肥胖患儿体内抗氧化剂 抗氧化酶和丙二醛的检测及分析

目的探讨肥胖是否会引起儿童体内的氧化应激加剧以及可能的机制。 方法浙江大学医学院附属第二医院等单位于2004年10月至2005年3月，采用病例对照研究设计，用分光光度分析法检测浙江大学附属第二医院确诊的80例肥胖儿童(OCs)和浙江大学附属儿童医院80例健康儿童(HCs)的血浆维生素C(VC)、维生素E(VE)、β 胡萝卜素(β CAR)水平以及红细胞超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性和红细胞丙二醛(MDA)水平。 结果与HCs组VC、VE、β CAR、SOD、CAT和MDA均值比较，OCs的VC、VE、β CAR、SOD和CAT均值均显著降低(P<0.001)，MDA均值显著增高(P<0.001)；对80例肥胖儿童控制年龄和肥胖病程的偏相关分析提示，随着BMI升高，VC、VE、β CAR、SOD和CAT值逐渐降低(P<0.05~0.01)，MDA值逐渐增高(P<0.001)；对反映肥胖儿童氧化应激加剧的可靠性分析表明，6项生化指标的可靠性系数为0.7152，P<0.001，标化可靠性系数为0.9018，P<0.001。 结论肥胖儿童体内存在着氧化应激加剧，此氧化应激加剧与体重指数(BMI)密切相关。     

细胞移植及其在耳蜗疾病中的应用

本综述了近年来体细胞移植技术在心脏、中枢神经系统、内分泌系统、肝脏疾病中应用，阐述了内耳体细胞移植技术的可行性与存在的问题，提出了细胞移植技术对耳聋防治可能具有广阔的应用前景。     

侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的蛋白质差异表达

目的 建立分辨率高和重复性好的侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定出其差异表达的蛋白质.方法 利用固相pH梯度双向凝胶电泳分离侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的总蛋白质,凝胶经银染显色后,运用ImageMaster 2D图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)及数据库搜索鉴定部分差异蛋白质点.结果 得到了分辨率较高、重复性好的侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的双向凝胶电泳图谱.比较分析图谱,初步对其中30个点进行了肽质指纹图分析,鉴定出一些与细胞周期调控、信号传导等有关的差异蛋白质.结论 建立了分辨率较高且重复性较好的侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的双向凝胶电泳图谱,并识别鉴定出一些侵袭性与非侵袭性垂体腺瘤的差异表达的蛋白质,为进一步筛选侵袭性垂体腺瘤的蛋白质表达数据库提供了基础.     

人支气管上皮癌变各阶段组织蛋白质双向电泳图谱的差异分析

目的探讨肺鳞癌癌前病变恶性转化的机制. 方法应用脱氧胆酸-三氯醋酸(deoxycholate-trichloroaetic acid,DOC-TCA)法提纯支气管上皮癌变各阶段组织总蛋白质,采用固相pH梯度(immobilized pH gradient, IPG)双向凝胶电泳(two-dimensional electrophoresis, 2-DE)分离总蛋白质,凝胶经银染显色后,ImageMaster 2D图像分析软件进行比较分析、识别差异表达的蛋白质,应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry, MALDI-TOF-MS)得到相应的肽质指纹图谱(peptide mass fingerprint,PMF),然后搜索数据库鉴定部分差异蛋白质点. 结果①重复性检测表明同一例鳞状上皮化生组织的三块凝胶的平均点数为1 216 ±75 ,平均匹配点数为1 082±67,匹配率达89.3% , 且3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在IEF方向的偏差是(0.865±0.247)mm ,在SDS-PAGE方向上的偏差为(0.971±0.104)mm,由此获得了分辨率较高、重复性较好的人支气管上皮癌变各阶段组织的双向凝胶电泳图谱,正常上皮、鳞状化生、不典型增生和上皮浸润癌组织凝胶的平均蛋白质点数依次为1 190±36、1 227±39、1 272±41、1 326±52;②比较分析人支气管正常上皮、鳞状化生、不典型增生和上皮浸润癌组织各7例的双向凝胶电泳图谱,发现癌变前一阶段与后一阶段两两间的差异蛋白点分别为 34±16、41±15、46±13;③对24个差异蛋白质点进行了肽质指纹图分析,鉴定出一些与细胞增生、分化、细胞周期调控、信号传导等有关的蛋白质. 结论本研究建立了分辨率高、重复性较好的人支气管上皮癌变各阶段组织的双向凝胶电泳图谱,识别并鉴定了一些与支气管上皮癌变相关的差异表达的蛋白质,为进一步探讨肺鳞癌癌变机制,筛选肺鳞癌的特异性分子标志物奠定了初步基础.     

Egr-1基因与肿瘤基因-放射治疗的关系

目的：回顾近几年文献，综述Egr-1基因的结构、功能、与肿瘤及肿瘤基因-放射治疗的关系。方法：分析相关文献23篇。结果：Egr-1基因调节多种下游基因的转录，参与调节正常细胞的增殖与分化，与某些肿瘤发生有关。另外Egr-1有放射致敏性，已尝试用于多种肿瘤的基因-放射治疗。结论：Egr-1基因具有多种重要功能，利用其启动子的放射诱导性，可实现肿瘤的靶向性基因-放射治疗。     

5-杂氮-2′-脱氧胞苷对鼻咽癌细胞株细胞周期及14-3-3σ基因甲基化的影响

目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷（5-aza-2dC）对鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2、5-8F、6-10B增殖、凋亡和细胞周期分布的影响,并进一步分析5-aza-2dC处理对14-3-3σ基因甲基化状态的影响。方法用不同浓度5-aza-2dC处理鼻咽癌细胞,MTT实验观察细胞生长曲线,用流式细胞仪检测细胞周期分布和凋亡比例,用甲基化特异性PCR（MSP）分析14-3-3σ基因甲基化状态。结果5-aza-2dC对4株细胞均有生长抑制作用,CNE1和6-10B细胞对药物敏感性高于CNE2和5-8F。5-aza-2dC处理使4株细胞凋亡率出现剂量依赖性的增加,CNE1和6-10B细胞对药物敏感性高于CNE2和5-8F。经5-aza-2dC处理后,CNE1、CNE2、6-10B细胞出现不同程度的G0/G1期阻滞,而5-8F表现为G0/G1期和G2/M期双期阻滞。不经5-aza-2dC处理情况下4株细胞14-3-3σ基因均存在不同程度的甲基化,5-aza-2dC处理能够使14-3-3σ基因去甲基化。结论5-aza-2dC具有抗鼻咽癌作用,抑制作用强弱可能与鼻咽癌分化程度和转移潜能有一定关系,其机制可能与使14-3-3σ等抑瘤基因去甲基化有关。     

人肺癌癌旁支气管上皮的病理学改变及临床意义

对28例手术切除的肺癌癌旁支气管上皮进行病理组织学及CEA免疫组化染色观察,并与慢性炎症性肺疾病的相应支气管上皮病变比较,结果表明:(1)肺鳞癌癌旁支气管上皮病变广泛且较严重,支气管上皮鳞状化生、非典型增生与肺鳞癌发生有密切关系;(2)支气管上皮角化鳞状化生是肺鳞癌独有的病变;(3)随着癌旁支气管上皮病变加重,CEA阳性率逐渐升高;(4)肺璩癌癌旁支气管上皮病变较少。提示:支纤镜活检支气管上皮有鳞状化生,尤其有角化鳞化、不典型增生者,应作为肺癌高危对象进行随访,必要时作CEA免疫蛆化染色,如为阳性,更应高度警惕癌变。     

肿瘤分泌蛋白的临床研究进展

蛋白质作为生命功能的执行者，在内质网上合成后，运输至高尔基体内进一步加工和分选，然后被运送到相应的细胞器中，或被分泌到细胞外发挥功能，该过程称为细胞分泌，其中分泌到细胞膜外的蛋白质称为分泌性蛋白或分泌蛋白。分泌性蛋白占人类蛋白质组的十分之一，其中细胞蛋白的20％～25％是可分泌蛋白。分泌蛋白最基本的结构特点是：N端含有信号肽结构，它指导分泌蛋白到内质网膜上合成。Blobel因提出信号肽假说获1999年诺贝尔生理医学奖。分泌蛋白种类繁多，包括血液和胞外基质中很多蛋白因子，如：     

颅眶沟通性支气管源性囊肿一例

患者 男,66岁.左眼视力进行性下降2个月入院.查体:左眼睑下垂,眼裂小,眼球内上方眶内可扪及一质韧光滑的肿物,眼球受推挤而轻度向左外下方斜视,各方向活动稍受限,双瞳孔直径2.5 mm,光反射灵敏.视物重影,辐辏反射差,视力0.2.头颅CT示左前颅底及眶内椭圆形等密度肿物,眶壁破坏,挤压左眼球,周围无水肿.头颅MRI示:左前颅底及眶内椭圆形肿物,等T1长T2信号,冠状位见肿瘤自颅内突入眶内,增强扫描未见明显强化.术前拟诊:表皮样囊肿.     

蛋白质组学技术分析5-aza-2dC处理白血病细胞HL-60前后的差异表达蛋白质

目的:研究甲基化转移酶抑制剂5-杂氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycitydine, 5-aza-2dC)对人急性髓系白血病细胞HL-60细胞蛋白质表达谱的影响,探讨5-aza-2dC抗急性髓系白血病作用的机制.方法:采用二维凝胶电泳(2-DE)技术分离5-aza-2-dC处理与未处理HL-60细胞的总蛋白质,PDquest 图像分析软件识别差异蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定差异蛋白质点. 然后采用Western 印迹检测差异蛋白质半乳糖凝集素1(Galectin-1) 在药物处理与未处理HL-60细胞中的表达水平.结果: 建立了5-aza-2dC 处理与未处理HL-60 细胞蛋白质的2-DE 图谱,识别了35个差异表达的蛋白质点,鉴定了27个差异表达的蛋白质,其中包括Galectin-1在内的21个蛋白质在5-aza-2dC 处理后的HL-60 细胞中表达上调,6个蛋白质表达下调或缺失.Western 印迹结果证实Galectin-1在5-aza-2dC 处理HL-60细胞中表达上调.结论:21个表达上调蛋白质的编码基因可能是HL-60细胞的甲基化失活基因,它们可能与急性髓系白血病发病以及5-aza-2-dC抗人急性髓系白血病细胞作用有关.