家兔肠缺血-再灌注后各器官损伤变化的实验研究

目的探讨家兔肠缺血-再灌注引起各器官变化的特点。方法选取10只健康家兔,随机分为实验组（5只）与对照组（5只）,观察肝、肾、肺、心肌及胃肠的病理改变,检测血浆血浆丙二醛（MDA）、红细胞膜MDA、血浆黄嘌呤氧化酶（XOD）、血浆超氧化物歧化酶（SOD）的变化。结果实验组家兔的肝、肾、肺、心肌及胃肠均有较明显的病理改变。实验组血浆丙氨酸氨基转移酶（ALT）含量、肌酐含量、支气管肺泡灌洗液（BALF）蛋白含量、血浆和红细胞膜MDA及血浆XOD含量明显高于对照组（P〈0.05）,血浆SOD明显低于对照组（P〈0.05）。结论家兔肠缺血-再灌注可导致肝、肾、肺、心肌及胃肠损伤,氧自由基对各器官的破坏可能是病理变化的主要因素。     

miR-663通过靶向TGFB1对肺癌细胞A549增殖的调控

目的利用双荧光蛋白报告基因分析系统,验证miR-663的直接靶基因TGFB1,探讨miR-663促进肺癌细胞A549增殖的可能机制。方法实时定量RT-PCR检测10对肺癌组织和正常肺组织中miR-663的表达水平;利用细胞计数和集落形成实验来验证细胞转染miR-663 ASO后的A549细胞增殖。选取表达绿色荧光蛋白的质粒pcDNA3/EGFP,将TGFB1 3′UTR的一段特异性序列插入该质粒中,并与miR-663及表达红色荧光蛋白质pDsRed2-N1共同转染肺癌细胞系A549,转染后细胞提取的蛋白样品,荧光分光光度计进行定性和定量检测。结果 miR-663在肺癌组织中的表达高于在正常肺组织中的表达;miR-663表达明显促进了细胞A549的增殖;共转miR-663和pcDNA3/EGFP-TGFB13′UTR质粒后,绿色荧光蛋白的表达量明显低于pcDNA3和pcDNA3/EGFP-TGFB13′UTR共转组。结论 miR-663可能通过靶定靶基因TGFB1,促进了肺癌细胞A549的增殖。     

处方点评实践工作中典型案例分析

目的通过处方点评工作中暴露问题,促进临床合理用药。方法每月随机抽取2007年8月～2008年10月门诊处方100张,进行统计点评。结果门诊不合格处方占2．5％,不合理处方占18％。结论药师处方点评实施了对临床用药监控,提高医生用药水平,保障用药安全。促进药师学习掌握专业知识技能,提高判断不合理用药的能力。     

丹参对大鼠肢体缺血再灌注后多器官水肿的预防作用

目的:探讨丹参对大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后多器官水肿的预防作用.方法:Wistar大鼠24只随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(I/R组)和丹参预处理组(SM组).用橡皮带结扎动物双后肢根部4h,然后松解橡皮带恢复血流灌注4h制作大鼠肢体缺血再灌注模型,SM组在再灌注前30 min经尾静脉注射丹参注射液5mL/kg.手术取血处死动物,准确留取每只动物的心、肝、肾、肺、脑、肠及骨骼肌组织各1 g.恒温烘干后称其干重并计算各标本的湿干重比值(W/D).采用生物化学方法测定血浆超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)活性及丙二醛(MDA)水平.光镜下观察各组织的形态学变化.结果:LIR后各组织W/D均增加(P＜0.05),血浆SOD活性降低,而XOD活性和MDA水平增加(P＜0.05),镜下可见各组织出现结构紊乱、组织间隙增宽和炎细胞浸润等病理改变.而SM组与I/R组比较,血浆SOD活性回升,而XOD活性和MDA水平降低(P＜0.05),镜下组织病理学变化有所减轻.结论:LIR可导致多器官水肿,氧化应激是其重要机制之一.丹参可通过抗氧化发挥抗组织水肿的作用.     

牛磺酸镁配合物对缺氧复氧致大鼠心肌细胞瞬时外向钾离子通道异常的影响

目的研究牛磺酸镁配合物(TMCC)对缺氧复氧损伤所致大鼠心肌细胞异常瞬时外向钾电流(Ito)的影响。方法采用Langendoff逆行主动脉灌注酶消化法急性分离大鼠单个心室肌细胞,分为空白对照组、模型组、100μmol.L-1 TMCC组、200μmol.L-1 TMCC组、400μmol.L-1 TMCC组和24.24μmol.L-1胺碘酮组,均n=6。缺氧钾外液模拟缺氧15 min后用有氧钾外液复氧5 min制缺氧复氧模型。应用全细胞膜片钳技术记录Ito。结果与空白对照组相比,模型组大鼠心室肌细胞Ito峰值显著增大(13.50±0.41 pA.pF-1 vs.8.40±0.66 pA.pF-1,P<0.01),I-V曲线上移,Ito激活曲线左移;200、400μmol.L-1 TMCC组和胺碘酮组均可使因缺氧复氧损伤增大的Ito减小(均P<0.01),使I-V曲线下移并纠正左移的激活曲线。各组对稳态失活曲线均无显著影响,曲线无移动(均P>0.05)。结论 TMCC可通过抑制钾通道的激活过程对抗缺氧复氧引起的Ito增大,提示该作用可能是TMCC抗缺氧复氧诱发心律失常的作用机制之一。     

缺血后适应减轻大鼠肢体缺血再灌注后的心肌损伤

目的: 探讨肢体缺血后适应(LIPostC)对大鼠肢体缺血再灌注(LIR)后心肌的保护作用。方法: Wistar大鼠随机分为对照组(C组)、缺血再灌注组(IR组)和缺血再灌注+缺血后适应组(IR+IPostC组)。制作大鼠LIR模型,IR+IPostC组在缺血后,实施肢体松解-结扎各5 min,反复5次,即缺血后适应,然后再进入持续的血流再灌注阶段。生物化学方法测定血清肌酸激酶(CK)及其MB同工酶(CK-MB)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、乳酸脱氢酶(LDH)、α-羟丁酸脱氢酶(α-HBDH)及心肌肌钙蛋白I(cTnI)水平,测定血清及心肌组织中超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)活性及丙二醛(MDA)水平。电镜下观察心肌组织超微结构变化。结果: 与对照组比较,IR组及IR+IPostC组血清CK、CK-MB、AST、LDH、α-HBDH及cTnI水平均升高,心肌组织及血清MDA及XOD水平升高(P<0.05),而SOD活性降低(P<0.05)。与IR组比较,IR+IPostC组血清CK、CK-MB、AST、LDH、a-HBDH及cTnI水平均降低(P<0.05),血浆及心肌组织的MDA及XOD有所降低而SOD水平升高(P<0.05)。电镜下可见C组心肌肌原纤维排列整齐,明暗带清晰,线粒体基质致密,嵴排列紧密整齐。IR组可见肌丝排列紊乱或消失,基质明显水肿,线粒体大部分或全部的嵴和膜融合或消失,空泡化明显,糖原数量明显减少。IR+IPostC组心肌上述病理改变有所减轻。结论: LIPostC可减轻LIR对心肌的损伤作用。     

模拟缺血再灌注对L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的影响

目的 探讨模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞凋亡的发生机制.方法 将培养的L-6TG大鼠肌母细胞随机分为对照组(C组)和模拟缺血再灌注组(IR组).C组用模拟再灌注液培养,IR组用模拟缺血液培养4h后换再灌注液培养4h.观测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、黄嘌呤氧化酶(XOD)及Ca2 含量的变化;采用MTT法检测线粒体功能;利用流式细胞仪和细胞DNA电泳检测细胞凋亡情况;采用免疫组织化学法检测bcl-2及caspase-3蛋白表达情况,并结合自动图像分析系统对其结果 进行半定量分析.结果 IR组大鼠肌母细胞模拟缺血再灌注4h后细胞内XOD、Ca2 含量及凋亡百分率明显高于C组(287.88±8.47 vs 42±3.94U/g prot,1.547±0.017 vs 7.23±0.28lnMCF,7.23%±0.28% vs 0.69%±0.07%,P《0.01),而细胞内SOD及线粒体呼吸功能明显低于C组(43.19±3.64 vs 248.52±11.26NU/mg prot,9.15%±0.49% vs 100%,P《0.01),DNA电泳出现典型的梯状条带,bcl-2及caspase-3蛋白的表达均明显高于C组.结论 模拟缺血再灌注后L-6TG大鼠肌母细胞发生凋亡,其机制可能与氧化损伤、钙稳态失衡、线粒体损伤及caspase-3表达增强有关.     

出版消息

▲《不孕与不育》由罗丽兰主编,数十位生殖医学专家历时二年编著,人民卫生出版社出版。 近20年来,生殖医学以及围绕生殖医学的基础理论和临床实践边缘学科的研究,取得了令人瞩目的进展。我国出版的有关生殖医学方面的书籍为数不多,能囊括从基础理论到临床     

ELISA（双抗体夹心法）共系统检测抗-HBe与HBeAg结果分析

目的探讨用双抗体夹心法检测HBeAgEIA商品试剂盒共系统检测抗-HBe与HBeAg的可行性及结果判定方法。方法用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒结合配套中和（竞争）抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒中的中和试剂（HBeAg）等试剂组分共系统检测1000份随机血清（浆）标本抗-HBe与HBeAg,并分别以常规ELISA检测抗-HBe与HBeAg作平行对照。结果ELISA共系统检测抗-HBe与HBeAg易于目测;它们的比色判定临界值同常规ELISA易于设定（或使用临界值血清,检测HBeAg时也使用抗-HBe阴性对照）,与常规ELISA检测比色判定无显著性差异（配对计数资料比较的χ2检验：相关检验均为P〈0.005,υ=1,a=0.05;抗-HBe优劣检验（ELISA共系统检测抗-HBe前两项COV与抗-HBe临界值血清）均为P〉0.900,υ=1,a=0.05;HBeAg优劣检验依次为HBeAg临界值血清：（1）P〉0.900,υ=1,a=0.05,抗-HBe阴性对照;（2）0.100〉P〉0.050,υ=1,a=0.05,ELISA共系统检测HBeAgCOV;（3）0.100〉P〉0.050,υ=1,a=0.05,但χ^21〈χ^22〈χ^23）。结论用双抗体夹心法检测HBeAgELISA试剂盒与配套中和（竞争）抑制法检测抗-HBeELISA试剂盒试剂组分重组共系统检测抗-HBe与HBeAg是可行的,两种试剂盒能够相互替代,在有优质现代酶标仪的实验室,可以省去常规ELISA试剂盒其中之一,实用价廉,值得推广。     

缺血预处理对家兔肢体缺血再灌注后红细胞变形性的影响

Ｍｕｒｒｙ于 1986年提出多次短暂的缺血可减轻随后较长时间缺血再灌注 (ｉｓ ｃｈｅｍｉａ -ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ ,ＩＲ)引起的损伤 ,并称这种现象为缺血预处理 (ｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ａｌ,ＰＣ)。笔者主要观察ＰＣ对家兔肢体Ｉ/Ｒ后红细胞 (ＲＢＣ)变形性的影响并探讨其可能的作用机制。材料与方法　 ( 1)实验动物分组 :健康杂种家兔 2 5只 ,雌雄不限 ,体重为 2～3ｋｇ。实验动物随机分成 3组 :①单纯ＩＲ组 (兔数 =11) :夹闭双侧髂总动脉 4ｈ后 ,松夹恢复血流灌注 2ｈ。②ＰＣ ＩＲ组 (兔数 =9) :夹闭双侧髂总脉 5ｍｉｎ ,松夹 …