抗菌药物对小白鼠感染细菌的保护实验的研究

目的　在感染的小白鼠体内测定药物的保护作用。　方法　注射菌液和药物于小白鼠体内 ,测定药物的保护浓度。　结果　测定 ML D10 0 ,实验菌菌液浓度要达到 10 8CFU/ml以上。　结论　此药物对 3种 11株不同细菌具有保护作用。     

日本血吸虫中国株琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白真核重组体的构建及其免疫小鼠的保护性研究

目的研究日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白(SjSDISP)全长编码基因DNA疫苗诱导小鼠的免疫保护性效果。方法将全长SjSDISP基因克隆到真核表达载体pcDNA3上,构建真核表达质粒pcDNA3-SjSDISP,用重组裸DNA免疫昆明小鼠3次,间隙2W,末次免疫后第二周进行日本血吸虫尾蚴攻击感染,感染后42 d处死小鼠,剖杀冲虫,计算减虫率和减卵率。结果经双酶切、PCR和测序验证,表明真核表达质粒pcDNA3-SjSDISP构建成功。动物免疫保护性实验结果显示:pcDNA3-SjSDISP疫苗组减虫率较低,与对照组相比减虫效果不明显(P>0.05);但在每克肝卵、每克粪卵和每雌子宫内卵方面,与对照组相比差异均具有显著性(P<0.01)。结论日本血吸虫琥珀酸脱氢酶铁硫蛋白DNA疫苗可能主要在抗血吸虫卵胚发育或抗生殖起作用,具有潜在的疫苗研究与开发价值。     

日本血吸虫合抱相关未知功能基因SJCHGC00821的克隆及生物信息学分析

目的 克隆与日本血吸虫合抱相关但未知功能的新基因SJCHGC00821，构建其真核表达载体，并应用生物信息学初步探讨其功能。方法 应用PCR技术从日本血吸虫成虫cDNA文库中扩增SJCHGC00821基因全长ORF，将其亚克隆到真核表达载体pcDNA3中，通过PCR、限制性酶切分析及测序进行鉴定。应用生物信息学初步分析其细胞定位、蛋白序列、结构域及功能。结果 获得日本血吸虫合抱相关未知基因SJCHGC00821的克隆，序列分析结果提示该cDNA序列含有一个597bp的完整阅读框序列，编码198个氨基酸，其编码蛋白的理论分子量为22．76kDa，等电点为4．84。二级结构分析预测提示其具有一定抗原性。结论 成功地克隆了日本血吸虫SJCHGC00821基因全长ORF，构建了其pcDNA3真核表达载体，为进一步研究其结构与功能创造了条件。     

α-蒎烯对白色念珠菌生物合成的影响

用同位素掺入试验研究α－蒎烯对白色念珠菌生物合成的影响。结果发现：α－蒎烯能明显地抑ＴｄＲ,ＵＲ,亮氨酸和ＮａＡｃ４种标记前体的掺入。提示α－蒎烯对白色念珠菌的生物合成有显著的抑制作用,其抗菌机制为通过抑制白色念珠菌细胞膜中麦角固醇,胞壁中几丁质,多糖的合成及抑制核酸ＤＮＡ,ＲＮＡ的合成,从而起到杀菌作用。     

沙眼衣原体感染对HeLa细胞MHCⅠ、Ⅱ类分子表达的影响

目的　探讨沙眼衣原体 (Chlamydiatrachomatis ,Ct)K型感染对HeLa细胞MHCⅠ、Ⅱ类分子表达的影响。方法　用免疫荧光法和流式细胞术等方法 ,对Ct感染和未感染的HeLa细胞MHCⅠ类分子表达水平和IFN γ诱导的HeLa细胞MHCⅡ类分子表达水平进行检测 ,同时对IL 10抗体的影响也作了研究。结果　Ct感染细胞MHCⅠ类分子表达水平和IFN γ诱导的感染细胞MHCⅡ类分子表达水平 ,随Ct感染剂量增加和感染时间延长而下降 ,与正常未感染细胞比较上述差异均具有统计学意义 (P <0 .0 1)。IL 10抗体能部分抑制感染细胞MHCⅠ类分子表达下调 ,但对IFN γ诱导的感染细胞MHCⅡ类分子表达下调无显著影响。结论　Ct感染可下调感染细胞MHCⅠ类分子和IFN γ诱导的细胞MHCⅡ类分子表达水平 ,这可能是造成衣原体持续感染的重要原因。感染过程中分泌的IL 10在下调感染细胞MHCⅠ类分子表达过程中起一定作用 ,而对IFN γ诱导的感染细胞MHCⅡ类分子表达水平下调无显著性影响     

日本血吸虫天然抗原分子的柱层析分离纯化与鉴定

目的分离纯化日本血吸虫成虫(AWA)和未成熟虫卵(SIEA)可溶性抗原中的单一蛋白，为血吸虫病免疫诊断、预防提供新的抗原分子。方法柱层析分离纯化成虫和未成熟虫卵可溶性抗原，SDS—PAGE及银染色进行分析鉴定。结果得到了三种不同大小血吸虫分子抗原AwA18000u，SIEA42000u，SIEA130000u。结论实验证明柱层析法是一种快速分离纯化血吸虫单一组分抗原简单而有效的方法。     

血吸虫病临床治疗与抗病疫苗研究现状

血吸虫病流行于世界许多国家和地区，受威胁人口高达6亿，感染人数2亿，全球每年至少有2万余人死于血吸虫病。2000多年前的长沙马王堆西汉女尸体内发现的日本血吸虫卵，足以证明日本血吸虫病在中国流行年代之久远n1。日本血吸虫病曾流行于我国南方12省（市），经过50余年的防治，取得了巨：赶的成绩。目前，湖南、湖北、江西、安徽、江苏、四川和云南等7省尚未达到传播控制标准。本文仅就我国血吸虫病的临床治疗与抗病疫苗研究现状概述如下。     

丙型肝炎病毒5''端非编码区的5''端序列对其翻译启动活性的影响

目的分析丙型肝炎病毒(HCV)5’端非编码区(5’NCR)的5’端序列对其翻译启动活性的影响。方法用PCR技术扩增获得全长和5’端17个碱基缺失的HCV5’NCR片段,定向克隆至表达质粒pSEAP2Control的SEAP基因上游,分别构建成全长和5’端截短的HCV5’NCR调控SEAP表达的重组质粒pNCRSEAP和pdNCRSEAP。用脂质体方法将重组质粒转染至肝细胞株QSG7701,并用化学发光法检测SEAP的表达。结果酶切和测序结果表明,重组质粒pNCRSEAP和pdNCRSEAP构建成功。表达的发光强度分别为390482±42856和635265±52285RLU,二者有差异显著性(P<0.01)。结论HCV5’NCR的5’端碱基缺失提高了它对SEAP基因的翻译启动活性,为进一步分析HCVIRES的结构提供了实验基础。     

日本血吸虫中国株次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶真核重组质粒的构建及其动物免疫保护性研究

目的 克隆日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（SjHGPRT）全长编码基因，研究其DNA疫苗诱导小鼠的免疫保护作用。方法 将全长SjHGPRT基因克隆到真核表达载体pcD—NA3上，构建真核表达质粒pcDNA3-SjHGPRT，用经双酶切、PCR和测序鉴定正确的真核表达质粒免疫昆明小鼠3次，每次间隙2周，第3次免疫后第2周进行日本血吸虫尾蚴攻击感染，感染后42d处死小鼠，收集成虫、肝脏和24h粪便，计算减虫率和减卵率。结果 成功构建真核表达质粒pcDNA3-SjHGPRT。动物免疫实验结果显示：pcDNA3-SjHGPRT疫苗组减虫率23．17％、肝减卵率41．64％、粪减卵率40．57％，每雌虫子宫内卵减卵率26．95％，与对照组相比差异均具有统计学意义（P〈0．05，P〈0．01）。每雌虫子宫内卵减卵率及肝、粪减卵率明显高于减虫率，表明pcDNA3-SjHGPRT疫苗可能主要在抗血吸虫卵胚发育或抗生殖方面起作用。结论 日本血吸虫次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶DNA疫苗可诱导抗血吸虫卵胚发育或抗生殖作用，具有潜在的疫苗研究与开发价值。