急性肺损伤大鼠肺组织基质金属蛋白酶2及其抑制因子蛋白和mRNA的表达

目的探讨内毒素致急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子-κB(NF-κB)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及其抑制因子(TIMP-2)蛋白和mRNA表达的变化。方法 20只雄性Wistar大鼠随机分为2组:对照组、LPS模型组,每组再分为4 h和8 h两个亚组。尾静脉注射脂多糖(LPS)(10 mg/kg)建立大鼠急性肺损伤模型。检测血白细胞计数、支气管肺泡灌洗液(BALF)蛋白含量,采用免疫组化ABC法和实时荧光定量PCR分别测定肺组织NF-κB、MMP-2、TIMP-2蛋白及其mRNA的表达,并观察肺组织病理变化。结果与对照组相比,模型组4 h和8 h时大鼠肺组织中的NF-κB、MMP-2蛋白染色阳性面积率及其mRNA表达均显著增高(P<0.01)、TIMP-2蛋白染色阳性面积率及其mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01)。病理学观察显示,模型组大鼠肺组织出现出血及坏死。结论内毒素致急性肺损伤的发病机制可能与NF-κB、MMP-2蛋白及其mRNA表达升高、TIMP-2蛋白及其mRNA表达降低有关。     

联合肝叶切除治疗肝门部胆管癌

目的研究联合肝叶切除术治疗肝门部胆管癌的手术方式、并发症及疗效。方法回顾性分析2000年1月至2011年3月67例肝门部胆管癌患者临床资料。联合左半肝切除23例,右半肝切除9例,尾状叶切除3例,右三叶、右前叶切除各4例,姑息性切除15例,内引流术4例,经皮肝穿刺胆道引流外引流术5例。结果死亡1例,手术并发症发生率37．31％（25／67）。联合肝叶切除组术后中位生存时间为31．1个月,高于姑息性切除组（15．8个月）。联合肝叶切除组的1、3、5年存活率为78．5％、48．3％和29％,姑息性切除组的1、3、5年存活率为43．5％、6．8％、0。术后随访率67．16％（45／67）。结论肝门部胆管癌应积极手术切除治疗,对无明显手术禁忌证的患者行包括肿瘤切除的联合肝叶切除的扩大根治术可延长患者存活期;围手术期正确处理是减少术后并发症,提高患者生活质量和延长存活期的关键。     

不同治法对内毒素性休克小鼠多器官功能障碍和肺NF-κB表达的影响

目的：探讨养阴生津方、开达膜原方对内毒素性休克多器官功能障碍及肺组织NF—κB表达的影响。方法：通过腹腔注射脂多糖建立小鼠内毒素休克模型．将小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、养阴生津组和开达膜原组，观察各组小鼠生存时间．肺组织核转录因子（NF—κB p65）水平以及肺、肝、肾组织病理学形态。结果：与模型对照纽相比，养阴生津组、开达膜原组内毒素休克小鼠的生存率明显提高，NF—κB p65阳性细胞率显著降低；与正常对照组相比，模型对照组小鼠NF—κB D65阳性细胞率明显增高。病理学观察，模型对照组小鼠肺、肝、肾组织出现细胞坏死及出血，养阴生津组、开达膜原组小鼠肺、肝、肾组织病理改变明显轻于模型组。结论：养阴生津方和开达膜原方均能防治内毒素休克多器官功能障碍，提高内毒素休克小鼠生存率．两方对内毒素休克肺有保护作用，其机制可能与其调控肺纽织NF-κB p65表达有关。     

抗纤灵方对单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1-Smad通路的影响

目的:研究中药复方抗纤灵对单侧输尿管梗阻(UUO)所致肾纤维化大鼠TGF-β1-Smad通路的影响,借以初步探讨其发挥疗效的作用机制。方法:雄性SD大鼠18只随机分为3组,假手术组、模型组、中药治疗组。用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维化模型,抗纤灵治疗两周后检测梗阻肾羟脯氨酸含量;HE染色和电镜观察肾组织病变;采用RT-PCR检测肾组织TGF-β1 mRNA水平;蛋白免疫印迹法检测肾组织转化生长因子I型受体(TβRI)、转化生长因子II型受体(TβRII)、Smad2蛋白表达及磷酸化变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠梗阻肾羟脯氨酸含量明显增多;病理观察可见肾小球毛细血管基底膜明显增厚,间质成纤维细胞和胶原沉积明显增多;肾组织TGF-β1mRNA及TβRI、TβRII蛋白表达显著增多,Smad2蛋白磷酸化及总蛋白表达水平均显著增多。与模型组比较,中药干预组大鼠梗阻肾羟脯氨酸含量明显减少;肾小球和肾小管基底膜仅见轻度增厚,间质成纤维细胞和胶原沉积较模型组减轻;肾组织TβRI、TβRII蛋白表达明显下调,Smad2蛋白磷酸化及总蛋白表达水平均明显下调。结论:抗纤灵可抑制单侧输尿管梗阻大鼠TGF-β1-Smad通路,抑制梗阻肾TβRI、TβRII、Smad2蛋白表达及Smad2蛋白磷酸化,从而改善梗阻性大鼠的肾间质纤维化,减少纤维化肾脏中胶原蛋白含量。     

不同治法对内毒素致急性肺损伤小鼠肺组织细胞因子的影响

目的：探讨清热解毒法、清热凉血法、开达膜原法对内毒素致急性肺损伤小鼠肺组织细胞因子的影响。方法：通过尾静脉注射脂多糖LPS（10mg／kg）建立急性肺损伤小鼠模型，观察模型组、清热解毒组、清热凉血组及开达膜原组肺组织匀浆液中TNF-α、IL-6、IL-4、IL-10以及肺体指数、肺组织病理学变化。结果：与正常组相比，造模后8h模型组肺组织TNF-α、IL-6、IL-4、IL-10水平和肺体指数均升高（P〈0．05～0．01），且光镜下模型组肺组织呈大片出血、坏死，大量炎细胞浸润；与模型组相比，造模后8h清热解毒组、清热凉血组及开达膜原组肺组织TNF-α水平均降低（P〈0．05～0．01）；清热解毒组及开达膜原组肺组织IL-6水平均降低（P〈0．05～0．01）；清热凉血组及开达膜原组肺组织IL-10水平均升高（P〈0．05～0．01）；清热解毒组肺体指数降低（P〈0．05）。光镜下清热解毒组局部肺组织中仍见小出血灶，局部细支气管上皮细胞增生（轻度）；清热凉血组肺组织见一处小灶性出血灶；开达膜原组见轻度肺间质炎症。结论：清热解毒法、清热凉血法和开达膜原法均对内毒素致急性肺损伤小鼠有保护作用，其机理可能与调节促炎因子TNF-a、IL-6与抗炎因子IL-10的表达，从而调控炎症反应，维持内环境稳定有关。     

芪鹿消白方对 阿霉素肾病大鼠肾小球硬化的作用及其机制

目的：探讨芪鹿消白方(Qiluxiaobai,QLXB)对阿霉素致局灶节段性肾小球硬化(focal segmental glomerulosclerosis,FSGS)大鼠的影响。方法：大鼠采用随机数字表法分为4组：正常组、模型组、科素亚组、QLXB 组。采用7.5 mg/kg分2次尾静脉注射阿霉素致大鼠肾脏FSGS。科素亚组予科素亚5.19 mg/(kg·d),QLXB组予QLXB 134.4 mg/(kg·d)灌胃给药,正常组以生理盐水代替。观察8周。定期检测体质量、血肌酐、血尿素氮等生化指标;光 镜下观察肾组织HE和PAS染色形态学变化。RT-PCR和Western印迹检测肾组织纤维化指标结缔组织生长因子(connective tissue growth factor,CTGF),纤维连接蛋白(fibronectin,FN),平滑肌肌动蛋白-α(smooth muscle actin-α,α-SMA)。 结果：与正常组比较,模型组血肌酐、尿素氮、总胆固醇、三酰甘油水平升高(P<0.05),血清白蛋白明显降低 (P<0.05);光镜下肾组织结构破坏;CTGF,FN,α-SMA mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。科素亚和QLXB能降低 血肌酐、尿素氮、总胆固醇、三酰甘油水平,升高血清白蛋白水平(P<0.05)。QLXB减轻肾组织病理改变较科素亚明 显,并能抑制肾组织CTGF,FN,α-SMA mRNA和蛋白表达的明显上调(P<0.05)。结论：QLXB能在一定程度上改善阿 霉素肾病肾小球硬化病变,主要机制可能与抑制肾组织CTGF,FN,α-SMA mRNA和蛋白表达有关。     

凉血活血法对肺纤维化小鼠羟脯氨酸和转化生长因子-β1含量的影响

目的研究凉血活血法防治肺纤维化的作用，并探讨其作用机制。方法将雄性ICR小鼠随机分为4组：阴性对照组、肺纤维化模型组、凉血活血法组、强的松阳性对照组。经鼻滴入博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型，造模8h开始常规灌胃给药。应用凉血活血法（犀角地黄汤）防治28d后进行取材及实验指标检测：用酶联免疫吸附法测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中转化生长因子-β1（TGF—β1）含量变化，用样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸（HYP）的含量。结果肺组织病理形态学观察发现模型组小鼠肺泡炎及纤维化程度明显高于阴性对照组；与模型组比较，凉血活血法组肺组织中HYP含量显著降低（P〈0．01），BALF中TGF-β1含量显著降低（P〈0．01）。结论凉血活血法能明显减轻博莱霉素所致的小鼠肺纤维化程度，降低肺组织中HYP含量。其机制可能是通过抑制TGF—β1蛋白表达，减少胶原蛋白的产生，使肺纤维化病变减轻。