中药复方补剂对运动大鼠骨骼肌酶活性的影响

目的研究中药复方补剂对运动大鼠骨骼肌酶活性的影响。方法将40只SD大鼠分为补剂组和对照组,进行游泳运动后每组再分别分为即刻处死组和休息24h再行处死组,用酶组织化学方法染色观察骨骼肌中多种酶活性的变化。结果方剂组的运动鼠骨骼肌酶活性较对照组高（P〈0．05）。结论中药复方补剂能通过提高运动大鼠骨骼肌酶活性来改善骨骼肌细胞的能量供给,从而减缓大鼠体力性疲劳产生和促进大鼠体力性疲劳恢复。     

孕产妇死亡医疗纠纷案例的法医病理学分析

目的从法医病理学角度分析引起医疗纠纷的孕产妇死亡原因、医疗纠纷发生原因并提出相关防范措施。方法对1999年1月-2008年12月间46例引起医疗纠纷的孕产妇死亡案例进行回顾性分析。结果孕产妇死亡年龄以30岁以上多见,死亡时妊娠时间以围产期居多（87.0%）。死亡原因中产科失血性休克死亡21例（45.7%）,栓塞类疾病死亡8例（17.4%）,感染性疾病死亡5例（10.8%）,其他原因死亡12例（26.1%）。46例中属非医疗过失性医疗纠纷8例（17.4%）,医疗过失性纠纷38例（82.6%）,医疗过失的原因主要为抢救不及时、处理不当、误诊误治等。涉及纠纷的医院以县区级医院居多（54.3%）。结论通过法医病理学司法鉴定查明死亡原因,明确医疗责任及医疗纠纷原因,已成为解决孕产妇死亡医疗纠纷的重要手段。     

N-乙酰-L-半胱氨酸对H2O2引起的血管内皮细胞损伤的拮抗效应

目的 观察N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC，痰易净)对H2O2引起的血管内皮细胞损伤的影响。方法 通过测定乳酸脱氢酶(LDH)释放率和脂质过氧化物(LPO)值，MTT法测定细胞增殖活性，流式细胞术测细胞凋亡率，研究体外培养的人脐静脉内皮细胞在不同浓度H2O2作用下的细胞损伤及凋亡，以及NAC对抗细胞损伤及凋亡的效应。结果 随着H2O2浓度增加，细胞凋亡率明显增高，细胞增殖活力降低，细胞脂质过氧化物生成增加，LDH释放率增加，并在一定范围内呈剂量-效应关系。在H2O2中同时加入0．5mmol／L NAC，可使细胞活力增强，凋亡率降低，细胞脂质过氧化物生成显减少，LDH释放率降低。结论 NAC可以对抗H2O2引起的血管内皮细胞损伤。     

银杏叶提取物对同型半胱氨酸致血管内皮细胞损伤的保护作用

目的:研究银杏叶提取物(EGb)对同型半胱氨酸诱导的人脐静脉内皮细胞株ECV304细胞损伤的保护作用。方法:用硝酸还原酶法和化学比色法测定细胞NO生成量及内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性;并分别用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学技术检测同型半胱氨酸和EGb对内皮细胞eNOS mRNA和蛋白表达的影响。结果:同型半胱氨酸使内皮细胞eNOS mRNA和蛋白表达减少,eNOS活性降低,NO生成减少。与同型半胱氨酸组相比,EGb干预组可上调eNOS mRNA和蛋白的表达,增强eNOS活性,使NO生成增多。结论:同型半胱氨酸通过下调eNOS表达损伤内皮细胞功能,而EGb可预防这一影响从而对内皮细胞产生保护作用。     

银杏内酯B对局灶性脑缺血时星形胶质细胞GFAP表达的影响

目的 观察血小板活化因子(PAF)受体拮抗剂银杏内酯B(GB)对局灶性脑缺血时星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响,并探讨其作用机制.方法 建立光化学诱导树局灶性脑缺血模型,用HE染色和电镜技术观察缺血后不同时间脑组织星形胶质细胞的形态学改变;用免疫组织化学法观察脑缺血后4 h、24 h、72 h及给予GB后24 h半暗区及对侧皮层星形胶质细胞GFAP的表达,并测定其平均灰度值.结果 光镜下可见,HE染色显示树局灶性脑缺血后,随缺血时间延长,星形胶质细胞形态有不同程度改变;电镜观察显示缺血24 h时星形胶质细胞明显肿胀.免疫组织化学染色可见,半暗区星形胶质细胞GFAP表达在4 h时没有明显改变, 24 h时增加 (P＜0.01),72 h时仍维持在较高水平(P＜0.01);对侧皮层星形胶质细胞GFAP表达于72 h时开始增加(P＜0.05).缺血后6 h舌下静脉注射GB至缺血24 h时,星形胶质细胞GFAP表达少于缺血组(P＜0.05),但仍较假手术组高.结论 脑缺血后星形胶质细胞GFAP表达增强,GB可通过减少星形胶质细胞GFAP的表达而起脑保护作用.     

末端结合蛋白1 (EB1)在宫颈组织中的表达及其对自噬标志蛋白表达的影响

 目的  探讨末端结合蛋白1 (end binding protein 1,EB1)在宫颈组织中的表达及其对自噬标志蛋白LC3和p62/SQSTM1蛋白表达的影响。方法  免疫组织化学检测EB1在宫颈癌、宫颈息肉和慢性宫颈炎组织中的表达;siRNA干扰方法抑制EB1基因表达,并采用实时荧光定量PCR和Western blot方法检测此时宫颈癌Siha细胞自噬标志蛋白LC3和p62/SQSTM1基因的表达。结果  EB1的表达部位主要集中在细胞核外周的胞质中。EB1在宫颈癌和宫颈息肉中的阳性表达率显著低于宫颈慢性炎性组织(P<0.05),但在阳性表达的宫颈癌组织中,绝大多数间质细胞表现为阴性;EB1在中、低分化宫颈鳞癌组织中的阳性表达率显著低于高分化宫颈鳞癌组织(P<0.05)。当EB1基因表达在宫颈癌Siha细胞中的表达被抑制时,无论是在mRNA还是在蛋白水平,自噬标志蛋白p62/SQSTM1和LC3的表达均显著增加(P<0.05)。结论  EB1在自噬发生较低的宫颈癌组织中阳性表达率低于自噬发生较高的宫颈慢性炎性组织;抑制EB1在宫颈癌Siha细胞中的表达,则自噬标志蛋白p62/SQSTM1和LC3表达改变,这一发现充分证明EB1在宫颈癌的自噬过程中发挥着一定的生物学效应。     

跟骨骨折切开复位内固定术后足外翻畸形愈合的法医学分析

目的探讨跟骨骨折切开复位内固定术后发生足外翻畸形愈合的原因。方法对1例右跟骨粉碎性骨折伴跟距、跟骰关节半脱位行切开复位内固定、植骨术后,逐渐发生右足外翻畸形愈合的医疗纠纷案例进行回顾性分析。结果患者因跌伤致右足肿痛、活动受限5小时余入院,足部X线及CT检查明确右跟骨粉碎性骨折伴跟距、跟骰关节半脱位。待右足、踝出现皮肤皱褶后,在腰硬联合麻醉下行切开复位钢板螺钉内固定、植骨术。术后予患肢抬高制动、石膏外固定、活血化瘀、止痛、骨肽促进骨折愈合等治疗。术后第9日复查右足部X线见B9hler角、跟骨高度减小(较术前恢复不明显)。出院后患者多次复查右足部X线发现右跟骨变形,跟距关节对应关系失常,关节间隙逐渐变窄,足弓及跟骨外翻角增大等改变,医方未予重视、干预,目前遗留右足外翻畸形伴右踝关节活动功能部分障碍。法医学鉴定认为医方诊疗行为存在过错。结论充分的术前准备和影像学评估、规范的术中操作和重要的X线透视指标评价、科学的术后锻炼和负重指导、规律的影像学复查和合理的后果预判干预是避免跟骨骨折术后远期发生足外翻畸形愈合的重要措施。     

经皮后凸成形术后骨水泥渗漏原因剖析

目的探讨经皮后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)后骨水泥渗漏的原因,减少漏诊漏治。方法对骨质疏松性椎体压缩性骨折(osteoporotic vertebral body compression fractures,OVCFs)行PKP术后骨水泥渗漏致左下肢神经功能障碍的医疗纠纷案例进行回顾性分析。结果本例因摔伤致腰部肿痛伴活动受限3 h就诊。诊断为腰1椎体新鲜骨折、腰2椎体陈旧骨折伴再次骨折。入院第3天行PKP手术,术后9 d患者出现左下肢麻木等症状,予营养神经等治疗,症状稍缓解出院。术后48 d患者因左大腿麻木无力伴活动障碍再次入院,行椎板切除减压术,术中证实骨水泥突入椎管内致硬膜囊受压变形,患者遗留左下肢活动障碍,进而引发医疗纠纷。结论 PKP术前要全面了解患者基础情况,术后及时评估术椎骨水泥分布,必要时予以外科探查,避免或减少神经损害恶性后果的发生。     

整合素α4半胱氨酸突变质粒的构建及谷胱甘肽化水平检测

目的:旨在构建整合素α4半胱氨酸突变质粒,并初步鉴定α4的谷胱甘肽化修饰位点。方法:利用点突变技术将整合素α4的半胱氨酸残基分别突变为天冬氨酸残基,以免疫共沉淀的方法利用anti-Flag琼脂糖珠富积突变的α4蛋白,采用体外谷胱甘肽化的方法检测突变α4的谷胱甘肽化水平。结果:构建了α4的81、85、278、717、767、828位的半胱氨酸单突变质粒,体外谷胱甘肽化检测表明这些单突变的α4仍具有谷胱甘肽化修饰。结论:成功构建了整合素α4所有的未形成二硫键的半胱氨酸突变的真核表达质粒,初步判定α4可能具有多个位点半胱氨酸残基同时被谷胱甘肽化修饰。     

腺病毒载体在肿瘤基因治疗和基因疫苗领域的应用研究进展

腺病毒载体是目前应用最为广泛的基因治疗病毒载体之一。相较其他病毒载体,腺病毒具有较高的基因转导效率,广泛的组织亲和性,不整合入宿主基因组等优点。腺病毒可以被改造为复制缺陷病毒载体和选择性复制的溶瘤病毒载体。腺病毒载体较强的免疫原性使其可以被应用于基因疫苗和抗癌治疗中。目前众多的临床试验都证实了腺病毒载体在上述治疗试验中的安全性和有效性。