右颊黏膜腺泡状软组织肉瘤1例报告及文献复习

分析右颊黏膜腺泡状软组织肉瘤（ASPS）患者的临床表现、病理诊断、治疗及预后,提高临床医生对ASPS的认识。     

肾上腺乳头状淋巴管内血管内皮瘤2例并文献复习

例1,女,49岁,因右腰部酸胀不适1个月入院。既往高血压病史20年,血压最高170/110 mmHg,规律口服降压药物治疗。20年前行声带息肉切除手术,13年前因脑垂体瘤行伽马刀治疗。入院后实验室检查无明显异常。泌尿系CT示:右侧肾上腺见多房囊性密度影(图1A),囊壁散在钙化,CT值约15 HU,增强后未见强化,较大囊截面8.4 cm×4.1 cm,双肾囊肿,左肾错构瘤,肝脏多发囊肿。     

TWEAK及Fn14在衰老大鼠血管平滑肌细胞中的表达及意义

目的 探讨肿瘤坏死因子样弱凋亡诱导因子(tumor necrosis factor-like weak inducer of apoptosis,TWEAK)及其受体成纤维细胞生长因子诱导蛋白14(fibroblast growth factor-inducing protein 14,Fn14)对血管平滑肌细胞衰老的潜在作用.方法 将大鼠主动脉平滑肌(A10)细胞分为对照组及AngⅡ组,经同步化后,对照组10％血清培养基培养,AngⅡ组加1×10-7 mol/L的AngⅡ培养.再将A10细胞分为对照组、未感染组、空载体组及TWEAK过表达组,经同步化后,对照组、未感染组不做转染,空载体组及TWEAK过表达组分别转染空载体腺病毒及TWEAK过表达腺病毒.转染48 h后,未感染组、空载体组及TWEAK过表达组加1×10-7 mol/L的AngⅡ培养,对照组10％血清培养基培养.通过衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色、Western blot检测P53、P21来评估细胞衰老情况,实时荧光定量PCR、Western blot检测TWEAK mRNA及TWEAK、Fn14蛋白表达水平.结果 随着AngⅡ作用时间延长,AngⅡ组SA-β-Gal染色逐渐增多,P53、P21、TWEAK、Fn14蛋白表达明显增多,与对照组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).TWEAK过表达组血管平滑肌细胞,在AngⅡ诱导衰老时Fn14、P53、P21的表达显著增多,与对照组、未感染组、空载体组比较,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 血管平滑肌细胞衰老时TWEAK、Fn14表达增多,TWEAK对血管平滑肌细胞衰老有促进作用.     

AG490及5-Aza对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及分子机制

【摘要】 目的 探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490及DNA甲基化抑制剂5-Aza对血小板源性生长因子-BB（PDGF-BB）诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞（PASMCs）增殖的影响及意义。方法 采用CCK8检测不同浓度AG490及5-Aza对PDGF-BB诱导PASMCs增殖的影响;将细胞分为对照组（正常的PASMCs）、0μM 组（予30 μg/L PDGF-BB 孵育48h)和25μM/1μM组、50μM/3μM组、100μM/5μM组（25μM/1μM组、50μM/3μM组、100μM/5μM组分别给予25/1、50/3、100/5μmol/L AG490/5-Aza共同孵育细胞）。采用RT-qPCR检测IL-6、GATA6、JAK2及STAT3 mRNA表达水平;Western blot检测GATA6、p-JAK2及p-STAT3蛋白的表达。结果 与对照组比较,0 μM AG490组IL-6、JAK2、STAT3mRNA表达均增加,GATA6mRNA及蛋白水平降低,p-JAK2/JAK2和p-STAT3/STAT3表达升高（P＜0.05）。与0μM AG490组比较,25、50、100μM AG490组细胞增殖减少,IL-6、JAK2和STAT3mRNA的表达均降低,GATA6mRNA及蛋白表达升高,p-JAK2/JAK2水平降低（均P＜0.05）,50和100μM组中p-STAT3/STAT3水平降低（均P＜0.05）;与0μM 5-Aza组相比,1μM、3μM、5μM 5-Aza组细胞增殖减少,IL-6mRNA表达降低,GATA6蛋白、p STAT3/STAT3表达增高,p-JAK2/JAK2水平降低（均P＜0.05）,JAK2、STAT3mRNA水平无显著差异（P＞0.05）;3μM和5μM 5-Aza组中GATA6mRNA表达增高(P＜0.05)。结论 AG490及5-Aza对 PDGF-BB诱导的PASMCs增殖具有抑制作用,该作用可能与阻断JAK2/STAT3信号通路,抑制IL-6调节GATA6启动子甲基化有关。     

利伐沙班对血管平滑肌细胞增殖迁移的影响

目的 探究利伐沙班对血小板生长因子BB(platelet growth factor BB, PDGF-BB)诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(human aortic vascular smooth muscle cells, HAVSMCs)增殖迁移的影响。方法 选取处于对数生长期的HAVSMCs,给予20ng/ml PDGF-BB刺激24h,再用8μm利伐沙班共孵育24h。MTT法和Edu染色检测各组HAVSMCs的增殖活性,流式检测细胞周期,Transwell和划痕实验观测细胞迁移情况,Western blot法检测迁移相关蛋白E-cadherin和N-cadherin的表达量。结果 与对照组比较,HAVSMC+PDGF-BB组的细胞活力、迁移能力、S期细胞数量和N-cadherin表达量都明显增加,E-cadherin表达量明显减少;相较于HAVSMC+PDGF-BB组,HAVSMC+PDGF-BB+利伐沙班组的细胞活力、迁移能力、S期细胞数量和N-cadherin蛋白表达量都显著减少,E-cadherin蛋白表达量明显增加。结论 利伐沙班能有效抑制PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞增殖迁移,为利伐沙班治疗动脉闭塞硬化症提供一定的实验基础。     

子宫内膜去分化癌6例临床病理特点

目的 探讨子宫内膜去分化癌的临床特征、病理组织学及免疫表型特点,对其诊断及鉴别诊断,进行综合性分析,加深对该病的认识。方法 回顾性分析6例2015年1月至2020年6月沈阳二四五医院和中国医科大学附属盛京医院病理科的子宫内膜去分化癌,观察其临床病理特点,并复习相关文献。结果 6例子宫内膜去分化癌患者平均年龄(59.83±5.15)岁,镜下见两种肿瘤细胞形态,一种是低级别子宫内膜样腺癌成分,另一种是未分化的圆形、卵圆形类似肉瘤样形态的细胞。免疫组化染色显示,未分化区域Vimentin均(+)、ER、PR均(-),上皮性标记CK(pan)、EMA局灶弱(+), CD56及Syn局部(+),5例P53为野生型,1例为(-,无义突变);低级别子宫内膜样腺癌区域Vimentin均(+)、ER、PR均(+)、CK(+),4例微卫星不稳定:MLH1和MSH2(-)。结论 子宫内膜去分化癌是一种罕见类型的子宫原发的恶性上皮性肿瘤,具有特殊的临床病理组织形态特点,加深对该病的认识,可以提高病理诊断准确性,并能指导临床治疗。     

基于网络药理学初探川续断皂苷乙的药理作用

目的利用网络药理学与分子生物学方法探究川续断皂苷乙(DB)的药理作用。方法在ChemMapper数据库上预测DB的靶标,通过iGEMDOCK软件进行化合物与靶标蛋白对接,根据评分选出关键靶标蛋白,关键靶标蛋白通过STRING数据库构建蛋白之间的相互作用,GO富集分析与KEGG通路分析关键靶标蛋白调控蛋白网络的生物过程与通路。血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导血管平滑肌细胞(VSMCs)增殖,通过MTT法与EdU法检测DB对VSMCs的细胞活性及增殖的影响。流式细胞术检测VSMCs周期,Western blot法与免疫荧光法检测关键靶标蛋白表达。结果 DB具有4个靶标蛋白,根据分子对接能量值选取DNA拓扑异构酶2a(TOP2a)后续研究对象,TOP2a相关的蛋白进行预测,得到相关蛋白10种,经过GO富集分析与KEGG通路分析,TOP2a可能参与VSMCs的增殖调控。MTT法结果显示DB对VSMCs活性明显抑制,具有剂量依赖性。EdU法检测DB(3、10、30μmol/L)对VSMCs增殖有明显抑制作用。流式细胞术显示DB可能阻滞VSMCs的G1期向S期合成,进而影响细胞增殖。Western blot法结果显示DB下调蛋白TOP2a表达水平,同样免疫荧光法结果显示TOP2a表达下调。结论 DB可能通过下调TOP2a表达,调控细胞周期,抑制VSMCs的增殖。     

基于生物信息学分析肾透明细胞肉瘤核心基因及免疫细胞浸润

目的 基于基因表达汇编(GEO)数据库挖掘肾透明细胞肉瘤(CCSK)的核心基因并分析肿瘤和正常组织间免疫细胞浸润情况,为CCSK的诊疗提供新方向.方法 对GEO数据库中GSE49972及GSE2712数据集进行联合分析,筛选CCSK和正常胚肾组织间的差异表达基因,并对差异表达基因进行基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析.构建蛋白质-蛋白质相互作用网络,鉴定CCSK的核心基因,同时对CCSK及正常胚肾组织进行免疫细胞浸润分析.结果 共筛选出740个差异表达基因,GO功能富集分析结果显示这些差异表达基因集中在细胞外结构组织、细胞外胶原基质、细胞黏附分子结合等功能模块.KEGG信号通路分析结果显示差异表达基因参与的主要信号通路富集于PI3K/Akt信号通路、肿瘤转录失调、黏着斑、钙离子信号通路及肿瘤蛋白多糖等.蛋白质-蛋白质相互作用网络分析发现核心模块中密封蛋白家族和钙黏着蛋白家族权重较大.免疫细胞浸润分析发现大多数免疫细胞在CCSK组织中浸润程度低,但CD4 T细胞浸润程度较高.结论 密封蛋白和钙黏着蛋白等相关通路及核心基因在CCSK中发挥重要作用,可作为潜在的治疗靶点.免疫检查点与特定激酶抑制剂的联合应用可能提高对CCSK的免疫治疗效果.     

颈动脉套管：一种新的小鼠血管重塑模型的构建方法

目的 建立一种新的血管损伤和重塑模型,分析血管缩窄时间与血管重塑之间的关系。方法 12只 C57小鼠经异氟烷麻醉后,正中切口,分离左右颈总动脉,采用内径0.3mm的硅胶管,对左侧颈总动脉进行缩窄术,右侧进行对照手术,不做缩窄。在术后2周和4周,各处死6只小鼠,3只用于组织学染色,3只用于RNA和蛋白提取。HE染色观察颈动脉血管的显微结构;免疫组化检测颈动脉血管的平滑肌细胞增殖情况;定量PCR检测血管平滑肌表型转化标志分子的表达;WB检测细胞增殖相关分子的表达。结果 12只小鼠颈动脉缩窄手术都成功,在术后2周和4周取材时,均无明显异常。颈动脉套管2周和4周均能够引起血管重塑,血管重塑的程度与缩窄时间成正相关。颈动脉缩窄能够引起血管外膜增生,晚期引起血管内膜增生。颈动脉缩窄引起血管内膜细胞异常增殖,降低平滑肌细胞收缩型相关分子的表达;增加细胞增殖相关分子的表达。结论 小鼠颈动脉缩窄是一种简单、高效的血管重塑模型的构建方法。