家蝇幼虫分泌型抗菌肽对小鼠免疫功能影响

目的 探讨家蝇幼虫分泌型抗菌肽对正常小鼠免疫功能影响.方法 选用BalB/c小鼠,随机分为对照组(生理盐水)和家蝇幼虫分泌型抗菌肽(腹腔注射)5、10、20mg/kg组,每天1次,7d后处死小鼠,测量体重、胸腺/体重比值、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力、刀豆蛋白A诱导小鼠脾T淋巴细胞转化率、碳粒廓清能力及半数溶血值.结果 10、20mg/kg抗菌肽组小鼠脾脏指数分别为(7.41±0.93)和(7.56±1.05),胸腺指数分别为(3.80±0.69)和(3.51±1.02),巨噬细胞吞噬率为(38.81±7.88)%和(40.16±9.74)%,脾脏酸性磷酸酶活性分别为(268.60±36.64)、(270.48±54.62)U/g,脾T淋巴细胞转化率分别为(0.31±0.11)%和(0.32±0.09)%,与对照组比较,差异有统计学意义(P均<0.05).抗菌肽组小鼠体重及血清半数溶血值与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 家蝇幼虫分泌型抗菌肽对小鼠具有增强免疫功能作用.     

蝇蛆壳聚糖对糖尿病小鼠降血糖作用

目的 探讨蝇蛆壳聚糖对实验性糖尿病小鼠血糖调节作用.方法 将蝇蛆壳聚糖分别给予正常小鼠及糖尿病模型小鼠,经口灌胃,连续20 d,测定空腹血糖及糖耐量.结果 正常小鼠给予蝇蛆壳聚糖后血糖值为(8.86±1.12)mmol/L,与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).糖尿病小鼠给予高、中、低剂量蝇蛆壳聚糖后血糖分别为(11.92±3.36),(13.02±4.27),(16.39±2.65)mmol/L,均明显低于模型对照组(19.67±3.81)mmol/L(P<0.05),高、中、低剂量组糖耐量分别为(24.70±5.04),(27.58±5.30),(34.27±7.73)mm²,均明显低于模型对照组(40.49±9.80)mm²(P<0.05,P<0.01).结论 蝇蛆壳聚糖能明显降低糖尿病小鼠血糖,对四氧嘧啶所引起的胰岛β细胞破坏有一定抑制作用.     

家蝇幼虫滞育条件优化

目的 对家蝇幼虫滞育条件(温度、光周期)进行优化.方法 观察不同温度、光周期下3龄幼虫停止进食的时间,确定滞育时间;研究亲代、子代不同光周期和温度对子代滞育的影响,优化诱导家蝇幼虫滞育的条件.结果 3龄幼虫停止进食的时间只与温度有关,与光周期无关;发育起始温度为9.81℃;光周期(L 12:D 12)和两代均低温通常会有高滞育率,亲代和子代都在L 12:D 12(20℃)时滞育率较高,两代长日照或/和两代高温的情况下饲养的幼虫滞育率几乎为零;经统计分析,亲代在20℃,L 12:D 12条件下产卵孵化的子代在15℃、L 12:D 12条件下滞育率较高.结论 温度是家蝇幼虫停止进食的主要影响因素,人工诱导家蝇幼虫滞育的最佳方案为在20℃,L 12:D 12培养亲代,再将其子代培养于15℃,L 12:D 12.     

家蝇幼虫营养成分价值的研究

目的获得畜禽粪便养殖家蝇生产蝇蛆动物蛋白的实验室数据,评价用蝇蛆代替鱼粉饲养蛋鸡的效果及经济效益.方法在相同的实验室饲养环境下,观察人工饲料、猪粪饲养的家蝇幼虫体内脂肪酸及微量元素含量的区别;用蝇蛆粉或鲜蛆代替鱼粉饲养蛋鸡,观察对蛋质的影响.结果用猪粪饲养的蝇蛆其体内所含的微量元素(Ca、Fe、Cu、Zn、Se)高于用人工饲料饲养的蝇蛆(P<0.05);用蝇蛆粉或鲜蛆代替鱼粉饲养蛋鸡,蛋内的脂肪酸及微量元素含量没有明显改变(P>0.05).结论用猪粪饲养家蝇可以生产出价廉、优质、富含微量元素的蝇蛆蛋白,而用蝇蛆代替鱼粉饲养蛋鸡不会影响鸡蛋的质量.     

家蝇幼虫分泌物抗菌肽的分离及其部分特性

目的 分离家蝇（Musca domestica）幼虫分泌物抗菌肽并研究其部分理化特性。 方法 用超滤、固相萃取、反相高效液相色谱（RP-HPLC）分离纯化家蝇幼虫分泌物抗菌肽；测定抗菌肽对多株革兰氏阴性菌及革兰氏阳性菌的最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）；比较其在不同pH值（pH 6.0～9.0）、不同阳离子浓度（Mg²⁺ ：（0.5×10-3～10.0×10-3）mol/L，Na⁺、K⁺：（10×10^-3～100×10^-3）mol/L）及不同小鼠血清浓度（12.5％～75％）环境中抗菌活性的变化。 结果 超滤分离获得的活性蛋白相对分子质量为Mr 3 000～30 000，该蛋白经20％、30％、70％及80％乙腈洗脱，其组分均有活性，其中以70％乙腈洗脱组分活性较强且稳定。进一步用RP?鄄HPLC从70％洗脱组分中纯化出两个抗菌活性肽。抗菌肽对大肠埃希菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌的MIC值分别为32.738、16.369、65.475 及32.738 μg/ml 。在培养基pH值为6～9、不同阳离子浓度及不同小鼠血清浓度的环境中，各实验组的A ₅₇₀增加量均小于0.05，而对照组的A570增加量多为0.3以上，各实验组与对照组比较，其差异均具有统计学意义（P值均<0.01）。 结论 用固相萃取等方法从家蝇幼虫分泌物中可快速分离出具有较强活性的抗菌肽。该抗菌肽在不同条件下均具有较好的抗菌效果。     

两种提取家蝇幼虫血淋巴方法的比较

目的:对剪头法和瞬时破壁法提取的家蝇幼虫血淋巴粗提液进行蛋白浓度和SDS-PAGE分析比较.方法:分别采用剪头法和瞬时破壁法提取家蝇幼虫血淋巴粗提液,同时设立未诱导组和热诱导组,测定各组的蛋白浓度进行比较分析,并对各组血淋巴粗提液进行SDS-PAGE的分析比较.结果:剪头法热诱导组的血淋巴粗提液蛋白浓度高于未诱导组,瞬时破壁法提取的血淋巴粗提液蛋白浓度高于剪头法;经SDS-PAGE分析,瞬时破壁法提取的血淋巴粗提液蛋白条带明显多于剪头法.结论:瞬时破壁法提取家蝇幼虫血淋巴简便易行,所提取的血淋巴蛋白成分多于剪头法.     

蝇蛆壳聚糖急性毒性实验

目的观察蝇蛆壳聚糖的急性毒性反应。方法蝇蛆壳聚糖以最大浓度及最大给药体积的药液灌胃连续给药3次。连续观察14d,记录小鼠毒副反应情况。蝇蛆壳聚糖腹腔注射给药1次,连续观察14d,记录小鼠毒副反应情况。结果观察14d,灌胃给药全部动物健存,小鼠体重与空白对照组差异无显著性,未见任何毒性反应。计算蝇蛆壳聚糖最大给药量为2700mg／kg体重,相当于成人日用量的67．5倍。腹腔注射给药亦未见任何毒性反应。结论蝇蛆壳聚糖毒性较小。     

蝇蛆壳聚糖对高脂血症大鼠降脂作用

目的 研究不同脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖对实验性高脂血症大鼠的降血脂作用.方法 采用酸碱化学法制备72.3%,80.5%,96.1%脱乙酰度的蝇蛆壳聚糖,并用红外扫描鉴定其结构.取成年雄性SD大鼠随机分为5组,分别为正常对照组、高脂模型组、蝇蛆壳聚糖72.3%,80.5%,96.1%脱乙酰度组,给高脂饲料造模的同时连续给予蝇蛆壳聚搪8周,测定大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)含量,同时观察对大鼠体重影响.结果 各脱乙酰度组蝇蛆壳聚糖均能显著降低血清TC、TG、LDL-C含量(P＜0.01),显著升高HDL-C(P＜0.01),降低大鼠体重(P＜0.01).结论 蝇蛆壳聚糖具有明显降血脂作用,其作用与脱乙酰程度呈正相关.     

蝇蛆壳聚糖对H2O2致内皮细胞损伤保护作用

目的 研究蝇蛆壳聚糖(HMC)对过氧化氧(H2O2)诱导的内皮细胞氧化应激损伤的保护作用.方法利用H2 O2诱导的内皮细胞损伤模型,采用不同剂量HMC预培养,通过四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活率,生化法和放免法检测细胞培养液超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和内皮素(ET)水平.结果中、高剂量HMC组细胞存活率A值分别为(0.714 0±0.059 5)、(0.811 9±0.059 7),均高于H2O2损伤组(0.5972±0.042 2) (P ＜0.01);低、中、高剂量HMC组细胞SOD活性分别为(14.76±1.59)、(16.99±1.69)、( 19.22±2.31) NU/mL,明显高于H2O2损伤组(P＜0.05,P＜0.01);低、中、高剂量HMC组细胞MDA含量分别为(10.11 +1.91)、(8.23±1.64)、(6.74±1.26) nmol/L,明显低于H2 O2损伤组(P＜0.01);各剂量HMC组细胞NO水平明显高于H2 O2损伤组,而ET含量则明显低于H2 O2损伤组(P＜0.01).结论HMC具有保护血管内皮细胞的作用,机制可能与减少细胞NO释放、增加ET水平、维护内皮细胞结构和功能完整及增强其抗氧化能力有关.     

生物分泌抗菌物质研究进展

分泌物是生物防御系统的组成之一，从最原始的植物到细菌、真菌、两栖动物乃至高等级的哺乳动物，它们都能利用独特的分泌物来维持自身的菌群平衡及抵御外物尤其是病原微生物入侵。本文从生物分泌物抗菌物质的分类及生物学特性、抗菌机理、应用及展望几个方面对其进行了综述。