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Objective To obtain the dendritic cells ( DC)-based vaccine modified by adenovirus containing MUC4 gene , and evaluate the anti-tumor efficacy of DC vaccine to pancreatic tumor cells. Meth-ods The mRNA sequence of tumor associated antigen, MUC4, was obtained from NCBI, and MUC4 se-quence was acquired through the restriction enzyme sites and over lap PCR, then subcloned into adenovirus plasmid to create recombinant adenovirus ( rAd-MUC4) . The DCs were infected by rAd-MUC4 virus and then stimulated the lymph cells from the same donor to induce MUC4 specific cytotoxicity T lympbocytes ( CTL) . The efficacy of CTL was analyzed by LDH releasing assay. Elispot was used to detect the IFN-γ release. Results The recombinant adenovirus containing MUC4 ( sv12) gene was obtained. The MUC4-induced CTL could specifically kill the Capan-1 pancreatic tumor cells [ ( 13. 7±6.0)% , ( 21.4± 4. 7)% , (36.1±9. 5)% at ratios of 10: ,20: ,40: ] , higher than MCF-7 and Bxpc-3 cells respectively, P < 0. 05. The spots number of CTL induced by rAd-MUC4 was ( 139.1±23.3) , more than GFP and PBS control group,P<0.05. Conclusion The Muc4 gene modified DC vaccine could induce the proliferation of CTL, which provided a significant cytotoxicity to HLA-matched MUC4 positive tumor cell lines in vitro. 相似文献
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目的 分析在腹腔镜下完成复杂急腹症手术的疗效.方法 回顾性分析在2011年4月至2014年3月之间共实施199例急腹症急诊手术.结果 实施开放手术51例,腹腔镜手术148例.腹腔镜下完成确定性手术145例,中转开腹3例.按病因分类,开放、腹腔镜手术各包括:急性胆囊炎0、31例,急性胆管炎1、17例,嵌顿膈疝0、3例,腹壁疝7、4例,阑尾炎5、67例,消化道穿孔7、11例,小肠梗阻8、7例,结肠梗阻10、3例;按手术级别分类,开放、腹腔镜的Ⅳ、Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ级手术分别为3、0例,22、55例,21、26例,5、67例.腹腔镜Ⅰ~Ⅲ级手术均多于开放手术,包括全腹腔镜下右半结肠、左半结肠切除、胆总管探查、膈疝修补、斜疝修补等.依时间划分,腹腔镜总手术比例、Ⅲ级手术比例均在2013年度显著增加,分别达到82%和84%.另外,开放、腹腔镜手术因并发症2次手术率、死亡率相比差异无统计学意义.开放手术平均术后住院时间、住院费用均高于腹腔镜手术.结论 腹腔镜能完成大多数包括Ⅲ级急腹症手术,中转开腹率低,不增加并发症死亡率,患者住院时间、费用下降.急腹症中对胆道疾病、膈疝、消化道穿孔、阑尾炎应优先选择腹腔镜;对结肠梗阻、小肠梗阻、嵌顿疝腹腔镜手术可行,而对实质脏器外伤、消化道出血、肠系膜动脉栓塞则应优先选择开放手术. 相似文献
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Objective To obtain the dendritic cells ( DC)-based vaccine modified by adenovirus containing MUC4 gene , and evaluate the anti-tumor efficacy of DC vaccine to pancreatic tumor cells. Meth-ods The mRNA sequence of tumor associated antigen, MUC4, was obtained from NCBI, and MUC4 se-quence was acquired through the restriction enzyme sites and over lap PCR, then subcloned into adenovirus plasmid to create recombinant adenovirus ( rAd-MUC4) . The DCs were infected by rAd-MUC4 virus and then stimulated the lymph cells from the same donor to induce MUC4 specific cytotoxicity T lympbocytes ( CTL) . The efficacy of CTL was analyzed by LDH releasing assay. Elispot was used to detect the IFN-γ release. Results The recombinant adenovirus containing MUC4 ( sv12) gene was obtained. The MUC4-induced CTL could specifically kill the Capan-1 pancreatic tumor cells [ ( 13. 7±6.0)% , ( 21.4± 4. 7)% , (36.1±9. 5)% at ratios of 10: ,20: ,40: ] , higher than MCF-7 and Bxpc-3 cells respectively, P < 0. 05. The spots number of CTL induced by rAd-MUC4 was ( 139.1±23.3) , more than GFP and PBS control group,P<0.05. Conclusion The Muc4 gene modified DC vaccine could induce the proliferation of CTL, which provided a significant cytotoxicity to HLA-matched MUC4 positive tumor cell lines in vitro. 相似文献
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目的:检测PARP14在胰腺癌中的表达及意义,并探讨其对胰腺癌细胞生物学功能的影响。方法:利用人类肿瘤相关的基因表达汇编(gene expression omnibus, GEO)和癌症基因组图谱(the cancer genome atlas, TCGA)中的胰腺癌基因表达谱数据,分析PARP14在胰腺癌及癌旁中的表达差异,并进一步通过TCGA数据库分析PARP14表达量与总体生存期和无病生存期的关系(Kaplan-Meier法和Log-rank检验)。在人胰腺癌细胞株BXPC-3和CFPAC-1中干扰PARP14后,分别通过CCK8增殖实验和集落形成实验检测其对胰腺癌细胞增殖能力的影响。结果:GEO数据显示PARP14在胰腺癌组织中的表达显著高于其在癌旁组织中的表达,差异具有统计学意义(P<0.001)。TCGA数据表明胰腺癌中高表达PARP14组患者的总体生存期显著低于低表达组的患者(P<0.05)。体外实验表明,干扰PARP14后,胰腺癌细胞增殖能力明显降低(P<0.05)。结论:PARP14在胰腺癌中高表达并与预后负相关,且其高表达与胰腺癌细胞增殖能力相关,PARP14可能成为胰腺癌预后预测及治疗的靶点。 相似文献
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目的 探讨构建携带hIG-Ⅰ基因腺病毒载体的可行性.方法 从pcDNA 3.1-hIGF-Ⅰ质粒中克隆出hIGF-Ⅰ基因的编码序列,酶切、连接后,插入腺病毒系统中的穿梭载体pAdshuttle-CMV,获得重组质粒pAdshuttle-CMV-hIGF-Ⅰ,将其转化含有腺病毒骨架载体pAdeasy-1的大肠杆菌BJ5183,进行同源重组,获得重组子pAdeasy-1-IGF-Ⅰ.鉴定后,将pAdeasy-1-IGF-Ⅰ转染人胚肾细胞(Ad293细胞),获得含hIGF-Ⅰ基因的重组腺病毒(rAd-hIGF-Ⅰ).再鉴定后,Ad293细胞反复感染冻融扩增腺病毒,50%组织培养感染量法(TCID50)检测病毒滴度.将病毒颗粒感染绿猴肾成纤维细胞(COS-7细胞),荧光显微镜观测绿色荧光蛋白(GFP)的表达,RT-PCR分析hIGF-Ⅰ基因在mRNA水平的表达,Western blot分析hIGF-Ⅰ在蛋白水平的表达.结果 成功构建出含有hIGF-Ⅰ基因的腺病毒载体rAd-hIGF-Ⅰ,转染COS-7细胞后发现绿色荧光蛋白表达,同时RT-PCR扩增出318 bp的目的 条带,Western blot得到7.6kDa大小的同的蛋白,证明了腺病毒载体rAd-hIGF-Ⅰ能成功转染COS-7细胞,hIGF-Ⅰ基因能在其中成功表达.结论 成功构建出含有hIGF-Ⅰ基因的腺病毒载体rAd-hIGF-Ⅰ,并且证实其能对COS-7细胞进行有效转染,为组织工程软骨的进一步改良提供了高效的基因载体. 相似文献
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目的:提高对ICU正常甲状腺病态综合征(ESS)的临床诊断认识?方法:结合1例上消化道大出血心肺复苏后合并ESS患者的临床资料及文献复习,对本病的临床表现?实验室检查?诊断和治疗进行分析?结果:该患者在病程的早期即出现ESS,临床症状为表情淡漠?痴呆?智力低下?食欲不佳,TT3?TT4?FT3?FT4以及TSH明显下降,通过甲状腺素治疗后明显缓解?结论:生命体征稳定但表情淡漠反应迟钝的重症患者,在治疗效果不佳时要注意ESS的可能? 相似文献
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目的 探讨联合替代肝右动脉(RRHA)切除及重建的胰十二指肠切除术治疗壶腹周围癌合并RRHA侵犯且胃十二指肠动脉(GDA)正常病例的可行性和安全性。方法 回顾性分析南京医科大学第一附属医院胰腺中心2015年3-6月诊治的2例壶腹周围癌侵犯RRHA病例的临床资料。均行胰十二指肠切除术,同时切除受侵的RRHA,对保留的GDA近端和远端RRHA行重建。结果 两例病人手术时间均约为405 min,失血约400 mL,病例2输血4单位红细胞。除外病例2术后出现一过性肝脏酶增高,两例病人均未发生胰瘘、胆瘘、腹腔感染等并发症。术后CT动脉成像检查提示重建动脉通畅,肝脏血供良好。分别于术后第14天和第21天出院。结论 如术前评估全面,术中处理妥当,则联合RRHA切除及自体GDA重建的胰十二指肠切除术安全可行。 相似文献
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卫积书 《中国实用外科杂志》2015,35(8):914
<正>德国海德堡大学(Heidelberg University)外科医院是欧洲胰腺外科中心,也是德国最有影响力的外科医院之一。普通外科有166张床,胰腺外科手术量在欧洲遥遥领先。2013年,该院器官移植例数在德国位居第一,完成住院手术2935例,其中胰腺手术740例(Whipple手术253例),肝脏手术264例(肝移植109例),肾移植143例。2013年,笔 相似文献
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并殖吸虫分子生物学研究新进展 总被引:1,自引:0,他引:1
随着分子生物学的发展,对并殖吸虫的研究也发生了相应的变化。从原来的偏重于生活史和形态学的研究提高到分子生物学的研究水平。特别是对于有争议的虫种的鉴定等方面。下面将近年来对并殖吸虫分子生物学研究的一些新进展加以概述: 相似文献