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1.
目的通过对活跃链霉菌那西肽生物合成基因簇中的nshA基因进行内部片段缺失,考察其对那西肽生物合成的影响。方法利用重叠延伸PCR(Gene splicing by overlap extension PCR,SOE-PCR)的方法失活nshA基因,并构建具有接合转移功能的大肠杆菌-链霉菌重组质粒pSH03,通过接合转移将重组质粒pSH03导入到活跃链霉菌细胞内,并通过同源交换形成活跃链霉菌基因组上的nshA基因失活。采用摇瓶进行发酵,采用HPLC的方法检测发酵液中诺西肽的含量。结果重组菌株的那西肽发酵产量较对照菌株有明显提高。结论 nshA基因对那西肽的生物合成有负调节作用,该基因的失活,有利于那西肽生物合成酶结构基因的表达,使诺西肽的产量有明显提高。  相似文献   
2.
解吸方法对头孢菌素C提取质量的影响   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的研究不同的解吸方法对头孢菌素C提取质量的影响。方法将头孢菌素C发酵上清液通过XAD16大孔吸附树脂进行吸附,然后分别采用单一浓度解吸(均一解吸)及梯度浓度解吸的方法进行解吸。结果梯度浓度解吸与单一浓度解吸相比,解吸液的纯度提高3.23%,解吸收率提高2.3%。结论梯度浓度解吸法比单一浓度解吸法具有更多的优势,值得推广和应用。  相似文献   
3.
近年来,随着城区面积的扩大,人口的增多及儿童相对集聚,私立托幼机构也不断增加,这给儿童保健工作和管理带来新的挑战。为了解该类机构卫生保健工作现状,确保儿童身心健康,2007年12月对辖区内私立托幼机构进行了调查。1材料与方法1.1对象辖区内72家私立托幼机构,包括68家幼儿园  相似文献   
4.
1313名婚前检查对象HBV感染情况分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:为了解丽水市莲都区婚育人群中HBV感染情况,探讨采取切实可行的措施,阻断在配偶之间及下一代中的传播。方法:对2008年1—6月所有婚检对象的血清标本进行乙肝血清标志检测,采用SPSS10.0软件将测得数据进行统计学分析。结果:HBsAg阳性率男性高于女性,农村高于城市,文化程度越低HBsAg阳性率越高,而抗-HBs的阳性率则恬好相反。结论:加强对农村居民进行乙肝病毒传播的干预尤为迫切。  相似文献   
5.
2005年7月10—25日,丽水市区某幼儿园发生1起腮腺炎爆发疫情,临床诊断腮腺炎病例11例,现报道如下。  相似文献   
6.
目的观察LJK-11对HER2高表达细胞的作用。方法检测LJK-11对不同肿瘤细胞作用的剂量效应;用Western blot检测药物引起的细胞内酪氨酸激酶信号表达变化。结果随着药物浓度的增加,LJK-11对肿瘤细胞的增殖抑制作用逐渐明显,并能够引起肿瘤细胞的凋亡;Western blot检测显示受体酪氨酸激酶HER2磷酸化表达降低。结论LJK-11可能是一种新型的酪氨酸激酶抑制剂,这一作用机制将为研制出新型的抗肿瘤药提供理论依据。  相似文献   
7.
目的研究井冈霉素产生菌吸水链霉菌井冈变种的原生质体制备与再生的最佳条件。方法使用溶菌酶水解菌体细胞壁法,分别考察影响吸水链霉菌井冈变种原生质体的制备与再生的各种因素。结果在R2YE液体培养基中,一级菌丝体的最佳培养时间为24 h,二级菌丝体的最佳培养时间为16 h,最佳甘氨酸质量浓度为5 g.L-1,最佳溶菌酶质量浓度为2 g.L-1,最佳酶解时间为60 min,最佳再生培养基为R2YE,原生质体的再生率最高可达到15.79%。结论本实验确定了吸水链霉菌井冈变种的原生质体制备与再生的最佳条件,能够得到较高的再生率。  相似文献   
8.
夏枯草植物内生真菌CPCC 480171抗肿瘤活性成分的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
利用硅胶柱色谱、凝胶色谱、制备高效液相色谱等方法,对一株分离自夏枯草内生真菌中具抗肿瘤活性代谢产物进行研究,从菌株发酵产物中分离得到单组份,根据理化性质及有机波谱鉴定其化学结构.结果:分离得到3个活性化合物,结构鉴定分别为:链格孢毒素Altertoxin-I,4',5,7-三羟基异黄酮,4',7-二羟基异黄酮.对其进行了抗肿瘤活性实验.分离得到的3个化合物均具有不同程度的抗肿瘤作用.  相似文献   
9.
目的提高棒状链霉菌的克拉维酸生产能力 ,去除副产物头霉素C。方法将安普霉素抗性基因片段插入到 4 7kb的lat pcbAB基因片段中 ,采用接合转移方法对棒状链霉菌中头霉素C生物合成的关键基因lat基因进行了置换。结果与结论经PCR验证 ,染色体上正常的lat pcbAB基因被插入失活的基因所替代。对重组菌株的发酵产物进行HPLC检测 ,发现所有的重组菌株均不再合成头霉素C ,并且重组菌株C35 85 lat ::apr、C2 5 1 lat::apr和C16 6 lat::apr的克拉维酸产量较出发菌株分别提高了 2 6 7 6 8%、4 3 6 9%和 35 0 5 %。结果表明基因插入失活是去除多余组分 ,提高目标组分产量的可行途径  相似文献   
10.
目的构建具有双拷贝tylF基因的泰乐菌素基因工程菌,以解决泰乐菌素基因生物合成的限速环节,提高泰乐菌素的发酵产量。方法通过SOE-PCR获得PermE-tylF基因,构建随机整合型重组质粒pBH05,通过接合转移将PermE-tylF基因及其载体随机整合到弗氏链霉菌的基因组中,并通过抗性筛选获得重组菌株D-120。将重组菌株D-120进行摇瓶发酵,采用生物效价测定的二剂量法测定泰乐菌素的发酵单位。结果在相同的发酵条件下,重组菌株泰乐菌素的发酵单位较出发菌株提高32.7%。结论该基因工程菌的构建改善了泰乐菌素生物合成的限速环节,大幅度提高了泰乐菌素的发酵效价。  相似文献   
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