明胶酶原A在实验性肝纤维化过程中表达变化

目的研究实验性肝纤维化过程中明胶酶A(mmp-2)酶原蛋白表达的动态变化.方法建立四氯化碳大鼠肝纤维化模型,采用Western印迹法和免疫组化方法,对肝纤维化不同阶段肝内mmp-2的酶原蛋白的表达水平与分布进行了检测.结果在正常大鼠肝组织中有mmp-2的酶原表达.在肝纤维化发生发展过程中mmp-2酶原蛋白表达水平逐渐增强,至肝纤维化中期到达最高峰,到肝纤维化晚期及肝硬变阶段其表达较中期下降,但仍高于正常对照水平.正常肝组织内,mmp-2的表达主要位于汇管区的胆管壁和毛细血管壁及肝窦壁的间质细胞;纤维化时,增生的纤维间隔附近亦有较高表达.结论 mmp-2在肝纤维化的发生、发展直至肝硬变形成过程中发挥着重要作用.     

基于CTA断层图像直肠及周围结构数字模型的重建及三维可视化研究

目的 寻求基于CTA断层图像重建直肠及周围结构数字模型及三维可视化的方法.方法 基于空气灌肠造影及CTA血管造影技术,64排螺旋CT对胸12至股骨中上部分沿横断面在动脉期及静脉期连续跟踪扫描.Mimics软件基于856层Dicom 3.0标准CT连续断层二维图像,分别对直肠及周围结构等各种组织进行三维重建.结果 建立直肠及周嗣结构三维数字模型.结论 薄层CT扫描技术和Dicom 3.0标准的应用使数字模型的建立更为精确,空气灌肠造影及CTA血管造影技术方便建立肠管及血管结构.Mimics软件基于CT扫描图像建立人体各种结构更为方便,获得数字模型可为解剖教学、手术培训提供医疗教学平台.     

重组腺病毒介导的KDR-CDglyTK融合基因系统对胃癌细胞增值的影响

目的 探讨腺病毒介导KDR启动子驱动的融合基因体系对人胃癌细胞SCG7901增值的影响.方法 重组腺病毒AdEasy-KDR-CDglyTK体外感染表达KDR的SCG7901细胞株和对照组不表达KDR的HepG2细胞株,并给予不同浓度的前药GCV(ganciclovir)和/或5-FC(5-fluorocytosine),观察该体系对SCG7901细胞生长增值的影响.结果 携带双自杀基因(CDglyTK)和报告基因(GFP)的重组腺病毒载体,感染复数为100时,95%以上的受感染SCG7901和HepG2细胞中有GFP表达.已转染腺病毒的SCG7901和HepG2细胞同未转染的各自细胞在细胞生长方面无显著性差异(P＞0.05).在前药应用下,已转染腺病毒的SCG7901和HepG2细胞表现出对前药不同的敏感性:表达KDR的SCG7901细胞对前药具有较高的敏感性,与前者相比,不表达KDR的HepG2细胞对前药不敏感(P＜0.01).融合基因的疗效优于单一自杀基因(P＜0.01).结论 KDR基因启动子可以调控融合基因体系选择性地杀伤人胃癌SCG7901细胞,抑制其增值.     

慢病毒介导的双自杀基因对大肠肿瘤细胞的靶向杀伤作用

目的 研究慢病毒介导的KDR启动子驱动CD/TK双自杀基因系统对大肠肿瘤细胞选择性杀伤作用.方法 构建的重组FGW-KDRP-CD/TK慢病毒载体在293T细胞包装扩增后,获得病毒颗粒,体外感染表达KDR的LOVO细胞株和不表达KDR的LS174T细胞株,以RT-PCR方法检测转基因细胞CDglyTK的表达,然后给予不同浓度的前药5-FC及GCV处理,观察该体系对不同细胞株的杀伤效应.结果 重组体对各细胞株的感染率相似,RT-PCR方法检测发现:除LS174T细胞外,LOVO细胞有目的基因CDglyTK的表达.LOVO与LS174T细胞株对前药敏感性有显著性差异(P＜0.001),双自杀基因的疗效优于任一单自杀基因的疗效(P＜0.001).结论 KDR启动子可调控双自杀基因系统选择性杀伤表达KDR的大肠肿瘤细胞.     

扇形腹壁悬吊器在免气腹腹腔镜手术中的应用

自行设计、研制了一种免气腹装置——机械式扇形腹壁悬吊,由固定架、牵拉杆和扇型腹壁牵拉器3部分组成。采用免气腹腹腔镜技术实行了7种35例免气腹手术,结果如附表。 1991年Hagai成功地进行了国际上首例免气腹腹腔镜胆囊切除术,王秋生等1995年在国内首次报道了他们自制的免气腹装置在6例腹腔镜外科手术中的应用情况。我们研制的免气腹装置具有适用范围广操作简便,建立腹内手术空间较充分,易清洁,耐高温消毒等优点。免气腹腹腔镜手术的优越性是:(1)避免了CO_2气腹并发症;(2)消除了气腹时密闭的腹内空间对手术的影响与限制;(3)手术者可不必顾及因‘漏气’(腹内CO_2)气体外漏)所造成的手术空间过小对手术操作的影响;术中还可经腹壁小切口使用熟悉的部分开腹手术器械,降低了腹腔镜手术的难度,提高了手术安全性;(4)降低了腹腔镜手术费用。免气腹腹腔镜技术的潜在缺陷是形成的腹内手空间相对较小,术野易被大网膜和管遮挡;克服这一缺陷的对策是①争取选用硬膜外麻醉;②术前灌肠;③在允许范围内尽量增加腹壁上提高度;④调整腹壁提拉器的方向、角度,使之正手术野上方;⑤调整病人体位,借助腹内脏器的重力协助显露;⑥经腹壁附加之1cm小切口放入五指状拉勾;⑦辅以低压气腹。     

脾结核合并胰尾结核一例报告

黄某,男,15岁。因左上腹部隐痛伴寒战、高热、消瘦两个月,于1990年11月24日以“脾脓肿”收入院。 体检:T36.5℃,P86次/min,BP13.9/9.9kPa。体重43kg,面色萎黄,慢性消瘦病容。心肺未见异常。脾上界位于左锁骨中线第七肋间,下界于肋弓下2cm,边缘钝,中等硬度,轻度压痛。实验室检查:RBC3.82×10~(12)/L,WBC11.9×10~9/L,Hb100g/L,PT150×10~8/L,ESR85mm/h;肝功正常。AKP79Iu/L,r-GT14Iu/L,白蛋白36g/L,球蛋白39g/L,IgG2.14g/L,     

加速康复外科理念联合微创技术在结直肠癌手术中的应用价值

结直肠癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,据我国最新研究报道,其发病率及死亡率均呈上升趋势[1].对于结直肠癌的临床治疗,尽管放化疗、分子靶向药物治疗及综合辅助治疗愈发成熟,但目前最核心的治疗手段依然是规范性的外科手术治疗.近年来临床研究证实,相对于存在创伤大、并发症多等明显不足的传统开腹手术,结直肠癌微创外科治疗更具有优势.腹腔镜、机器人外科系统等微创技术的发展,在保证肿瘤根治性及手术安全性前提下,可以达到减少创伤、加速康复、改善患者生活质量等治疗效果.加速康复外科(enhanced recovery after surgery,ERAS)理念在临床外科领域普及发展[2],经一系列临床研究及Meta分析已证实,ERAS方案可改善结直肠癌手术康复过程,具有减少手术创伤及应激,减少术后并发症,缩短住院时间,降低住院费用,促进患者快速康复等优点[3,4].因此,加速康复外科联合微创外科技术在结直肠癌外科手术治疗的应用前景倍受关注.本文旨在初步探讨加速康复外科理念在结直肠癌微创手术的临床应用价值,以期促进ERAS理念在结直肠癌微创手术中进一步推广.     

重组腺病毒驱动KDR-CDglyTK融合基因系统对MCF-7细胞及血管内皮细胞的靶向杀伤作用

目的探讨腺病毒介导血管内皮生长因子受体(KDR)启动子驱动的CDglyTK融合基因体系对人乳腺癌细胞株MCF-7及血管内皮细胞(ECV304)选择性杀伤作用。方法将质粒pAdEasy-KDR-CDglyTK在293细胞内包装、扩增后,体外感染表达KDR的MCF-7、ECV304细胞株和对照组不表达KDR的LS174T细胞株,并给予不同浓度的前药5-FC和/或GCV,观察该体系对不同细胞株的杀伤效应及其旁观者效应。并通过流式细胞仪检测前药对瘤细胞周期的影响。结果所得病毒滴度为2.0×1012pfu/ml。3种细胞的感染率相似,其感染率随腺病毒滴度的递增而增加,当感染复数(MOI)为200时,所有细胞株均达约100%感染。以MOI为100的重组体分别感染各细胞株表现出对前药的不同敏感性:表达KDR的MCF-7细胞和ECV304细胞对前药具有较高的敏感性,二者敏感性差异无显著性意义(P=1.00);与前2者相比,不表达KDR的LS174T细胞对前药不敏感(P<0.001)。CDglyTK融合基因的疗效优于任一单自杀基因(P<0.001)。将感染腺病毒的细胞与未感染细胞以不同混合培养,观察到该体系明显的旁观者效应。流式细胞术检测表明该体系抑制MCF-7细胞DNA的合成,表现为G1期细胞比率增多及S期细胞减少(P<0.001)。结论KDR基因启动子调控的CDglyTK融合基因体系可选择性杀伤乳腺癌MCF-7细胞及血管内皮细胞。     

ceRNAs在结直肠癌中的研究进展

结直肠癌在我国乃至全球范围发生率和死亡率都居于前列,严重危害着人体的健康,虽然结直肠癌的诊断和治疗技术不断提高,但中晚期结直肠癌患者的生存期仍然不佳,因此需要深入理解结直肠癌的发生发展机制,竞争内源性RNA理论的提出加深了对肿瘤形成机制的理解。竞争内源性RNA理论认为假基因转录本、长链非编码RNA、环状RNA、mRNA能作为竞争性内源性RNA,它们拥有编码蛋白mRNA相同microRNA反应元件,能竞争结合microRNA的结合位点,影响功能蛋白的表达而发挥促癌或抑癌的作用。近来大量研究表明竞争性内源性RNA分子在结直肠癌恶性行为中发挥重要功能,因此有必要对这些研究进行归纳梳理,本文目的在于将这些在结直肠癌中研究的竞争性内源性RNA分子进行归类,并阐述这些分子在结直肠癌中的作用。