外周免疫评分对经中医药治疗的非小细胞肺癌患者预后的影响及相关预测模型的构建

目的构建经中医药治疗的非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的多因素评估模型。方法回顾性收集至少经过6个月中医药治疗的NSCLC患者的临床资料,包括性别、年龄、免疫功能、TNM分期、治疗方式、无进展生存期(PFS)、是否发生复发或转移等。根据制定的外周免疫评分标准评价患者的免疫功能,并对患者外周免疫评分、性别、年龄、临床分期与是否复发或转移进行相关性分析;采用单因素Cox回归分析外周免疫评分与PFS之间的关系。将纳入病例分为建模组和验证组,分别采用单因素与多因素Cox回归分析年龄、性别、外周免疫评分、TNM分期、治疗方式与患者是否发生复发或转移的关系,据此建立列线图预测模型,分析其一致性系数(C-index),并以受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)和校准图来验证模型的准确性。结果共纳入175例患者,根据外周免疫评分将患者分为3组,其中免疫低下(<0分)组123例(70.29%)、免疫正常(=0分)组24例(13.71%)、免疫亢进(>0分)组28例(16.00%)。相关性分析显示,外周免疫评分与患者是否复发或转移呈负相关(P=0.008,r=-0.201),而临床分期、性别、年龄等因素与患者是否复发或转移无相关性;免疫正常组的PFS最长,免疫低下组的PFS最短。单因素分析显示,性别、治疗方式、TNM分期、外周免疫评分是影响患者是否复发或转移的潜在预测因素(P<0.1);多因素分析显示,性别、治疗方式、TNM分期、外周免疫评分是影响患者是否复发或转移的独立因素(P<0.05)。建立列线图预测模型,建模组、验证组的C-index分别为0.779、0.718,建模组ROC曲线显示1年、3年AUC分别为0.831、0.798,验证组ROC曲线显示1年、3年AUC分别为0.542、0.649。结论以性别、TNM分期、外周免疫评分、治疗方式为因素建立的模型可以预测经中医药治疗后的NSCLC患者的预后,其中外周免疫评分可作为评估预后的独立因素。     

组织块重复贴壁使用在原代细胞培养中的实验意义

目的旨在提高采用人脐静脉组织块贴壁法进行平滑肌细胞原代培养组织块的重复利用率,进而缩短采用细胞培养进行实验的培养周期。方法以改良人脐静脉平滑肌细胞贴壁培养法为基础,当原代培养细胞(对照组)进行第1次细胞传代后,将培养组织块再次接种于新培养瓶中继续培养(实验组),分别记录两组细胞爬出时间、第1次传代时间、以及第1次传代后24、48、72、96h的细胞计数,通过倒置显微镜对两组细胞进行形态学观察,采用抗α-actin免疫细胞化学方法,对两组传代细胞的类型和性质进行鉴定。结果与对照组比较,实验组细胞爬出时间及第1次传代时间均明显缩短(P<0.05);两组第1次传代后24、48、72、96h细胞计数差异均无统计学意义(P>0.05);两组细胞形态经α-actin鉴定差异无统计学意义。结论人脐静脉组织块重复贴壁培养后,经传代其细胞数量、细胞形态与原代组织块贴壁培养的细胞差别均无统计学意义。     

小鼠组织SAM和SAH在动脉粥样硬化评价中的应用

目的探讨S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosyl Homocysteine,SAH)和S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosyl-methionine,SAM)在载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)评价中的应用。方法采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)检测各组ApoE-/-小鼠(模型对照组、高蛋氨酸饮食组、叶酸和维生素B12治疗组)心脏、肝脏、肾脏组织中SAM和SAH含量的变化,并与正常对照组比较。HE染色光镜观察各组主动脉病理学改变。结果 HPLC实验数据表明,正常对照组、模型对照组、高蛋氨酸饮食组的小鼠心脏、肝脏、肾脏组织中SAM、SAH的含量依次增加,治疗组小鼠心脏、肝脏、肾脏组织中SAM、SAH的含量则有所降低,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组比较,肾脏高蛋氨酸饮食组SAM、SAH含量差异有统计学意义(P<0.05),治疗组肝脏、肾脏SAM、SAH含量差异有统计学意义(P<0.01)。与高蛋氨酸饮食组比较,肝脏、肾脏治疗组SAM、SAH含量有明显差异(P<0.01)。同时,HE染色显示高蛋氨酸饮食组主动脉AS的病理改变明显。结论 SAM、SAH含量升高可能是高蛋氨酸饮食促进ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化发生的重要机制之一。     

S-腺苷同型半胱氨酸水解酶在同型半胱氨酸致平滑肌细胞增殖中作用机制的研究

目的 探讨S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosyl homocysteine；SAH)水解酶(SAHH)在同型半胱氨酸(Homocysteine；Hcy)致平滑肌细胞增殖中的作用机制。方法 原代培养平滑肌细胞(VSMCs)，用0、50、100、200、500μM浓度Hcy干预VSMCs，高效液相色谱法(HPLC)检测S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine，SAM)和SAH含量的变化；实时RT-PcR和Western blot检测SAHH表达的变化；MTT法检测Hcy对VSMCs增殖的影响。结果 HPLC结果表明，VSMCs与0、50、100、200、500μM Hcy培养72h后，细胞中SAH的含量明显增加，而细胞中SAM的含量和SAM/SAH的比值下降，与对照组比较，差异均有显著性(P<0.05)，实时RT-PCR．和Western blot结果显示，SAHH mRNA和蛋白水平下降，与对照组比较差异有显著性(P<0.05)，MTT显示，在50μM Hcy组，VSMCs数量明显增加，而100、200、500μM Hcy组VSMCs数量反较对照组减少。结论 SAHH表达下调致使SAM/SAH的比值下降可能是Hcy引起VSMCs增殖的重要机制之一。     

药物利用评价法联合药物利用评估法评价慢性阻塞性肺疾病患者的用药情况

目的评价我院慢性阻塞性肺疾病住院患者的用药合理性。方法药物利用评价法(DUR)联合药物利用评估法(DUE)评价我院27例慢性阻塞性肺疾病住院患者的用药情况。结果 27例患者所用主要治疗药物共37种,其中13种药物利用指数>1,13种药物利用指数<1,11种药物利用指数=1。用药强度(DDDs)居前列的药物为注射用头孢地嗪、注射用美罗培南、氨溴索注射液、泮托拉唑粉针、雷贝拉唑肠溶片、呋噻米片和螺内酯片。治疗期间患者进行了血常规(77.78%和84.62%)、肝功能(100.00%和62.50%)、肾功能(92.59%和72.73%)和心功能(81.84%和75.00%)的监测和异常再监测。经过治疗后,24例(88.89%)患者临床症状明显好转,22例(81.84%)患者并发症得到控制。结论 DUR联合DUE可更好地评价慢性阻塞性肺疾病患者的用药情况,及时发现用药不合理的现象,促进医院药品的合理使用。     

高同型半胱氨酸血症对 ApoE －／－鼠心脏内质网应激的影响

目的：探讨高同型半胱氨酸血症（ HHcy）对ApoE－／－鼠心脏内质网应激（ ERS）的影响及其可能机制。方法取5周龄雄鼠12只作为正常对照组;另取5周龄雄性ApoE－／－小鼠36只,随机分为3组,ApoE－／－对照组：ApoE－／－小鼠饲以普通饲料配方饮食;高蛋氨酸组：ApoE－／－小鼠饲以高蛋氨酸饮食;干预组：ApoE－／－小鼠饲以高蛋氨酸饮食同时加0.006％叶酸和0.0004％维生素B12。喂养20周后处死,行主动脉病理切片HE染色观察主动脉是否有斑块形成;取心脏,采用实时荧光定量PCR法检测GRP78、CHOP、Caspase－12 mRNA的变化;巢式降落式甲基化特异性PCR检测GRP78和CHOP启动子区DNA甲基化水平。结果正常对照组及ApoE－／－对照组斑块不明显,高蛋氨酸组动脉粥样硬化斑块面积明显增大,主动脉内膜可见灶性病变部位隆起突入动脉腔内,干预组动脉粥样硬化斑块面积较高蛋氨酸组有所减轻。与ApoE－／－对照组比较,高蛋氨酸组GRP78、CHOP、Caspase－12 mRNA水平明显升高（P＜0.05,P＜0.01）,干预组GRP78、CHOP mRNA水平较高蛋氨酸组降低（P＜0.05）。与ApoE－／－对照组比较,高蛋氨酸组GRP78、CHOP启动子区DNA甲基化水平降低（P＜0.01）,干预组GRP78、CHOP甲基化水平较高蛋氨酸组有所升高（ P＜0.05）。结论 HHcy可能通过影响DNA甲基化程度引起ERS相关基因表达改变,进而导致心肌细胞凋亡,补充叶酸与维生素B12可有效缓解HHcy所引起的ERS和凋亡。     

枸杞油对哈白兔抗氧化功能的影响

目的 研究枸杞油对哈白兔抗氧化功能的影响.方法 分别以高胆固醇饲料加用生理盐水、脂比妥,低、高剂量枸杞油饲养哈白兔,在15、25、35、45、56d时股动脉采血,检测血清中SOD、GSH-Px、T-AOC、MDA含量.结果 56d后,高脂模型组血清SOD、GSH-Px、T-AOC明显低于各组,而MDA明显高于各组;正常对照组、阳性对照组、低剂量组之间,SOD、GSH-Px、T-AOC、MDA差异无统计学意义;高剂量组血清内SOD、GSH-Px、T-AOC明显高于各组,而MDA明显低于各组.结论 枸杞油能够提高机体抗氧化能力,降低体内脂质过氧化作用.     

中医综合方案维持疗法对晚期非小细胞肺癌患者生存期的影响北大核心CSCD

目的观察中医综合方案维持疗法对晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者无进展生存期(progression-free survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS)的影响。方法采用前瞻性、随机对照研究方法,将69例晚期NSCLC一线治疗后疾病无进展患者随机分成治疗组(34例)和对照组(35例),对照组采用单药化疗(吉西他滨或培美曲赛多西紫杉醇),治疗组采用中医综合方案维持疗法(中药汤剂、中药静脉制剂及穴位敷贴),21天为1个周期,治疗直至疾病进展或出现不能耐受的毒副反应或患者拒绝继续治疗,治疗结束后定期随访患者生存期。结果两组中位维持治疗周期均为2个周期,差异无统计学意义(P=0.274);治疗组中位PFS为12.43周,对照组为10.00周,差异有统计学意义(P=0.025);治疗组中位生存期(middle survival time,MST)为18.80个月,对照组为16.73个月,两组比较,差异无统计学意义(P=0.437)。结论中医综合方案维持疗法延长患者生存期的疗效与单药化疗维持治疗相当。