颈椎后路单开门成形扩大椎管术治疗颈椎后纵韧带骨化症

目的总结颈椎后路单开门椎管扩大成形术治疗颈椎后纵韧带骨化症（ossification of posterior longitud inal ligam ent,OPLL）的临床效果。方法对13例OPLL患者施行颈椎后路单开门椎管扩大成形术。结果本组平均手术时间150（120～180）m in,术中出血量平均为500（300～800）m l。随访3～18个月,术后15月JOA平均改善率53.35%（18.3%～85.7%）,临床症状较术前明显改善。本组2例术后有节段性神经根麻痹,无一例出现脑脊液漏、感染等其它并发症。结论颈椎后路单开门椎管扩大成形术治疗颈椎OPLL效果确切,并发症少。     

外踝上皮瓣修复足部软组织缺损20例及失败病例分析

目的探讨外踝上逆行岛状皮瓣修复足部远端软组织缺损的效果,分析失败病例原因和预防措施。方法应用腓动脉终末穿支的降支为血管蒂,行外踝上逆行岛状皮瓣修复前足和足外侧软组织缺损20例。结果 18例皮瓣成活,皮瓣质地优良,随访6~12个月,外观及功能满意。2例出现部分坏死,延误治疗。结论外踝上逆行岛状皮瓣是修复足部软组织缺损的良好皮瓣。该皮瓣切取方便,血供丰富,不损伤肢体主要血管。但病例选择不当,就会延误治疗,造成严重后果。     

转录因子XBP1S对人肝癌HepG2细胞增殖及凋亡的影响

目的:探讨人剪接型X盒结合蛋白1(X-box binding protein1spliced,XBP1S)对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的影响。方法:应用衣霉素(tunicamycin,Tm)和毒胡萝卜素(thapsigargin,Tg)建立HepG2细胞的内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)模型。将XBP1S真核表达载体pcDNA3.1(-)-XBP1S和靶向XBP1S的RNA干扰质粒pSUPER-XBP1S转染HepG2细胞,MTT法检测细胞的增殖能力,荧光显微镜下观察细胞的形态学变化,FCM法检测细胞凋亡率,Western印迹法检测caspase12的表达。结果:转染pSUPER-XBP1S可有效抑制细胞增殖,而转染pcDNA3.1(-)-XBP1S可促进细胞增殖。荧光显微镜下可见Tm处理组细胞出现细胞凋亡的形态学改变,进一步下调XBP1S的表达可使这一改变增强。对照组、Tm组、Tm+pSUPER-XBP1S转染组和Tm+pcDNA3.1(-)-XBP1S转染组细胞的凋亡率分别为5.21%、41.51%、52.15%和35.87%,差异有统计学意义(P<0.05)。HepG2细胞中caspase12的表达,Tm组高于对照组,Tm+pSUPER-XBP1S转染组高于Tm组,Tm+pcDNA3.1(-)-XBP1S转染组低于Tm组。结论:XBP1S可以促进肝癌HepG2细胞增殖,抑制或促进XBP1S表达可调节ERS介导的细胞凋亡。     

KAI1和CD44v6在骨肉瘤中的表达及意义

目的探讨KAI1和CD44v6蛋白在骨肉瘤中的表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法应用免疫组织化学SP法,检测87例骨肉瘤组织中KAI1和CD44v6蛋白的表达,用Cox风险回归模型评价骨肉瘤患者预后独立因素。结果KAI1蛋白与肿瘤的分化程度、远处转移相关,而CD44v6仅与远处转移相关。骨肉瘤KAI1和CD44v6的表达无相关性。Cox模型分析显示影响骨肉瘤患者预后因素是KAI1表达、远处转移和Enneking外科分期。结论KAI1和CD44v6的异常表达参与了骨肉瘤的转移过程,KAI1表达、远处转移、Enneking外科分期是预测骨肉瘤患者预后的独立因素。     

他克莫司抑制脂质过氧化对大鼠脊髓的保护效应观察

目的 探讨大鼠脊髓损伤后早期应用他克莫司对脊髓的保护效应.方法 健康成年雄性Wistar大鼠40只,随机分为他克莫司组(n=20)和损伤组(n=20).采用Allen's法建立大鼠脊髓损伤模型,他克莫司组在脊髓损伤后5min一次性经尾静脉注射他克莫司0.3mg/kg,损伤组以相同方法给予等量生理盐水.伤后3、7、14、21d应用BBB评分法进行后肢运动功能评价,并分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量变化,免疫组织化学染色检测脊髓组织诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达.结果 与损伤组比较,他克莫司组各时间点行为学评分明显改善(P＜0.05或P＜0.01),血浆MDA含量降低、SOD活性升高(P＜0.05或P＜0.01).损伤组和他克莫司组iNOS蛋白表达均于伤后3d升高,7d达峰值,且他克莫司组各时间点阳性细胞率均明显低于损伤组(P＜0.05或P＜0.01).结论 他克莫司可减少大鼠脊髓损伤后iNOS的表达和自由基生成,从而抑制脂质过氧化损伤,改善神经功能.     

转录因子XBP1S基因表达谱差异分析

目的 应用基因表达谱芯片技术了解XBP1S在肝细胞中可能上调或下调的基因,了解其可能的调节功能线索.方法 构建pcDNA3.1(-)-XBP1S真核表达载体,转染HepG2细胞,同时以空载体pcDNA3.1(-)处理相同细胞系作为对照.48 h后制备细胞裂解液,提取mRNA,应用基因表达谱芯片技术对差异表达mRNA进行检测和分析.结果 构建的表达载体经过限制性内切酶分析和DNA序列测定,证实准确无误,提取高质量的总mRNA并进行逆转录成为cDNA,进行基因表达谱芯片技术分析.经过差异基因表达谱的筛选,发现HepG2细胞转染XBP1S以后,有38个基因表达水平显著上调,30个基因表达水平显著下调.结论 成功构建XBP1S的真核表达载体pcDNA3.1(-)-XBP1S,运用基因表达谱芯片技术成功筛选了XBP1S转染细胞后的差异表达基因,这些差异表达基因包括细胞周期、蛋白质的翻译合成及运输、能量代谢、体内免疫调节、细胞凋亡及细胞内的信号转导等方面起重要作用及肿瘤发生相关的基因,为进一步阐明XBP1S可能存在的调控机制及XBP1S蛋白可能的生物学功能提供理论依据.     

一期后路全脊椎整块切除术治疗胸椎肿瘤

目的 回顾性分析32例胸椎肿瘤手术治疗效果,探讨一期后路全脊椎整块切除术治疗胸椎肿瘤的可行性和疗效.方法 2004年4月至2008年11月,32例胸椎肿瘤患者行一期后路全脊椎整块切除术.胸椎原发性肿瘤18例,胸椎转移瘤14例.肿瘤病灶均为单节段;原发良性肿瘤S23例,S3 6例,其中7例合并病理骨折;原发恶性肿瘤Ⅰ A 4例,Ⅰ B 3例,Ⅱ2例.14例转移性胸椎肿瘤按TOkuhashi预后评分系统均小于8分,且预计生存时间大于半年以上.所有病例按Frankel分级:A级2例,B级5例,C级8例,D级10例,E级7例(仅有局部疼痛).结果 手术时间为230～420 min,平均270min;切除肿瘤时失血量为1200～4200 ml,平均为2100 ml.术后随访0.5～4.6年,平均3.2年.所有病例术后疼痛消失或减轻,术后3周时,VAS疼痛评分由术前平均8.3分下降至2.1分(P<0.01);术后生活质量改善明显,术后3周时SF-36评分由术前平均39分增加至79分(P<0.01).术后1年患者神经功能恢复正常24例,C级1例,D级2例(3例死亡和2例随访不足1年,未行神经功能评估).至末次随访仅2例局部复发和8例死亡.结论 一期后路全脊椎整块切除术治疗胸椎肿瘤安全可行.在严格掌握手术适应证条件下,能彻底切除胸椎肿瘤,对脊髓行360°彻底减压,缓解疼痛、促进脊髓神经功能恢复;还可有效控制术后肿瘤局部复发,延长患者生存时间和改善生存质量.     

LISS钢板治疗膝关节周围严重粉碎性骨折疗效观察

[目的]报告AO微创内固定系统(less invasive stabilization system,LISS)治疗膝关节周围严重粉碎性骨折疗效,探讨手术相关问题和分析术后并发症的原因.[方法]2004年10月-2007年8月应用LISS钢板治疗膝关节周围严重粉碎性骨折69例,其中股骨骨折38例,胫骨骨折31例.合并髌骨骨折5例,伴其他部位骨折16例.按AO/OTA分型,股骨骨折中,33-A3型7例;33-C2型16例,33-C3型15例;胫骨骨折中,41-A3型12例,41-B2型10例,41-C2型9例.[结果]全部病例获得随访,平均随访时间14.5个月(12～36个月),平均手术时间90 min(75～130 min),术中平均失血量350 ml(200～750 ml).术后伤口均I期愈合,1例膝内翻畸形,1例肢体短缩,2例内固定激惹,2例骨延迟愈合,2例内固定取出困难.膝关节功能HSS评分优良率89.9%.[结论]LISS钢板是治疗膝关节周围严重粉碎性骨折的理想内固定材料.明确手术适应证,严格掌握操作程序和重视对骨缺损的处理是取得满意疗效的关键.     

骨骺干细胞复合壳聚糖/纳米羟基磷灰石支架体外培养的实验研究

目的 探讨免疫磁珠分选的骨骺干细胞(PSCs)经诱导后向软骨细胞方向分化的性能,及其与壳聚糖/纳米羟基磷灰石(CS/nHA)支架材料复合培养构建组织工程化软骨的可行性.方法 用显微手术器械剪取新生24 h内的清洁级SD大鼠股骨下端骺板两端的La Croix环处组织,应用免疫磁珠分选系统分离纯化PSCs,免疫荧光染色观察PSCs成纤维细胞生长因子受体-3(FGFR-3)的表达情况.体外培养并诱导PSCs向软骨细胞特性方向分化,免疫细胞化学、甲苯胺兰及番红O染色检测诱导后细胞Ⅱ型胶原及软骨基质的表达情况.以诱导后接种于CS/nHA支架培养的PSCs为实验组,以诱导后未接种支架的细胞为对照组.扫描电镜观察细胞的黏附及形态学改变,MTT法检测细胞增殖情况,阿辛蓝法测定细胞合成的糖胺多糖(GAG)情况.对两组间不同培养时间的吸光度值及GAG进行比较.结果 免疫磁珠分选的PSCs体外培养增殖迅速,免疫荧光染色显示FGFR-3阳性表达.诱导后的PSCsⅡ型胶原免疫细胞化学染色、甲苯胺兰染色及番红O染色均旱阳性.细胞接种CS/nHA支架后1、4 d,实验组与对照组吸光度值比较差异无统计学意义(P>0.05),而7 d实验组与对照组吸光度值比较筹异有统计学意义(t=-2.786,P=0.024).培养14 d后培养液GAG含量为(89.66±6.52)μg/106个细胞,高于对照组[(78.62±4.63)μg/106个细胞)],差异有统计学意义(t=-3.084,P<0.05).结论 免疫磁珠分选的PSCs经诱导后可向软骨细胞功能方向分化,诱导后的PSCs与CS/nHA分层支架复合有望构建组织工程化软骨.     

股骨远端骨折不同内固定方法的疗效分析

目的 对应用不同内固定方法治疗股骨远端骨折的疗效进行对比分析,以指导临床合理地选择手术方式及内固定.方法 自2004年10月～2008年8月,对354例股骨远端骨折分别应用"L""角钢板(LSCP)、AO动力髁螺钉(DCS)、解剖型髁支持钢板(ACSP)、互锁双板(DPF)、逆行交锁髓内钉(GSH)、AO微创内固定系统(LISS)及其他内固定方法治疗,对各自的疗效进行回顾性分析.结果 47例行二期翻修植骨术,除1例随访期死于肺癌外,所有患者获得骨愈合.分析结果显示,不同的内固定方法术后骨折愈合率及膝关节HSS功能评定结果有统计学差异(P<0.05),LISS组的骨愈合率和关节功能评分优良率最高,其次为GSH组,而LSCP组最低.结论 股骨远端骨折手术内固定物选择多样性明显,而LISS接骨板较其他内固定方法具有骨折愈合率高,关节功能恢复满意等优点,值得临床推广应用.