脂肪酸结合蛋白4在Hcy致泡沫细胞胆固醇聚积中的作用

目的探讨脂肪酸结合蛋白4(FABP4)在同型半胱氨酸(Hcy)致泡沫细胞胆固醇聚积中的作用和意义。方法体外复制THP-1单核细胞/泡沫细胞模型,油红O染色验证模型复制是否成功,给予100μmol/L Hcy处理细胞24 h后,实时定量PCR和Western blot检测泡沫细胞中FABP4 mRNA和蛋白的表达;体外构建FABP4过表达载体,双酶切法鉴定;转染FABP4至泡沫细胞,荧光倒置显微镜观察转染效率;胆固醇检测试剂盒检测细胞内胆固醇聚积情况。结果油红O染色显示泡沫细胞质内充满了大量红染脂质颗粒,胞核呈蓝色,且100μmol/L Hcy处理后细胞内胆固醇含量升高了2.4倍(P0.01);实时定量PCR结果显示100μmol/L Hcy处理后泡沫细胞中FABP4 mRNA表达上调(P0.01);Western blot检测结果显示FABP4的蛋白表达与其mRNA表达变化一致(P0.01)。FABP4过表达载体转染细胞后,可见大量绿色荧光蛋白表达;重组质粒组泡沫细胞中FABP4的表达水平明显升高(P0.01),细胞内胆固醇含量升高1.9倍,差异具有显著性(P0.01)。结论 FABP4表达上调可能是Hcy致泡沫细胞胆固醇聚积的重要机制之一。     

非小细胞肺癌术后多元化辅助治疗模式的研究进展

可手术切除Ⅱ-Ⅲa及Ⅲb（T3N2M0）期（IASLC/UICC第8版TNM分期）非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）推荐术后辅助化疗,但化疗毒性难以避免,且患者生存获益有限,仍具有较高的复发转移和死亡风险。在精准医疗时代,表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor,EGFR-TKI）开启个体化辅助治疗的新篇章。本文将对NSCLC术后辅助化疗、放疗、EGFR-TKI靶向治疗、抗血管生成治疗、免疫检查点抑制剂治疗及中医药治疗进行综述,多元化辅助治疗模式的探索有望延缓术后复发转移,使NSCLC患者生存获益最大化。     

糖尿病并发症相关性氧化应激的实验研究

目的链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠1型糖尿病模型的基础上,探讨糖尿病氧化应激指标的变化。方法采用一次性腹腔注射STZ的方法,监测不同时点大鼠的空腹血糖、体质量及血浆中的丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)等指标,并对结果进行统计学处理。结果大鼠注射STZ 72h后血糖值达到成模标准,并逐渐出现糖尿病表现,观察7周,始终满足成模标准,未见转复。DM组大鼠肾脏及肝脏肥大指数较CON组显著增加。氧化应激相关指标测定表明,较对照组相比,实验组大鼠血浆中脂质过氧化产物MDA水平显著升高,而SOD水平显著下降。结论本实验Ⅰ型糖尿病模型大鼠造模成功且模型稳定,氧化应激指标改变。     

TLR4/NF-κB信号通路在同型半胱氨酸致内皮细胞损伤中的作用研究

目的:Toll 样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)/核因子-κB(Nuclear factor kappa B,NF-κB)在同型半胱氨酸(Homocysteine,Hcy)致动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)过程中损伤内皮细胞的作用机制.方法:体外培养原代人脐静脉内皮细胞...     

PSMD10在同型半胱氨酸激活肝细胞自噬促进肝脏损伤中的作用机制研究

Aim To discuss the mechanism of proteasome 26S subunit non-ATPase 10(PSMD10) activating hepatocyte autophagy and promoting liver injury by in homocysteine. Methods Wild mice and cystathionine β-synthase (CBS) gene knockout mice were used and divided into normal (cbs^+/+, n = 8) group and gene knockout (cbs^+/-, n = 8) group, and the mice were fed with high methionine diet for eight weeks. Serum levels of AST and ALT were detected by automatic biochemical analyzer. The expression changes of autophagy-related proteins LC3B, p62 and PSMD10 in mouse liver were detected by Western blot. The expression of PSMD10 mRNA in mouse liver was detected by qRT-PCR. For cells, HL-7702 hepatocytes were cultured in vitro, divided into control group and Hey group;AST and ALT levels were detected by ELISA. The expression changes of autophagy-related proteins LC3B, p62 and PSMD10 in hepatocytes were detected by Western blot. The expression of PSMD10 mRNA in hepatocytes were detected by qRT-PCR. Hepatocytes were transfected with PSMD10 siRNA, Hey intervention for 48h or transfected PSMD10 overexpressed adenovirus, Western blot was used to detect the expression of autophagy-related proteins LC3B and p62, then AST and ALT levels were detected by ELISA. Results For animals, compared with cbs^+/+mice, the levels of AST and ALT in cbs^+/-mouse serum were significantly upregulated (P < 0. 05), the ratio of LC3 II/I increased significantly in cbs^+/-mouse liver (P < 0.01), p62 expression decreased (P < 0. 01), and PSMD10 mRNA and protein expression levels increased significantly(P <0. 05). For cells, compared with control group, the expression levels of AST and ALT in Hcy group increased significantly (P <0. 01), the ratio of LC3 II/I increased (P < 0. 01), the expression of p62 decreased (P < 0. 01), and the PSMD10 mRNA and protein expression levels increased significantly (P<0. 05). Used PSMD10 siR-NA to knock down the expression of PSMD10, compared with Hcy + siNC group, the ratio of LC3 II/I decreased (P < 0. 01), the expression of p62 increased (P <0. 01), and the expression levels of AST and ALT decreased markedly (P < 0. 01). When overexpressed PSMD10, compared with ad-GFP group, the LC3 II/I ratio increased significantly (P < 0. 01), p62 protein expression decreased significantly (P < 0. 01) and AST and ALT expression levels increased evidently (P < 0. 01). Conclusions Hcy leads to excessive autophagy of hepatocytes and liver damage by up-regulation of PSMD10. © 2021 Publication Centre of Anhui Medical University. All rights reserved.     

扶正解毒法联合盐酸埃克替尼治疗老年晚期肺腺癌的临床研究

[目的]观察扶正治癌辨证汤药联合埃克替尼对老年晚期肺腺癌患者的疗效和安全性。[方法]采用前瞻性随机对照的方法,纳入74例老年晚期肺腺癌患者,分为治疗组[中医扶正治癌辨证汤药（每日1剂）联合埃克替尼（125 mg,每日3次,口服）]和对照组（[单用埃克替尼（125 mg,每日3次,口服）],观察两组治疗后的不良反应及生活质量,统计疾病无进展生存期（PFS）。[结果]1）随访至2018年9月30日,两组未出现进展的病例数分别为治疗组4例,对照组4例,两组的中位PFS分别为15.4月vs 11.13月（P>0.05）;亚组分析中,一线埃克替尼治疗者,两组mPFS分别为16.90个月vs 13.13个月（P<0.05）。2）毒副反应：两组治疗后的主要不良反应是皮疹、腹泻、肝损、口腔溃疡,其中治疗组口腔溃疡的发生情况低于对照组,差异有统计学意义（P<0.05）。3）治疗1个月后,治疗组较治疗前的各功能领域得分上升（P<0.05）,疲倦、疼痛、气促、失眠等症状领域得分下降（P<0.05）,经济困难领域得分无变化,肺癌子量表中气促、咳嗽及其他部位痛得分下降（P<0.05）;对照组治疗后的各功能领域中情绪功能、认知功能、社会功能领域得分上升（P<0.05）;疼痛、气促、食欲丧失、便秘等症状领域治疗后得分均下降（P<0.05）;肺癌子量表中,口腔溃疡领域得分上升（P<0.05）,咳嗽得分下降（P<0.05）。组间比较提示：治疗组较对照组躯体功能及总健康状况得分高,差异有统计学意义（P<0.05）;肺癌子量表中,治疗组较对照组在口腔溃疡得分低,差异有统计学意义（P<0.05）。[结论]扶正治癌辨证汤药可在一定程度上提高埃克替尼治疗老年晚期肺腺癌的临床疗效,可以延长埃克替尼一线治疗老年肺腺癌的疾病进展时间,并且不增加肝肾毒副反应,改善埃克替尼治疗后引起的口腔溃疡。     

氧化苦参碱对感染性休克大鼠肾组织JAK2/STAT3信号通路的影响

目的: 观察氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对感染性休克大鼠肾组织JAK₂/STAT₃信号通路的影响。方法: 采用大鼠盲肠结扎穿孔法(cecal ligation and puncture,CLP)复制大鼠感染性休克模型,随机将56只SD大鼠分为假手术组、OMT对照组、模型组(CLP)、CLP+OMT高、中、低剂量组(52,26,13 mg·kg^-1)、阳性对照组(CLP+地塞米松10 mg·kg^-1)。光镜下观察大鼠肾组织病理学改变,采用尿酶法测定血清尿素氮(BUN)含量,RT-PCR法测定肾组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β) mRNA的表达;Western blot测定肾组织JAK₂,STAT₃的表达;放射免疫分析法测定肾组织匀浆中TNF-α及IL-1β蛋白含量的改变。结果: 不同剂量的OMT能抑制肾组织JAK₂,STAT₃的活化(P<0.05),减少JAK₂,STAT₃的蛋白表达(P<0.05)及TNF-α,IL-1β mRNA的表达(P<0.05),降低肾组织匀浆中TNF-α及IL-1β的含量(P<0.05),降低血清BUN含量(P<0.05),改善肾组织充血、水肿和炎性细胞浸润等病变,并且该作用在OMT高、中剂量组与阳性对照组的结果相一致。结论: OMT能通过抑制JAK₂/STAT₃信号通路的活化,减少肾组织TNF-α,IL-1β等促炎因子的表达,进而对感染性休克大鼠肾损伤性病变发挥治疗作用。     

同型半胱氨酸引起平滑肌细胞LDLR启动子区DNA甲基化改变的位点分析

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)引起平滑肌细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)启动子区DNA甲基化改变的特点及机制。方法原代培养人脐静脉平滑肌细胞(VSMCs)并鉴定,用50、100、200、500μmol·L-1Hcy干预,巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)法检测LDLR甲基化改变,甲基敏感性限制性内切酶HpaII和BssHII分析LDLR DNA甲基接受能力。结果 50、100、200、500μmol·L-1Hcy组平滑肌细胞LDLR启动子区DNA去甲基化(P<0.05),经限制性内切酶HpaII消化后,LDLR启动子区C↓CGG序列被酶切,经限制性内切酶BssHII消化后,LDLR启动子区GC↓GCGC序列被酶切,与对照组比较,DNA甲基接受能力下降,其中HpaII引起的效果更明显。结论 Hcy可使平滑肌细胞LDLR启动子区DNA去甲基化的效应偏重于一般的CpG二核苷酸序列,CpG岛所受影响相对较小。     

2005年～2006年我院口服降血糖药物应用分析

目的分析我院口服降血糖药物的临床应用情况及趋势。方法对2005~2006年我院各类口服降血糖药物的用药频度(DDDs)和金额及单品种DDDs前10位排序进行统计分析。结果口服降血糖药物用药金额和DDDs增长明显,DDDs排序在前的是价廉和常用的药物,其中双胍类和促胰岛素分泌剂为首选,二甲双胍、瑞格列奈用量大,疗效确切、安全、费用较低、用药方便及依从性好。结论我院降血糖药物的应用基本合理,且新型降血糖药物已经被患者接受。