反义RNA靶序列对大肠杆菌ftsZ基因沉默效果的影响

目的筛选出能够有效引起大肠杆菌ftsZ基因沉默的反义RNA片段。方法利用携带paired termini结构的质粒模仿天然asRNA的二级结构表达稳定的反义RNA,通过平板生长表象观察、菌体形态变化及液体培养生长速率变化考察了不同反义靶序列对大肠杆菌ftsZ基因沉默效果的影响。结果 ftsZ1、ftsZ4和ftsZ5 3个反义RNA片段可有效引起相关基因沉默。结论获得的ftsZ1、ftsZ4和ftsZ5 3个反义RNA片段可进一步用于ftsZ特异性酶抑制剂的超敏全细胞模型构建。     

针灸治疗脑卒中后失语的国内RCT文献质量评价

目的:评价国内针灸治疗脑卒中后失语的临床试验状况,为针灸治疗脑卒中后失语的系统评价奠定基础。方法:通过机检和手检获得发表的针灸治疗脑卒中后失语的临床文献,按照中国循证医学中心/Cochrance手册推荐的标准分析评价每一篇文献,标准规定具有随机化方法,正确对照,合适样本量,国际或全国性诊断标准,客观疗效判定标准,明确统计方法的文献为符合条件的文献。运用随机对照实验36篇。结论:针灸治疗脑卒中后失语的临床随机对照研究(RCT)质量需待提高,为进一步开展系统评价提供必要的前提。     

醒脑开窍针刺法配合语言康复治疗脑梗死致运动性失语30例临床观察

目的观察醒脑开窍针刺法配合语言康复治疗对脑梗死致运动性失语患者语言功能恢复的影响。方法将90例患者随机分为醒脑开窍针刺法配合语言康复训练组(针康组)30例、单纯醒脑开窍针刺法(针刺组)30例与单纯语言康复训练组(对照组)30例。采用西方失语症成套测验(WAB)来评定患者的语言功能,作为诊断和疗效判定依据,观察患者失语商(AQ)、自发言语、口语理解、复述、命名4项基本语言功能及日常生活交流能力(CADL)。结果治疗后,3组患者AQ和CADL、自发言语、口语理解、复述及命名的评分较治疗前与对照组比较差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。治疗后针康组患者AQ、CADL、自发言语、复述和命名与对照组比较有统计学差异(P0.05或P0.01)。针刺组CADL、复述和命名的评分与对照组比较差异有统计学意义(P0.05)。治疗后针康组与针刺组各指标比较,差异均无统计学意义(P0.05)。结论醒脑开窍针刺法配合语言康复训练治疗对脑梗死致运动性失语患者有积极作用,且提示对自发言语、复述、命名以及日常生活交流能力方面有治疗优势。     

5-酮基avermectin基因工程菌的构建

采用基因插入失活的方法，将1．5kb安普霉素抗性基因插入1．8kb aveF基因内部SalI位点，构建重组质粒pPC-5，并转化除虫链霉菌D2—14，获得基因工程菌株AV—F1。经HPLC分析，发现该菌株主要产生两个组分，分别为5-酮avermectin 1a和5-酮avermectin 2a，还产生一个小组分为acermectin Bla。5-酮avermectin基因工程菌株的构建成功，为化学合成新的avermectin衍生物提供了可利用的原料来源。     

丽水市6496名儿童眼屈光筛查分析

为了解丽水市区幼儿园儿童眼屈光异常情况及特点,为以后开展儿童眼卫生保健,并制定相应的干预措施提供依据,于2006年4～6月对市区的6 498名3～6岁儿童进行眼屈光筛查,现报告如下.     

高效液相色谱法测定棒状链霉菌发酵液中克拉维酸的含量

利用克拉维酸与咪唑试剂的衍生化反应,建立了用高效液相色谱仪测定发酵液中克拉维酸含量的方法.色谱条件为采用Hypersil ODS2柱(5μm,4.6mm×200mm),流动相为0.1mo1/LKH2PO4甲醇(946),流速1.0ml/min,检测波长311nm.结果表明,克拉维酸量在1～10.0μg范围内,该方法的线性关系及测定结果的精密度、回收率均良好,是一种简便、快速、有效的方法.     

钩体LPS生物合成与装配途径及相关基因分析

目的 预测问号钩体黄疸出血型赖株脂多糖(LPS)合成、装配途径，并对其中几个关键基因的特征进行深入分析。方法 使用NCBI／BlastX，PtoDom／Blast，Jpred^2，TMHMM对问号钩体黄疸出血型赖株全基因组ORF基因所编码蛋白进行在线分析，并使用Bioedit，Pep Tool软件进行蛋白质一、二级结构分析。结果 确定了脂质A和核心多糖生物合成基因lpxA、lpxB、lpxC、lpxD、lpxK、kdsM、kdsB、kdtA、Int、htrB和O—抗原生物合成基因簇rfb locus等以及装配、跨膜转运中的基因rfbP、rfbX、rfc、rfaL、rfe绘制了LPS合成及装配途径示意图。并对合成和装配途径中几个关键的基因编码蛋白(LpxA、Rfc、RfbX、RfaL)的二级结构、跨膜区域、结构域等进行了分析。结论 问号钩体黄疸出血型赖株LPS合成、装配途径与典型的革兰阴性菌，如大肠埃希菌K—12相似，主要差异在于钩体特殊的脂肪酸代谢途径和O—抗原多糖结构。该研究为进一步探讨钩体LPS基因功能及其与致病性关系奠定基础。     

透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在那西肽产生菌—活跃链霉菌中的表达

目的将透明颤菌血红蛋白基因(vgb)整合到那西肽产生菌—活跃链霉菌(Streptomyces actuo-sus)的染色体上进行表达,从而提高菌体对溶解氧的利用,提高那西肽的发酵产量。方法采用分子生物学方法构建了携带vgb的重组质粒pZV02,采用接合转移的方法将其导入那西肽产生菌—活跃链霉菌中,采用抗生素抗性标记筛选法获得了基因重组菌株。结果在低溶氧的发酵条件下,重组菌株的那西肽产量显著高于对照菌株。结论 vgb在活跃链霉菌中的表达,可以改善菌体对溶解氧的利用,在低溶氧的条件下可以提高发酵产物那西肽的产量。     

磁场在麦迪霉素菌种选育中的应用研究

本文论述磁场对麦迪霉素产生菌的磁致诱变效应。在所采用的磁场条件处理下,菌的死亡率在60%以上,正变率范围为2.0%～47.4%,变异率在10%以上。摇瓶初筛,生产能力高于对照菌株的菌株数占过筛菌株数的18.6%,其中生产能力提高30%以上的菌株数占2.8%.     

诺西肽产生菌活跃链霉菌的原生质体制备与再生

目的研究诺西肽产生菌活跃链霉菌的原生质体制备与再生的最适条件。方法使用溶菌酶脱去细胞壁制备原生质体,并考察原生质体制备和再生的各种影响因素。结果确定了原生质体制备的条件:一级培养采用种子培养基,培养30 h,转种量的体积分数为5%;二级培养采用R2YE培养基,培养时间为32 h,最适甘氨酸质量浓度为6.0 g.L-1,最佳溶菌酶质量浓度为1.5 g.L-1,酶解时间为60 min,原生质体再生率达到5.3%。结论上述条件为活跃链霉菌原生质体制备与再生的最适条件,该条件的建立为活跃链霉菌原生质体的诱变育种奠定了基础。