曲尼司特对环孢素A慢性肾毒性大鼠肾间质骨桥蛋白表达及巨噬细胞浸润的影响

目的观察曲尼司特对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠肾功能及肾脏病理的影响。方法选取四川大学华西医院于2005年9月至2006年2月给低盐饮食SD大鼠灌胃20mg/(kg.d)剂量的CsA,制作大鼠CsA慢性肾毒性模型,同时喂饲400mg/(kg.d)剂量的曲尼司特。于治疗第1、2、4周末观察肾脏病理变化,并测定骨桥蛋白(OPN)、单核巨噬细胞抗原(ED1)的表达。结果曲尼司特能明显改善慢性CsA肾毒性大鼠的体重下降,减少肾小管上皮细胞空泡变性和细胞坏死及间质炎细胞浸润和间质纤维化,对肌酐清除率(Ccr)下降无明显影响;免疫组化结果显示曲尼司特治疗组大鼠肾小管-间质ED1阳性巨噬细胞数量及OPN表达较模型组显著减少(P<0.05)。结论曲尼司特能减轻CsA慢性肾毒性的肾脏病理损伤,这一防治作用与其减少ED1阳性巨噬细胞浸润及下调OPN表达有关。     

苦参碱对大鼠慢性环孢素肾毒性的保护作用的实验研究

目的 探讨苦参碱对大鼠慢性环孢素A(CsA)肾毒性是否具有保护作用及其可能机制.方法 采用大鼠慢性CsA肾毒性模型,将56只SD大鼠随机分为对照组、CsA模型组(CsA 20 mg/kg)、安博维组(安搏维10 mg/kg CsA 20 mg/kg)和苦参碱组(Matrine 100 mg/kg CsA 20 mg/kg),经胃管灌胃,每天1次,实验共4周.于第2周和第4周末两次采集血尿标本进行生化检测,肾组织行常规病理检查和免疫组化检测骨桥蛋白(OPN)、Ectodermal Dysplasia 1(ED-1)表达.结果 与对照组比较,CsA组24 h尿量、小管间质损伤评分、OPN表达和ED-1阳性细胞计数均增加,内生肌酐清除率(Ccr)下降(P均＜0.05).与CsA组相比,苦参碱能下调OPN表达,减少ED-1阳性细胞在肾组织的浸润,减轻肾脏病理改变(P＜0.05).结论 苦参碱对实验性大鼠慢性CsA肾毒性具有一定的保护作用.     

家犬菌痢模型建立成功的几个要点

采用家犬复制菌痢模型的主要理由是:家犬为家畜,温顺易驯,易饲养管理。而且体形大,血流量占体重5.6～8.3％,易采血。就地易获得。尤其是生理特征与人相似,在科学推断上,与人类易比较。但家犬因种属特性对痢疾杆菌有特殊抗力,和人、猴相比,不易感染痢疾。 1985～1986年,作者共选用家犬68只,进行急性菌痢模型复制的实验研究。证明其临床与细菌学实验诊断指标,均符合菌痢标准。家犬被灌注FⅢ型痢疾杆菌后,约4小时开始发病,精神萎靡,反应迟钝,起卧不宁;呷吟或狂吠,鼻尖干热,躬腰竖毛;8小时后出现呕吐、拒食、作排便势、腹泻,少数呈喷射     

大黄酚介导TLR4/NF-κB通路对IgA肾病大鼠肾损伤和免疫反应的调控作用

  目的  探讨大黄酚(CP)对IgA肾病大鼠肾损伤和免疫反应的调控作用。  方法  将大鼠随机分为5组:对照组, IgA肾病模型(IgA)组, IgA+CP低、中、高剂量(2.5、5、10 mg/kg)组,除对照组外,其余组的大鼠采用脂多糖+牛血清蛋白+四氯化碳法建立IgA肾病模型,造模完成后,IgA+CP组腹腔注射不同剂量的大黄酚,对照组和模型组给予等容生理盐水,每天1次,连续给药4周。留取24 h尿液检测尿蛋白含量,取血检测血清肌酐和尿素氮;肾脏组织HE染色和TUNEL染色检测各组大鼠病理损伤和细胞凋亡;RT-PCR和Western blot检测肾组织Caspase-3和Caspase-9表达水平;酶联免疫吸附实验(ELISA)检测丙二醛(MDA)、过氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(Gpx)含量;ELISA和Western blot检测血清和肾组织白介素-1β、-6 (IL-1β、IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)蛋白表达;并采用RT-PCR和Western blot检测Toll样受体4(TLR4)、核转录因子-κB P65(NF-κB P65)表达水平和下游血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)蛋白表达水平。  结果  CP能剂量依赖性的降低IgA肾病大鼠尿蛋白、血清肌酐和尿素氮水平(P < 0.01);改善模型大鼠肾脏组织病理损伤、降低细胞凋亡率(P < 0.01),降低凋亡相关蛋白Caspase-3和Caspase-9的mRNA及蛋白表达水平(P < 0.01);抑制MDA产生的同时,增加抗氧化酶Gpx、SOD活性(P < 0.01);降低IL-1β、IL-6、TNF-α的血清水平和蛋白表达水平(P < 0.01);下调TLR4、NF-κB P65和VCAM-1的表达水平(P < 0.01)。  结论  大黄酚对IgA肾病大鼠起到保护作用,其机制可能是通过TLR4/NF-κB P65信号通路调节IgA肾病的免疫反应,减轻肾损伤。     

LncRNA LINC00958通过靶向miR-490-3p促进甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭和迁移

目的:研究LncRNA LINC00958对甲状腺乳头状癌细胞的影响及其作用机制。方法:TPC-1和K-1细胞分别分成Control、shRNA-NC、shRNA-LINC00958-1、shRNA-NC+inhibitor-NC、shRNA-LINC00958-1+inhibitor-NC和shRNA-LINC00958-1+miR-490-3p inhibitor组。TPC-1和K-1细胞移植的荷瘤鼠分别分为shRNA-NC、shRNA-LINC00958-1、shRNA-NC+inhibitor-NC、shRNA-LINC00958-1+inhibitor-NC和shRNA-LINC00958-1+miR-490-3p inhibitor组。用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC00958和miR-490-3p的表达水平;CCK-8检测细胞活力;Western blot检测蛋白表达水平;细胞划痕实验检测细胞迁移水平,Transwell小室检测细胞侵袭水平,克隆形成实验检测细胞增殖水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00958和miR-490-3p的靶向关系。测定肿瘤质量及体积。结果:相比于正常组织,LINC00958在甲状腺癌组织中高表达;相比于Nthy-ori 3-1细胞,LINC00958在TPC-1和K-1细胞中高表达,miR-490-3p低表达。LINC00958沉默后,甲状腺乳头状癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力显著降低。干扰miR-490-3p表达逆转LINC00958沉默对甲状腺乳头状癌细胞的增殖、迁移和侵袭效果,破坏LINC00958沉默对肿瘤生长的抑制效果。结论:抑制LINC00958表达可抑制TPC-1和K-1细胞增殖、迁移和侵袭能力,其机制与靶向miR-490-3p表达有关。     

曲尼司特治疗肾脏疾病的试验研究现状

曲尼司特(tran ilast)是一种不同于H1、H2受体竞争类抗组胺药的过敏递质阻释剂,最初运用于多种变态反应性疾病。后来发现它还有抗纤维化的作用,作用的靶细胞包括皮肤成纤维细胞、肝脏星状细胞、血管平滑肌细胞、肾间质成纤维细胞等。近年来研究表明曲尼司特对小管间质和小球都具有保护作用,对预防间质纤维化治疗肾小球疾病可能有一定的作用。     

曲尼司特对环孢素A致慢性肾毒性大鼠骨形成蛋白、转化生长因子β1表达的影响

目的观察曲尼司特对环孢素A(CsA)慢性肾毒性大鼠模型肾脏病理改变和BMP-7、TGF-β1表达的影响,以探讨曲尼司特防护CsA慢性肾毒性的可能机制。方法给进低盐饮食SD大鼠灌胃20 mg·kg-1·d-1剂量的CsA制作大鼠CsA肾毒性模型,同时以400 mg·kg-1·d-1剂量的曲尼司特喂饲以预防肾毒性,以10 mg·kg-1·d-1剂量的伊贝沙坦作对照,于治疗第4周测定有关指标。结果曲尼司特能明显减少肾小管上皮细胞空泡变性和细胞坏死,减少间质炎细胞浸润及间质纤维化,免疫组化显示TGF-β1表达下调, BMP-7表达增加,两者呈负相关(P<0．05)。结论曲尼司特能减少TGF-β1表达,增加BMP-7表达,减轻CsA所致的慢性肾脏病理变化。     

三七总皂甙抗肾小管上皮细胞转分化的实验研究

目的探讨三七总皂甙（Panax notoginseng saponins,PNS）抗肾小管上皮细胞转分化（EMT）的分子病理机制。方法将雄性SD大鼠80只随机等分为4组：假手术组、UUO模型组、PNS治疗组和氯沙坦（ARB）治疗组。术后3、7、14天和21天每组随机选择5只大鼠处死,收集肾组织。分别用Western杂交、免疫组化检测α-SMA的表达;用Real-Time PCR检测UUO术后大鼠α-SMA mRNA的表达。结果大鼠肾组织α-SMA表达,对于3d、7d,仅UUO组、PMS组均高于SOR组,其余任意两组比较均相近;14d、21d,仅PNS组与氯沙坦组均相近,其余任意两组比较均不同。UUO组、PNS组、氯沙坦组的时间与α-SMA表达间存在相似的正相关的曲线关系。大鼠肾组织α-SMA mRNAΔCT值,SOR组、氯沙坦组的7d与14d观察值均相近,其他组14d观察值均低于7d。结论PNS能有效下调UUO大鼠肾脏组织α-SMAmRNA及其蛋白的表达,具有抗肾小管上皮细胞转分化的作用。     

外周血SFRP1、SAA检测在早期糖尿病肾病诊断中的价值

目的探讨分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)及淀粉样蛋白-A(SAA)在糖尿病肾病(DN)患者中的表达及早期诊断价值。方法将该院2016年1月至2018年6月收治的144例2型糖尿病(T2DM)患者纳入研究,根据T2DM患者尿清蛋白排泄率(UAER),将其分为单纯T2DM组(UAER<22μg/min,57例)、DN1组(UAER:22~220μg/min,53例)、DN2组(UAER>220μg/min,34例)。另外,将50例同期于该院体检合格的健康者纳入研究并作为对照组。检测4组人群的常规生化指标及SFRP1、SAA水平,分析SFRP1、SAA水平与患者临床特征间的关系,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,探讨SFRP1、SAA检测在DN早期诊断中的价值。结果4组间糖尿病病程、体质量指数(BMI)、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、糖化血红蛋白(HbA1c)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、三酰甘油(TG)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);4组间性别比例、年龄、总胆固醇(TC)水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);SFRP1及SAA水平在对照组、T2DM组、DN1组及DN2组呈依次上升的趋势,组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,DN患者SFRP1水平与FBG、HOMA-IR、HbA1c及TG水平均呈正相关(P<0.05);相关性分析提示,DN患者外周血SAA水平与糖尿病病程、FBG、HOMA-IR及HbA1c水平呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,SFRP1及SAA单独应用于DN诊断的效能以SFRP1更高,两者联合应用能有效提高诊断效能。结论DN患者SFRP1及SAA水平均异常升高,SFRP1、SAA水平与FBG、HOMA-IR及HbA1c呈正相关,两者在诊断早期DN中均具有一定的应用价值。