家蝇幼虫滞育条件优化

目的 对家蝇幼虫滞育条件(温度、光周期)进行优化.方法 观察不同温度、光周期下3龄幼虫停止进食的时间,确定滞育时间;研究亲代、子代不同光周期和温度对子代滞育的影响,优化诱导家蝇幼虫滞育的条件.结果 3龄幼虫停止进食的时间只与温度有关,与光周期无关;发育起始温度为9.81℃;光周期(L 12:D 12)和两代均低温通常会有高滞育率,亲代和子代都在L 12:D 12(20℃)时滞育率较高,两代长日照或/和两代高温的情况下饲养的幼虫滞育率几乎为零;经统计分析,亲代在20℃,L 12:D 12条件下产卵孵化的子代在15℃、L 12:D 12条件下滞育率较高.结论 温度是家蝇幼虫停止进食的主要影响因素,人工诱导家蝇幼虫滞育的最佳方案为在20℃,L 12:D 12培养亲代,再将其子代培养于15℃,L 12:D 12.     

家蝇幼虫分泌物抗菌组分的抗菌效果观察及筛选

目的筛选家蝇幼虫分泌物中的抗菌组分并测定其抗菌活性。方法用盐析、凝胶过滤层析、反相高效液相色谱(RP-HPLC)分离纯化分泌物中抗菌蛋白肽,以大肠埃希菌为指示菌种,采用平板滤纸片法检测抗菌活性,并观察其对金黄色葡萄球菌等多种细菌的抗菌活性。结果经50%~80%硫酸铵盐析沉淀、Sephadex G-100、G-50凝胶过滤柱层析分离得到一活性峰,该活性峰对大肠埃希菌及金黄色葡萄球菌等细菌显示较强的抗菌作用,进一步用反相高效液相色谱纯化,该活性峰由3个活性组分构成。结论家蝇幼虫分泌物中含有3个抗菌组分,对多种革兰氏阳性及阴性菌具有较强的抗菌活性。     

家蝇抗菌肽对细菌感染小鼠外周血多项指标的影响

目的了解在腹腔注射家蝇幼虫分泌物抗菌肽的干预作用下,大肠埃希菌感染小鼠的外周血细胞过氧化物酶及多项血液指标的变化。方法将实验小鼠随机分为空白对照、模型对照、抗菌肽干预3个组,并分别于处理后24 h、48 h、72 h取样分析;外周血细胞过氧化物酶染色采用四甲基联苯胺法,全自动血细胞分析仪检测血红蛋白、血小板、白细胞、红细胞计数及白细胞细胞分类情况。结果在各检测指标中,白细胞数、中性粒细胞绝对值在实验处理间具有显著性差异;感染72 h抗菌肽干预组白细胞数高于模型对照组（P〈0.05）;与空白对照组比较,抗菌肽干预组和模型对照组各检测时间点白细胞数均有显著性差异（P〈0.05）;感染72 h抗菌肽干预组中性粒细胞绝对值显著高于模型对照组（P〈0.05）;血细胞过氧化物酶染色及其余指标在处理因素间无统计学差异。结论腹腔注射家蝇幼虫分泌物抗菌肽对小鼠大肠埃希菌感染具有一定的干预作用。     

家蝇幼虫血淋巴提取物抗肿瘤作用

目的 探讨家蝇3龄幼虫血淋巴40％固相萃取组分抗肿瘤作用及机制.方法 应用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)法检测40％固相萃取组分对S180肉瘤细胞株生长的抑制作用;通过体内试验检测40％固相萃取组分对S180小鼠实体瘤生长的抑制率,测定荷瘤小鼠血清总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量变化.结果 在体外,40％固相萃取组分25 μg/mL对S180肉瘤细胞增殖抑制率最高达79％,与阴性对照组比较差异有统计学意义(t =6.40,P＜0.05);40％固相萃取组分有抑制S180实体瘤小鼠肿瘤生长的作用,高、中、低剂量组肿瘤生长抑制率分别为46.23％、35.23％、32.13％;与模型对照组(3.19 ±0.80)、(163.41±22.65) U/mL比较,3个剂量组的血清T-AOC和SOD活性均升高,其中高剂量组小鼠血清T-AOC和SOD活性分别为(4.91±0.46)、(213.19 ±43.37) U/mL,差异均有统计学意义(tT-AOC=7.12、tSOD=-7.16,P＜0.01);3个剂量组的血清MDA含量均降低,其中高剂量组血清MDA含量为(8.85±1.81) nmol/mL,差异有统计学意义(tMDA=6.79,P＜0.01).结论 40％固相萃取组分在体外和体内均具有抑制S180肉瘤细胞生长的作用,清除自由基可能是其体内抗肿瘤机理.     

家蝇幼虫血淋巴不同Tricine-SDS-PAGE分析方法比较

目的用3种不同的三羟甲基甘氨酸-十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Tricine-SDS-PAGE)方法分析家蝇三龄幼虫血淋巴。方法分别用不含尿素也不含甘油的分离胶组成的普通Tricine-SDS-PAGE方法,分离胶中有尿素组分的三层胶方法,分离胶中有甘油组分的三层胶方法分析家蝇三龄幼虫血淋巴。结果家蝇幼虫血淋巴中含有丰富的小分子多肽,用不含尿素也不含甘油的分离胶组成的普通Tricine-SDS-PAGE方法不能有效分离分子量在10.700 kDa的小分子蛋白或多肽;分离胶中有尿素组分的三层胶方法虽能清晰分离家蝇幼虫淋巴中16.949kDa的小分子蛋白或多肽,但对其分子量的测定可能不够准确;而分离胶中有甘油组分的三层胶方法既能很好分离14.4 kDa的蛋白,也能清晰分离8.159 kDa的小分子多肽,并能较准确的反映其分子量大小,用于分析家蝇幼虫血淋巴效果较好。结论分析家蝇幼虫血淋巴应采用分离胶中有甘油组分的三层胶的电泳方法。     

黑水虻饲养料中孳生粉螨群落生态调查北大核心CSCD

目的了解黑水虻饲养料中孳生粉螨种类及其多样性,为养殖黑水虻的害螨控制提供参考。方法采集黑水虻饲养池中的饲养料,用60目/吋的分样筛过筛后采用直接镜检法分离其中的螨类,并制作玻片标本对其进行鉴定与分类。结果共采集黑水虻饲养料19.02g,检出螨类15276只,隶属4科5属5种。其中粉螨4种,即腐食酪螨(Tyrophagus putrescentiae)1361只、伯氏嗜木螨(Caloglyphus berlesei)12359只、拱殖嗜渣螨(Chortoglyphus arcuatus)229只和粉尘螨(Dermatophagoides farinae)524只。肉食螨一种为马六甲肉食螨(Cheyletus alaccensis)共803只。平均孳生密度为803.15只/g。结论黑水虻饲养料中螨类污染较为严重,主要螨种为伯氏嗜木螨等粉螨,应提高预防控制意识并采取有效的防制措施,抑制黑水虻养殖池中粉螨的孳生。     

家蝇免疫血淋巴抗HeLa肿瘤细胞蛋白的筛选及纯化

目的从家蝇3龄幼虫血淋巴筛选具有抗肿瘤细胞HeLa(宫颈癌细胞)的蛋白。方法采用固相萃取、反相高效液相色谱分离、四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法,从热诱导家蝇3龄幼虫免疫血淋巴筛选抗肿瘤多肽。结果经10%～50%乙腈洗脱C18固相萃取柱,获得mp1、mp2、mp3、mp4、mp5等5个具有抗HeLa的活性组分,以40%乙腈萃取组分活性最强达38%,而顺铂抑制率为57%,经反相高效液相色谱分析,该固相萃取活性组分由2个片段组成,分别为出现在280nm波长下24 min和29 min,对HeLa具有抑制作用,与顺铂的抗肿瘤活性相接近。结论家蝇3龄幼虫血淋巴具有抗He-La的mp1、mp2、mp3、mp4、mp5 5个组分,MP4活性最强,由2个分子量为16KDa成酸性的多肽片段组成。     

家蝇幼虫分泌物对猪蛔虫卵发育的影响

目的：观察家蝇幼虫分泌物对猪蛔虫卵发育的影响。方法：从培养家蝇幼虫的猪粪中提取幼虫分泌物，制成虫卵培养液，观察培养液中猪蛔虫卵发育情况。同时，设立未培养家蝇幼虫的猪粪为阴性对照组。结果：实验组蛔虫卵的发育率较对照组低，两者比较差异有显著性（P＜0．05）。结论：家蝇幼虫的分泌物中可能含有阻碍蛔虫卵发育的物质。