝的总质量维持恒定，肝脏功能基本保持正常。结扎侧肝脏NF-κB的活性在术后明显升高，于第48小时达高峰，1w后基本恢复正常。TUNEL显示结扎侧肝细胞在术后凋亡明显增加，于第48小时达高峰。电镜显示结扎侧肝脏早期出现典型的凋亡改变，晚期明显纤维化。结论：70％门静脉分支高位结扎后，结扎侧肝脏NF-κB的活性明显升高，其可能在肝细胞凋亡中具有重要意义。     

吴茱萸碱对人结肠癌细胞自吞噬的影响

目的 观察吴茱萸碱对结肠癌Lovo细胞自噬的影响,探讨吴茱萸碱对Lovo细胞的生长抑制作用及其机制.方法 联合应用MTT法和形态学变化观察吴茱萸碱对Lovo细胞的生长抑制作用,借助激光共聚焦显微镜观察自噬现象,并用丹(磺)酰戊二胺染色测定对自噬进行定量分析,Western blot方法检测微管相关蛋白轻链3的表达,确认自噬的发生.同时检测吴茱萸碱和3-甲基腺嘌呤对Lovo细胞活力及凋亡的影响.结果 吴茱萸碱呈浓度依赖性抑制结肠癌Lovo细胞的生长活力(P＜0.05),尤其在浓度为60 μmol/L时最为明显(60%),且在光镜下形态表现为细胞裂解和细胞间隙增宽.吴茱萸碱可诱导结肠癌Lovo细胞发生自噬(P＜0.05),阻断自噬后,吴茱萸碱抑制结肠癌Lovo细胞生长活力的能力进一步增强(P＜0.01).结论 吴茱萸碱可诱导结肠癌Lovo细胞发生自噬,但自噬却拮抗吴茱萸碱的抗肿瘤活性.联合应用吴茱萸碱和自噬凋节剂可增强其抗肿瘤作用,逆转其对化疗药物的耐药性.

Abstract：

Objective To investigate the effects of evodiamine on autophagy of human colon a cleno carcinoma lovo cells, and to explore the role and mechanism of autophagy which was induced by evodiamine (EVO). Methods MTT assay combined with the morphologic changes were used to observe the cell viability. Monodansylcadaverine was used to detect autophagy by fluorospectrophotometer and the confocal laser fluorescence microscopy respectively. Immunoblotting assay was used to observe the microtubule-associated protein 1 light chain 3. Finally, evodiamine combined with 3-methyladenine to detect the cell viability with MTT assay and the apoptosis with the flow cytometry, respectively.Results Evodiamine inhibited the viability of Lovo cells in dose-dependent manner ( P ＜ 0. 05 ), especially in 60 μmol/L that was obviously(60% ). Further more, the cell lysis and cell gap widened was observed by the light microscope. Evo triggered the autophagy, and after inhibition the autophagy by 3-MA, the killing capacities of the Evo was enhanced ( P ＜ 0. 01 ). However, autophagy prohibited the apoptosis pathways.Conclusions Evodiamine can trigger the autophagy, which might play a self-defense role in evodiamineinduced cell death. The cytototoxicity of evodiamine can be augmented by the autophagy inhibitors. The joint application of autophagy regulators with the chemotherapeutic agents might enhance the cell killing effects of chemotherapeutic drugs and show a potent role in cancer drug resistance.     

非酒精性脂肪性肝病患者甲状腺激素水平变化及其临床意义

目的探讨非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）患者血清甲状腺激素水平变化及其临床意义。方法采用放射免疫法检测123例NAFLD患者及56例对照组的血清甲状腺激素（TT3、TT4、TSH）及透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原氨基末端肽（PⅢNP）、Ⅳ型胶原（CⅣ）等反映肝纤维化的血清学指标。结果 非酒精性脂肪性肝炎（NASH）组血清TT3浓度低于对照组及非酒精性单纯性脂肪肝（NASFL）组（P〈0.05）;三组间血清TT4、TSH浓度比较无显著差异（P〉0.05）;NASFL组患者血清HA、PⅢNP浓度高于对照组（P〈0.05）,CⅣ、LN浓度与对照组比较无显著差异（P〉0.05）;NASH组血清HA、PⅢNP、CⅣ、LN浓度均高于对照组及NASFL组（P〈0.05）;中、重脂肪肝组TT3浓度低于对照组（P〈0.05）,HA、PⅢNP、CⅣ、LN浓度高于对照组（P〈0.05）;轻度脂肪肝组TT3、HA、PⅢNP、CⅣ、LN浓度与对照组比较无显著差异（P〉0.05）。NASFL患者血清TT3水平与HA、PⅢNP呈负相关（P〈0.05）;NASH组患者血清TT3水平与HA、PⅢNP、CⅣ、LN均呈负相关（P〈0.05）。结论 NAFLD患者存在血清TT3水平降低,且下降程度与临床分型、超声分度及肝纤维化严重程度一致,检测NAFLD患者血清TT3浓度变化对判断病情及预后有一定的临床意义。     

黄连解毒汤联合二甲双胍治疗2型糖尿病的临床观察

目的观察黄连解毒汤联合二甲双胍对2型糖尿病患者血糖血脂及空腹胰岛素、胰岛素抵抗、胰岛素敏感指数的影响.方法选取2012年3月-2012年9月于我院就诊的54例2型糖尿病患者为研究对象,随机将其分为中药组、西药组、联合组,统计分析三组患者治疗后的观察指标.结果联合组空腹血糖、胰岛素抵抗、糖化血红蛋白、甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白均明显低于其他两组,胰岛素敏感指数、空腹胰岛素较其他两组明显升高,差异有统计学意义(P<0.01).结论黄连解毒汤联合二甲双胍有良好的控制血糖、调节血脂的功效,可以降低胰岛素抵抗,提高胰岛素敏感指数.     

叶酸、甲钴胺与尼莫地平合用对脑小血管病所致认知功能障碍的疗效观察

目的 评价叶酸、甲钴胺与尼莫地平合用对脑小血管病所致认知功能障碍的改善情况.方法 由脑小血管病所致的缺血性卒中患者60例,并且都伴有认知功能障碍,认知功能障碍采用蒙特利尔(MoCA)认知评估量表(北京版)进行评分,MoCA评分均≤25分.治疗组给予甲钴胺500 μg,3次/d,口服;叶酸5 mg,1次/d,口服;尼莫地平30 mg,3次/d,口服.对照组给予尼莫地平30 mg,3次/d,口服.4个月后进行随访,再次给予MoCA量表评分,观察认知功能改善情况.结果 治疗组对认知功能的改善总有效率明显优于对照组(P<0.05).结论 叶酸、甲钴胺与尼莫地平合用对脑小血管病所致认知功能障碍的改善情况明显优于单用尼莫地平.