副血链球菌fap1-orf4基因座位编码的GTF和ORF4的功能与相互作用的研究

目的 研究副血链球菌(Streptococcus parasanguis)fap1-orf4基因座位编码的葡糖基转移酶(GTF)和开放阅读框架(ORF)4是否参与菌毛相关蛋白1(Fap1)的糖基化与成熟以及两种蛋白质之间的相互作用.方法 采用基因置换技术构建副血链球菌gtf和orf4突变株,并利用互补分析和Western blot检测副血链球菌Fap1的表达水平,用以评价GTF和ORF4在Fap1的糖基化和成熟的作用,另外采用酵母双杂交技术、GST pulldown技术检测GTF和ORF4两种蛋白质的相互作用.结果 (1)副血链球菌gtf和orf4的突变株呈现相同表型,成熟的相对分子质量(M)约220×103的Fap1被高相对分子质量不成熟的Fap1(Mr约360×103)所取代.互补分析显示pVPT-GFP-gtf和pVPT-GFP-orf4能使突变株恢复表达成熟的Fap1;(2)酵母双杂交技术的划线试验显示共转化子AH109/pAD-gtf+pBD-orf4和AH109/pAD-00f4+pBD-gtf均能在营养缺陷的选择性培养基SD-LTHA上生长,而共转化子AH109/pAD+pBD-orf4、AH109/pAD+pBD-gtf、AH109/pBD+pAD-orf4、AH109/pBD+pAD-gtf不能在营养缺陷的培养基上生长;酵母双杂交技术的X-α-ga1试验显示共转化子AH109/pAD+pBD-orf4和AH109/pAD-orf4+pBD-gtf呈现蓝色.(3)GST pull down技术进一步证实GTF和ORF4两种蛋白质之间存在直接的相互作用.结论 副血链球菌fap1-orf4基因座位编码的GTF和ORF4之间存在相互作用,GTF和ORF4组成复合物是Fap1成熟与糖基化所必需的.     

全喉切除术中保留甲状软骨膜对手术进程和术后恢复影响的探讨

目的：探讨保留甲状软骨膜对全喉切除手术进程和病人术后恢复情况的影响。方法：在甲状软骨膜下游离甲状软骨并切断其上角。不结扎和切断舌骨下肌群和喉上动脉。保留之甲状软骨膜用以加强修复咽壁黏膜。结果：本组病例较经典全喉切除术手术时间缩短30min以上。手术中出血在100ml以下。患者术后第2d下床活动，第4d开始进食流质。手术创口均一期愈合。结论：全喉切除术中保留甲状软骨膜可有效地简化手术步骤，减少创伤和出血。利用甲状软骨膜加强咽壁黏膜缝合口，进一步减少了咽漏的发生.     

静息时或运动后Q—Tc延长诊断冠心病价值的探讨

用自行设计的踏车多指标心血管功能评价系统(E系统),对正常人,冠心病患者、心肌梗塞患者三组进行踏车运动前后Q—Tc变化及运动前后心血管功能评定。对静息时或运动后Q—Tc延长诊断冠心病价值及运动前后心血管功能变化规律的敏感性、特殊性分别进行对照和探讨。     

穴位埋线联合健脾祛湿中药对肥胖并发高脂血症脂质代谢及内脏脂肪的影响

目的 探讨穴位埋线联合健脾祛痰中药对肥胖并发高脂血症脂质代谢内脏脂肪的影响及可能机制。方法 选取40例肥胖并发高脂血症患者随机分为两组,针药组20例(穴位埋线每月1次联合加减参苓白术散日1剂,2次/d,早晚服用),中药组20例(加减参苓白术散服用方法同上),两组疗程均为3个月,观察两组治疗前后肥胖指标：体质量、体质指数(BMI)、腰臀比、体脂百分率(F%),肥胖度(A%);血脂指标：总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C);内脏脂肪指标：内脏脂肪指数(VAI)变化。结果 针药组和中药组在治疗肥胖总有效率均能达到85%以上,且针药组略高于中药组。与治疗前相比,针药组、中药组均能降低肥胖指标和内脏脂肪指标,并能改善血脂指标(P<0.05)。与中药组相比,针药组治疗后在降低肥胖指标、内脏脂肪指标及改善血脂指标方面效果更加显著(P<0.05)。结论 针药组与中药组治疗均有减肥降脂作用,针药联合使用具有协同作用,临床效果更明显,穴位埋线联合健脾祛湿中药法可能通过调节“脂肪-胰岛素轴”,改善胰岛素抵抗,降低胆固醇的合成,从而纠正患者脂质...     

医学院校公共事业管理专业学生胜任力评价指标体系构建及评价

目的构建医学院校公共事业管理专业学生胜任力评价指标体系,为评价学生胜任力提供参考依据。方法综合文献研究结果和小组意见,拟定医学院校公共事业管理专业学生胜任力评价指标体系,采用德尔菲法两轮咨询,对专家积极程度、意见集中程度、权威程度及协调程度进行评价。结果共有21名不同职业专家参加,两轮有效回收率为100%。专家权威系数为0.80,专家意见集中程度较高。第二轮问卷的各指标变异系数平均波动于0.06~0.20,最终建立由自我能力提升、职业能力、关系管理能力、职业情谊、个性特质5个一级指标、24个二级指标构成的指标体系。结论经过两轮专家咨询,专家意见趋于一致,协调程度较高,建立的指标体系可用于医学院校公共事业管理专业学生胜任力评价。     

心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响

目的： 研究心肌肽素对豚鼠心室肌细胞钠通道的影响，探讨心肌肽素在离子通道水平的作用机制。 方法： 用急性酶解分离法获得豚鼠心室肌细胞，标准全细胞膜片钳技术记录钠电流(I_Na)。 结果： 心肌肽素1、5、10、50、100、500 mg/L使豚鼠心室肌细胞I_Na分别减少(0±1)%、(6±2)%、(10±2)%、(15±1)%、(22±9)%、(30±6)%，呈浓度依赖性抑制I_Na。心肌肽素50 mg/L使I_Na激活时间(TTP)从(2.8±0.7) ms延长至(3.0±0.8) ms (P<0.05)；使I_Na电流密度-电压曲线上移，但不改变激活电位、峰电位、反转电位和I-V曲线的形状；不影响稳态激活曲线、稳态失活曲线和稳态失活后恢复曲线。 结论： 心肌肽素浓度依赖性抑制豚鼠心室肌细胞I_Na，可能是其抗心律失常作用的机制之一。     

越南人参皂苷R7抑制LPS及TNF-α联合诱导大鼠星形胶质细胞C6的激活作用研究

该研究旨在探讨越南人参皂苷R7(R7)对LPS及TNF-α联合诱导下大鼠星形胶质细胞C6的激活抑制作用及机制。取对数生长的C6细胞,在无血清的DMEM培养基中饥饿培养24 h后,使用0.25%胰酶将其消化收集,按1.5×106个/mL密度接入培养板中培养过夜。实验分组如下:对照组(无药物处理),模型组(LPS 1 mg·L~(-1),TNF-α10μg·L~(-1)处理24 h),给药组(分别用6.25,12.5,25,50,75μmol·L-1R7,4μmol·L~(-1)L-NMMA预处理2 h后,再经过LPS 1 mg·L~(-1),TNF-α10μg·L~(-1)刺激24 h)。处理之后,CCK-8法检测细胞活力,Griess法检测培养基中NO含量,ELISA法检测培养基中IL-6,TNF-α浓度,实时定量PCR法检测细胞中相关炎症基因的表达,双荧光素酶报告基因法检测细胞中NF-κB信号分子的激活。研究发现,与模型组相对比,R7量效相关性降低C6细胞的NO释放水平,其IC50约为34μmol·L~(-1);同时,R7减少LPS及TNF-α刺激造成的细胞增殖。50μmol·L-1R7可以显著降低iNOS(P0.001),TNF-α(P0.001),IL-1β(P0.05)以及COX-2(P0.001)的基因表达,不能下调IL-6的基因表达,但可以减少TNF-α(P0.001)及IL-6(P0.001)的释放。进一步的研究表明,不同剂量R7(25,50,100μmol·L-1)均可显著抑制NF-κB转录活性(P0.05,P0.01及P0.001)。研究表明,R7可以抑制LPS及TNF-α联合诱导炎症因子基因表达及分泌,其作用可能与其抑制NF-κB转录活性相关,提示其在神经炎症相关中枢神经系统疾病中可能的治疗作用。     

大肠杆菌半胱氨酸合成途径强化对谷胱甘肽生物合成的影响

谷胱甘肽（Glutathione,GSH）是一种细胞中广泛存在的活性巯基短肽,因其具有重要的生理活性功能而得到广泛关注。通过在Escherichia coli MG1655中过表达3-磷酸甘油酸脱氢酶（PGDH）和丝氨酸酰基转移酶（SAT）,并与来源于Actinobacillus succinogenes的谷胱甘肽双功能合成酶GshF串联表达,成功构建了半胱氨酸合成途径强化的重组菌株。摇瓶发酵结果显示,在含有5 g/L葡萄糖的LB培养基中,重组菌株的生长相对于原始菌降低,但其GSH的产量达到了0.97 mmol/L,为原始菌的1.56倍,表明通过增加GSH合成前体半胱氨酸的供应可以显著提高GSH的生物合成水平。     

辨证论治中风患者便秘

概述中风患者常见并发症便秘的治疗现状,探讨中医药治疗中风患者便秘的可行方法,根据中医学对中风病痛机的认识,认为中风病便秘的辨证可分为3型,即虚秘（阴虚便秘、气秘）、火秘、痰秘,并根据辨证提出了各型的中医中药治疗方法,以期与各位同行探讨。     

妇产科术后血栓性疾病3例报道

下肢深静脉血栓(deep venous thtombosis,DVT)是妇产科手术后并发症之一,若认识不足、处理不及时,可继发肺栓塞,危及生命,以下3例在1个月内相继出现,现报道如下.